HPLC 法测定食品接触材料中双酚A 的迁移量

2023-05-19吴少棠

现代食品 2023年4期

◎ 吴少棠

（新亚太检测技术服务（中山）有限公司，广东中山 528400）

作为一种化工有机原料，双酚A 主要用于聚碳酸酯和环氧树脂等高分子材料的加工和生产。多数食品包装材料中均含有双酚A。因此，双酚A 在各类食品包装材料中的迁移量一直是食品检测工作的重点[1]。双酚A 也是一种雌激素，可能与乳腺、前列腺以及生殖系统疾病有关，有诱发癌症的风险。一种简便、灵敏度高且重现性好的分析方法，能够快速对食品接触材料迁移物中的双酚A 进行准确定量分析，对食品接触材料迁移物中双酚A 的限度控制具有重要意义[2]。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

LC-QQQ（安捷伦公司）；E201 型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；分析天平（感量0.1 mg，Lab-103）；涡旋振荡器（合肥艾本森科学仪器有限公司）；恒温恒湿箱（东莞市长星仪器有限公司）；双酚A 标准物质（默克，CAS 号：80-05-7，纯度≥99%）。

乙酸、乙醇、正己烷，购自天津永大化学试剂有限公司。

1.2 食品模拟物

水基：10%乙醇溶液；酸基：4%乙酸溶液；酒精类：20%乙醇溶液；油基食品模拟物：植物油。

1.3 实验方法

1.3.1 样品的制备

参照《食品安全国家标准》（GB 5009.156-2016）中食品接触材料及制品迁移试验预处理方法通则，对于水基样品包装材料选择10%乙醇溶液为食品模拟物；对于酸基样品包装材料选择4%乙酸溶液为食品模拟物；对于酒精类样品包装材料选择20%乙醇溶液作为食品模拟物；油基食品模拟物选择植物油。按照食品安全国家标准（GB 31604.1-2015）食品接触材料及制品迁移试验通则中的迁移实验条件进行试验，收集各条件项下的浸泡溶液。

（1）水基样品的制备。取上述水基样品迁移试验所得溶液，过0.22 μm 微孔滤膜待测。

（2）酸基样品的制备。取上述酸基样品迁移试验所得溶液，过0.22 μm 微孔滤膜待测。

（3）酒精类样品的制备。取上述酒精类迁移试验所得溶液，过0.22 μm 微孔滤膜待测。

（4）油基样品的制备。取油基样品1.0 g，于20 mL 试管中，加入正己烷5 mL，涡旋混匀后，加入50%甲醇5 mL，涡旋混匀。静置5 min 后，取下层水溶液过0.22 μm 微孔滤膜待测。

1.3.2 标准溶液的配置

双酚A 标准贮备液：精确称取双酚A 对照品20 mg，至20 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度线即得，双酚A 对照品标准贮备液的浓度约为1.0 mg·mL-1。

双酚A 标准中间液：精确移取双酚A 标准储备液1.0ml 至100 ml 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度线即得双酚A 标准中液，浓度约10 mg/L。

1.3.3 水基、酸性食品、酒精类食品模拟物标准曲线的绘制

精确量取双酚A 标准中间液0ml、0.01 mL、0.025 mL、0.05 mL、0.075 mL、0.10 mL、0.20 mL，分别至10 mL 容量瓶中，用10%乙醇分别定容至刻度线，即得浓度分别为0.00 ml、0.01 mg/L、0.025 mg/L、0.050 mg·L-1、0.075 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.20 mg·L-1的标准曲线系列溶液。分别精确量取各标准曲线系列溶液各10 μL，在拟定的液相色谱条件下进样分析，记录峰面积。以双酚A 的浓度为横坐标，其峰面积为纵坐标进行线性回归，获得标准曲线。

1.3.4 油基食品模拟物标准曲线的绘制

分别称取1g（精确至0.01g）油基食品模拟物至7 个具塞试管中，精确量取双酚A 标准中间液0 ml、0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、0.07 mL、0.01 mL、0.03 mL，分别至10 mL容量瓶中，用4%乙酸分别定容至刻度线，即得浓度分别为0.00 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.30 mg·kg-1、0.50mg·kg-1、0.70 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1、2.0 mg·kg-1的标准曲线系列溶液。分别精确量取各标准曲线系列溶液各10 μL，在拟定的液相色谱条件下进样分析，记录峰面积。以双酚A 的浓度为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，获得标准曲线。

1.3.5 油基模拟物标准曲线的绘制

分别称取1g（精确至0.01g）油基食品模拟物至7 个具塞试管中，精确量取双酚A 标准中间液0 ml、0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、0.07 mL、0.01mL、0.03 mL，分别至10 mL 容量瓶中，用4%乙酸分别定容至刻度线，即得浓度分别为0.00 mg·kg-1、0.1 0 m g·k g-1、0.30 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1、0.70 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1、2.0 mg·kg-1的标准曲线系列溶液。分别至上述试管中，加入正己烷3 mL，涡旋混匀后，加入50%甲醇水溶液（1+1）3 mL，涡旋混匀。静置5 min 后，取下层水溶液过0.22 μm 微孔滤膜待测。分别精确量取各标准曲线系列溶液各10 μL，在拟定的液相色谱条件下进样分析，记录峰面积。以双酚A 的浓度为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，获得标准曲线。

1.3.6 主要仪器参数

（1）色谱条件。色谱柱选择Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱温：30 ℃；进样量：10 μL；流速：1 mL·min-1；流动相：甲醇和水。洗脱程序见表1。

表1 洗脱程序表

（2）质谱条件。离子源：电喷雾离子源；电离方式：采用负离子扫描；检测方式：选择反应监测模式（SRM）；毛细管加热温度350 ℃；电喷雾电压5.0 kV；离子源鞘气（N2)，30.0 psi；离子源辅助气（N2)，10.0 psi；m/z 扫描范围为200～1 000，全扫描（SCAN）。其他参数见表2。

表2 双酚A 质谱检测条件表

1.3.7 双酚A 的检测限

按照1.3.1 节中的处理方法，采用空白加标溶液测试7 次，并计算各食品模拟物中双酚A 的检测限（S/N=3）。

1.3.8 样品中双酚A 测定的重复性和重现性

分别在水基、酸基、酒精类和油基食品模拟物中添加双酚A，按照1.3.1 节中的实验方法进行处理，并在拟定色谱条件下进行分析测定，可通过不同人员在相同条件下进行重复独立测试，验证其再现性[3]。

1.3.9 样品中双酚A 的加标回收率测定

分别在水基、酸基、酒精类和油基食品模拟物中添加双酚A，按照1.3.1 节中的实验方法进行处理，并在拟定色谱条件下进行分析测定，计算加标回收率[4]。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的测定结果

双酚A 水基食品中线性关系为y = 1,706.214 12 x- 2.979 78，R2= 0.999 82；双酚A 酸性食品中线性关系为y = 3 071.654 73x - 8.417 87，R2= 0.998 81；双酚A 酒精类食品中线性关系为y = 1 167.347 98x - 0.606 55，R2= 0.999.88743；双酚A 油基食品中线性关系为y =531.887 21x - 9.236 34，R2= 0.999 42。不同模拟液双酚A 标准曲线见图1～图4。