非小细胞肺癌中PD-L1 免疫检查点表达与预后的关系研究
2023-05-16姚红方赵艳红任兆强刘训超通讯作者
姚红方 赵艳红 任兆强 刘训超(通讯作者)
(菏泽市立医院呼吸与危重症医学科,山东 菏泽 274000)
肺癌是全球范围内造成死亡的主要原因之一,尤其是非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC),其5 年生存率仅为20%[1-2]。近年来,免疫治疗作为一种新的肺癌治疗手段逐渐得到人们的关注。PD-L1 是一种免疫检查点蛋白,在肺癌等恶性肿瘤中广泛表达。它的主要功能是抑制免疫细胞的激活和攻击肿瘤细胞。虽然ICIs 治疗的临床应用已取得了一定的成功,但其应用仍存在一些限制和挑战,如ICIs 治疗的反应缺乏预测性,ICIs 治疗后患者存在严重的副作用等[3]。免疫检查点的表达与ICIs 治疗的反应密切相关。PD-L1 表达是当前研究中最为广泛的免疫检查点表达标志物,其表达与治疗反应之间的关系并不明确。因此,研究其他免疫检查点的表达,为NSCLC 患者ICIs 治疗的预测和应用提供更全面、准确的指标,成为当前研究的重要方向。本研究,旨在探究多个免疫检查点的表达与NSCLC 患者预后的关系,报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2020 年1 月至2022 年1 月我院60 例非小细胞肺癌患者(均为无法手术治疗的患者)为研究对象。男35 例,女25 例,年龄49 岁~71岁,平均年龄(59.6±7.1)岁。所有患者均被诊断为非小细胞肺癌,并经过组织学检查确认。确诊时,所有患者均无法进行手术治疗。
1.2 方法 选取纳入研究的肿瘤组织标本,使用免疫组织化学(IHC)检测非小细胞肺癌(NSCLC)中PDL1 的表达方法如下:(1)组织样本处理。从NSCLC 组织中切取薄片。组织处理过程中应注意避免组织干燥、坏死和其他伤害。使用10%缓冲福尔马林(PFA)将切片固定,时间为16~24h。固定后的切片保存在70%乙醇中,并在制备切片前去除乙醇。(2)制备组织切片。将固定的NSCLC 组织切割成4~5um 厚度的切片,放置在含有组织胶原蛋白的玻片上。切片应保存在4℃冰箱中,避免在制备过程中产生水分。(3)抗体选择和优化。选择针对目标蛋白的高亲和力、特异性和灵敏度的抗体,优化抗体的浓度和染色时间等参数,以获得最佳的染色效果。(4)免疫组织化学(IHC)染色:将制备好的切片进行去蜡和抗原修复处理。将切片浸泡在2%的牛血清蛋白(BSA)中,加入适当浓度的抗体,允许其在切片上结合一段时间。使用二级抗体或酶标记的聚合物,对抗体进行检测。(5)成像和分析:切片被显微镜下的成像系统记录下来。可使用特定的软件对图像进行分析,以确定PD-1、PD-L1等表达水平。
1.3 观察指标 (1)PD-L1 表达与患者临床特征的相关性;(2)PD-L1 表达与生存期的关系;(3)PD-L1 表达与生存期和治疗反应的关系(95%置信区间:反映了比值比的不确定性,置信区间越窄,说明估计值越可靠);(4)PD-L1 表达与生存期和治疗反应的关系。
1.4 统计学方法 通过SPSS 25.0 软件处理,符合正态分布的计量资料,即通过(±s)表示,组间对比用t检验;计数资料用[例(%)]表示,组间对比用χ2检验;P<0.05 表明组间差异有统计学意义。
2 结果
2.1 PD-L1 表达与患者临床特征的相关性 PD-L1表达水平在年龄、性别和吸烟史上存在一定差异。见表1
表1 PD-L1 表达与患者临床特征的相关性
2.2 PD-L1 表达与生存期的关系 PD-L1 表达水平高的患者平均生存期比表达水平低的患者短,并且具有更窄的95%置信区间。见表2
表2 PD-L1 表达与生存期的关系
2.3 PD-L1 表达与治疗反应的关系 PD-L1 表达水平高的患者治疗反应差异较大,与表达水平低的患者相比,其差异治疗反应的患者数明显增多。见表3
表3 PD-L1 表达与治疗反应的关系
3 讨论
非小细胞肺癌是一种具有高度异质性的肿瘤,其预后和治疗反应常常受到多种因素的影响。近年来,肿瘤免疫治疗(Tumor Immunotherapy)已成为了治疗非小细胞肺癌的重要方法之一。该治疗方法利用患者自身的免疫系统攻击肿瘤细胞,能在一定程度上提高治疗效果和生存率。其中,PD-L1 免疫检查点抑制剂(PD-L1 抗体)是肿瘤免疫治疗中的重要类别之一,已被广泛用于非小细胞肺癌的治疗。PD-L1 免疫检查点抑制剂并不是对所有患者都有效,其疗效在不同患者间存在较大差异。这可能与患者的免疫状态和其他治疗相关因素有关[4]。
本研究中,探讨了PD-L1 表达与预后的关系。结果PD-L1 表达水平在年龄、性别和吸烟史上存在一定差异,且非小细胞肺癌晚期患者中PD-L1 免疫检查点的表达水平与患者的生存期和治疗反应密切相关。PD-L1 表达水平在年龄、性别和吸烟史上存在一定的差异,可见需要为患者制定个性化的治疗方案;PD-L1 表达水平高的患者平均生存期比表达水平低的患者短,并且具有更窄的95%置信区间,表明PDL1 表达水平的高低与患者预后密切相关。PD-L1 表达水平高的患者差异治疗反应的患者数明显增多,表明PD-L1 表达水平的高低与患者治疗反应密切相关。PD-L1 高表达与更差的生存期和更好的治疗反应有关联,表明PD-L1 高表达可能意味着肿瘤细胞更容易逃避免疫系统的攻击。PD-L1 蛋白与PD-1 受体的结合可抑制免疫细胞的活性,降低对肿瘤细胞的攻击能力。因此,PD-L1 高表达可能会抑制免疫细胞的活性,导致肿瘤细胞更容易逃避免疫系统的攻击,导致更差的生存期。当使用PD-L1 抑制剂治疗时,PD-L1 高表达的患者可能会对该治疗作出更好的反应,因为这种治疗可逆转PD-L1 和PD-1 受体的结合,释放出被抑制的免疫细胞,增强免疫系统的攻击能力,这可能导致PD-L1 高表达组患者的更好治疗反应。基于以上结论,我们建议在制定非小细胞肺癌晚期患者的治疗方案时,应充分考虑PD-L1 表达水平的高低,以提高治疗效果和患者的预后。结果显示,PD-L1 免疫检查点可能是非小细胞肺癌治疗和预后的一个重要因素,值得进一步研究和探索[5]。未来的研究应该着重于揭示PD-L1 表达的调控机制和相互作用网络,及其与其他因素(如肿瘤突变负荷、T 细胞浸润、炎症等)之间的关系。
综上,PD-L1 表达水平在年龄、性别和吸烟史等临床特征上存在一定的差异,并且PD-L1 高表达与更差的生存期和更好的治疗反应有关联。因此,在制定个体化治疗方案时,应综合考虑患者的PD-L1 表达水平和其他临床特征,以获得更好地治疗效果和生存期。