县级兽医实验室常用实验仪器设备的使用方法和注意事项

孙 贺，王国岩，崔真爱，庄宝策，费维超

1.永吉县动物疫病预防控制中心，吉林永吉 132200；2.永吉县农村社会事业服务中心，吉林永吉 132200；3.永吉县岔路河镇农业综合服务中心，吉林永吉 132200

县级兽医实验室在我国动物疫病预防与控制体系中有着重要作用，是我国开展动物疫情监控管理的基础平台。兽医实验室不但能为动物疫情监测提供科学精准的技术支撑，还能够为所属区域的动物流行病调查，动物疫病诊断等工作开展提供检验检测支持，让动物疫病预防控制更有效精准。笔者从事兽医实验室动物疫病检测检验工作，结合工作中的经验，总结了兽医实验室常用的设备仪器使用方法及注意事项，为同行提供参考。

1 紫外线消毒灯使用方法及注意事项

紫外线消毒灯的消毒作用来源于两个方面。一是物理消毒，原理是紫外线灯发出的紫外线可以使细菌病毒等微生物的脱氧核糖核酸的结构破坏或者使其发生改变，这样微生物立即失去活性，达到消毒的作用；二是间接化学消毒，原理是185 nm的紫外线能够使空气中的氧气发生化学反应形成臭氧，臭氧能氧化分解细菌内部葡萄属糖所需的酶，使细菌灭活死亡。形成的臭氧能够直接与细菌、病毒作用，破坏它们的细胞器和DNA、RNA，使细菌的新陈代谢受到破坏，导致细菌死亡。紫外线消毒灯使用方便，几乎对所有的微生物都有消杀作用，是兽医实验室必备的消毒装置。

安装了紫外线消毒灯的实验室，紫外线照射消毒5 min左右就可以将衣服等物品上的细菌和病毒杀死，照射30 min可以将空气中的细菌杀死。要根据实验室的面积及举架高低合理设置紫外线消毒灯布置和数量，检测实验开始前50 min或实验间隔的等待时间可作为紫外灯照射时间，注意每次照射时间不应小于30 min，并且在人员进入前10 min关闭，进入实验室要再次确认紫外线灯是否关闭，以免对身体和眼睛造成伤害。紫外线消毒灯管要定期清洁以保证消毒效果，不要用手直接触摸灯管，可以用不易掉毛的毛巾或无纺布喷施酒精之后擦拭。这里需要注意，虽然紫外线消毒方便易操作，但是只能作辅助性灭菌工具，必须按照实验室消毒规定定期消毒。

2 高速冷冻离心机使用方法及注意事项

离心机通过转头高速转动使需要分离的包含不同组分的混合物品发生分离的一种离心设备。兽医实验室中离心机多用于畜禽血清分离，制备红细胞溶液，核酸提取等实验操作中。

离心机要水平放置，检查离心机每个脚座是否都牢靠放置于操作台上。在使用离心机分离血清等操作时，要对称放置待离心样品，若样品不能呈中心对称放置时候，可以利用清水配置一个相似的样品以满足配平的要求。在进行核酸提取的实验过程中要使用高速冷冻离心机，使用前必须要提前开机设定要求温度，关闭离心机盖进行预冷。冷冻离心使用结束后要把转头拆下倒放在实验台上。可用干燥的无纺布或者厨房用纸擦干离心机腔内的冷凝水，建议对于冷冻离心机用后要保持机盖打开状态用以使其内部得到干燥，防止生锈腐蚀机器。离心机转头盖不能浮放在转头上，因为一旦错误启动，转头盖有可能飞出，使转头盖或者离心机内腔破损。在离心机运行时如果发现离心机异常抖动或者发出其他非正常声音，不能关闭按电源（POWER）键或者直接拔出插头，要迅速按停止（STOP）键，停止键有类似“刹车”的效果，可以使转头迅速停止。在放置样品的时候要认真检查待离心样品的试管否有破裂、老化或者裂纹的情况，以免高速离心时试管破裂污染离心机。

3 电热恒温箱使用方法及注意事项

电热恒温箱主要用于细菌、细胞、微生物等物质的培养或者实验室检测反应板的温育，是兽医实验室必备仪器之一。恒温箱多用于兽医检测中的血清学实验的酶标板的温育，或者平衡样品温度时使用。

在使用恒温箱时，要有提前预热的概念，比如要开展猪口蹄疫检测实验时，实验步骤中要求置于37 ℃温育60 min，若没有进行预热，就需要等待温度提高到要求温度，导致检测时间长，或检测结果不准确，所以每次需要使用恒温箱的实验要记得提前开机预热。要按取出时间先后顺序依次将所要温育的反应板摆放在搁板上，各反应板摆放位置要均匀，确保每个需要温育的反应板的温度一致。

恒温箱周围不可放置易燃、易爆物品。每次使用完毕要关闭电源，待恢复室温以后，断开电源，用对金属无腐蚀性的酒精消毒。待酒精完全挥发干燥以后关闭恒温箱门，恒温箱应放在干燥的室内以免加热和控制元件潮湿而影响正常使用。

4 高压蒸汽灭菌器的使用方法及注意事项

高压蒸汽灭菌器原理同我们生活中使用的高压锅类似，通过电能使水加热，产生水蒸气，在密闭的空间内，压力提高，水温提高，最终灭菌器内温度可达到121 ℃，在高温高压的作用下能使细菌或者病毒的有机物质迅速发生不可逆的损坏变性，实现灭菌效果。高压蒸汽灭菌器是保证实验室无菌操作和实现生物安全的基本设备。兽医实验室中常用于实验室废弃物消毒处理，如离心管、移液枪头等实验耗材的消毒处理。

利用高压蒸汽灭菌进行废弃实验耗材灭菌时，开启高压灭菌器电源后，必须先检查水位是否在限定范围内，若水位过低应及时补足水量到合适范围，方可使用。需要灭菌的物品放置不宜过于密集，要确保蒸汽能够流通。使用该设备灭菌后，不能立即进行排气泄压，若违规泄压会导致压力沸点降低，这样封闭的容器内有可能发生剧烈的沸腾，使密封的离心管或其他密封性容器发生爆炸。使用后要等待温度压力降低以后，观察仪器设备仪表或者指示灯，明确提示可以打开方可以开盖。在进行高压灭菌时，操作员不应离开现场，随时观察设备消毒运行情况，发现异常情况随时处理。为了确保灭菌效果，操作员可以采购3M等品牌的专用温度指示胶带，消毒以后如果胶纸上的指示剂变色，如3M的温度指示胶带会出现黑色横纹，则说明灭菌效果是可靠的。高压蒸汽灭菌器产生的高温蒸汽温度可达121.3 ℃，操作人员一定要严格按照使用要求操作，在使用过程中可戴隔热手套以免烫伤。

5 生物安全柜使用方法和注意事项

生物安全柜是生物实验室必备的实验仪器，是兽医实验室开展如非洲猪瘟病毒PCR检测等涉及核酸提取操作的必备实验设备，使用生物安全柜能够有效地保护实验操作者的生物安全。

生物安全柜过滤装置是消耗品，一旦出现过滤器寿命终结的提示，应尽快停止使用，同时检测机器是否存在其他异常。通知厂家专业人员对该设备进行过滤器完整性和气流流速的检测，若不能满足要求，则禁止使用并立即通知相关人员更换空气过滤器。在生物安全柜的实验操作应控制动作幅度，特别是需要手臂移出的时候动作一定要慢、要稳，以免过快过大的动作扰乱气流，使病原微生物外溢。实验所需要的物品尽量放置在正前方，避免经常扭动颈部。在安全柜工作区域中合理摆放物品，减少操作距离。移动物品时使用整个肩膀和胳膊而不要只使用手腕。建议每持续2 h，休息5～10 min舒展和调节肢体，减少疲劳。使用生物安全柜时需做好个人生物安全保护措施，如戴好口罩、面罩等。

在实验结束后要清理生物安全柜的台面，避免造成污垢残留。对于生物安全柜消毒的常规方法可以使用75%浓度的酒精，配合不掉屑的纱布清理为最佳。经过实验人员多年经验，不建议使用脱脂棉类的产品擦拭台面，因为会造成细微棉絮挂在台面上，长时间易滋生细菌。不建议使用含氯的清洁剂，如新吉尔灭等进行擦拭，含氯的清洁剂长期使用会对不锈钢台面造成一定的腐蚀。

如果安全柜发生报警，且常规检查不能解决，那么就要联系专业的维护工程师询问如何解决，由工程师电话或现场指导，进行设备维护等工作。针对过滤器使用寿命到期，需要专业的工程师来进行熏蒸消毒后拆除更换，替换下来的过滤器要作为实验废物做专门处理，不可当作生活垃圾处理。

6 超纯水机使用注意事项

兽医实验室中主要使用超纯水机用于制备超纯水，用来以配制PBS磷酸缓冲液，洗板机用后清洗管路等作用。

通过超纯水取水时，要先放掉20～50 mL的水，为了避免混入空气，可以让纯水沿容器壁流入，这样就可以有效避免溅起水花混入空气。能有效降低空气带来的污染；超纯水机的最终端滤器后请不要连接软管，直接取水才能获得更高纯度的超纯水。不要使用长期储存在储水桶中的超纯水，因为在长期储存过程中，会有杂质、微生物污染水质，有可能会影响最终的实验结果。超纯水机中的过滤装置需要定期更换或清洗，因为滤芯无法自动清洗、排除过滤出的杂质，在杂质长期积累后就会导致出水纯度受到影响。

若是实验室纯水仪出现问题，或者滤芯需要更换而未能及时更换的间期，此时实验室若需使用纯水，最简单的方式就是购买市面上的“娃哈哈”纯净水，该纯净水完全满足兽医实验室所需要纯净水的标准要求。笔者多次使用“娃哈哈”纯净水配制PBS缓冲液，未见对实验结构产生影响。

县级兽医实验室担负着我国基层动物疫病检验化验等动物疫情防控任务，正确科学地使用兽医实验室的设备是影响检验结果的重要因素。基层兽医实验室检验化验人员要不断学习和总结实验设备仪器的使用方法和注意事项，进而提高兽医实验室检测能力，提高检测结果准确率，为我国的县乡动物防疫工作的开展提供精确的实验数据支撑。