鸡球虫病诊断技术与防治方法的研究进展

李 烨

（ 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江 齐齐哈尔 161000 ）

鸡球虫病是一种由艾美耳属球虫引起的常见肠道寄生虫病，呈世界范围内流行，我国已将其划分为三类动物疫病[1]。可感染鸡的球虫有7 种，包括柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）、堆型艾美耳球虫（Eimeria acervulina）、毒害艾美耳球虫（Eimeria necatrix）、巨型艾美耳球虫（Eimeria maxima）、和缓艾美耳球虫（Eimeria mitis）、布氏艾美耳球虫（Eimeria brunetti）以及早熟艾美耳球虫（Eimeria praecox）[2]。

不同种类鸡球虫的致病性、临床症状、病理变化均不同，其中致病性最强的是柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫[3]。成年鸡感染球虫一般不会发病，但可传播此病，是主要传染源；雏鸡感染球虫病一般呈急性发作，精神沉郁、贫血消瘦、排血便，病情严重时病死率可达80%，对养鸡业造成严重的经济损失。因此，准确诊断和科学防控对鸡球虫病的治疗和净化十分重要。本文总结了国内外鸡球虫的流行情况、诊断方法、治疗药物及疫苗的研究进展，以期为鸡场防控相关疾病提供参考。

1 国内外鸡球虫病流行情况

鸡球虫在我国各地均有分布，优势虫种有4种：柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。苏鑫尧[4]对浙江省10个养鸡场共500份粪便样本进行卵囊检测，鸡球虫的感染率为53%，其中以40 日龄以下的雏鸡感染率最高。宋显明等[5]对新疆和田地区共计11 个养殖场的鸡粪便样本进行分子生物学检测，结果显示，艾美耳球虫的总感染率为16.5%。周春炎等[6]对江苏省如皋市17个鸡场的鸡球虫感染情况进行了调查，结果显示，艾美耳球虫的总感染率为65.4%。

鸡球虫病在世界范围内均有流行，包括亚洲、非洲、澳大利亚、美洲、欧洲。Flores 等[7]对韩国共计388 个养鸡场的鸡球虫感染情况进行调查，291个养鸡场为阳性，且肉鸡和散养土鸡比笼养鸡的感染率更高。Alam 等[8]检测了孟加拉国18个肉鸡场粪便样本，并收集卵囊进行鉴定，发现各鸡场样本中均分离出柔嫩艾美耳球虫的卵囊。Nedjima等[9]对阿尔及利亚国贝贾亚地区的35 个鸡场的球虫感染情况进行了调查，其中19个鸡场为阳性，部分农场存在多种艾美耳球虫交叉感染情况，总感染率为54.28%。Godwin等[10]对澳大利亚的260份鸡粪便样本进行检测，结果显示，98%的商品鸡和81%的散养鸡均存在艾美耳球虫感染的情况。Mesa等[11]对哥伦比亚4个地区245个肉鸡养殖场的鸡球虫感染情况进行了调查，其中180个农场存在艾美耳球虫的感染情况。Andreopoulou等[12]对希腊3个地区的42个养鸡场进行了流行病学调查，共检出7种艾美耳球虫，总感染率为85.7%。

2 鸡球虫病的诊断

2.1 诊断方法

病鸡生前可通过采用粪便涂片法或饱和盐水漂浮法检查粪便中是否存在卵囊诊断是否患有鸡球虫病。也可在病鸡死后解剖，刮取肠道黏膜涂片或触片于显微镜下观察，检出裂殖体、裂殖子或配子体即可确诊。目前对鸡球虫的虫种鉴定方法常见的是传统形态学方法，但此方法存在一些弊端，如不易鉴别形态相似、亲缘关系较近的虫种，球虫卵囊分离纯化培养周期较长，浪费人工物力等。因此，近年来开展了许多分子生物学诊断鸡球虫的方法，如常规聚合酶链式反应（PCR）技术、同工酶技术、荧光定量PCR 技术、随机扩增多态性DNA（RAPD）、序列特征性扩增区域（SCAR）、多重PCR 技术、限制性片段长度多态性（RFLP）、扩增片段长度多态性（AFLP）、单链构象多态性（SSCP）等，其中PCR和RAPD技术应用最为广泛[13]。

张黎等[14]采用SCAR方法对山西太谷区某鸡场球虫病的病原进行了分子鉴定，并通过动物试验、卵囊培养试验对卵囊形态、孢子化时间、寄生部位进行确定，最终鉴定此球虫为毒害艾美耳球虫。杨洪静[15]试验建立了一种四重PCR 检测方法，经验证表明该方法灵敏度高、重复性好。Alam等[16]采用PCR方法对孟加拉国地区鸡球虫的ITS1序列进行了扩增，并鉴定出5种鸡球虫。

2.2 与其他疾病的鉴别诊断

鸡组织滴虫病：鸡球虫病与组织滴虫病的相同点为传染性强，患病鸡出现精神萎靡、羽毛蓬乱、排血便等症状，剖检可见盲肠肿胀、肠壁增厚、肠腔内含有血液内容物。区别是组织滴虫病患病鸡的鸡冠发紫，剖检可见盲肠溃疡，肝脏呈紫黑色且表面有坏死灶[17]。

传染性贫血：两者相同点为传染性强，患病鸡精神萎靡、羽毛蓬乱、鸡冠苍白、腹泻。区别是解剖患传染性贫血的病鸡可见肌肉和内脏苍白，肝脏、肾脏肿大，全身淋巴结萎缩[18]。

禽腺病毒病：两者相同点为患病鸡精神萎靡、食欲废绝、羽毛蓬乱、鸡冠苍白。区别是解剖患禽腺病毒病的鸡可见脾脏颜色变浅、质地变脆，肝脏、肌肉有出血点[19]。

3 鸡球虫病的防治手段

3.1 治疗方法

3.1.1 化学药物

目前鸡球虫病的防治方法以化学药物为主。抗球虫药物可分为聚醚离子载体类抗球虫药和化学合成类抗球虫药等两大类[20]。其中聚醚离子载体类抗球虫药主要包括盐霉素、莫能霉素、马杜霉素、那拉霉素、海南霉素、拉沙里霉素等。而化学合成类抗球虫药种类较多，包括磺胺类、酰胺类、吡啶类、胍类、抗硫胺素类、均苯脲类、三嗪类等。Vereecken 等[21]采用尼卡巴嗪、莫能菌素、尼卡巴嗪+莫能菌素组合对柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫的防治作用进行了研究，结果显示尼卡巴嗪和莫能菌素组合的药效最好。韩明政等[22]采用体内试验与体外试验，研究了氢溴酸常山酮对肉鸡球虫病的防制作用。结果显示，此药物体内外试验中均可抑制球虫感染。吕凤霞等[23]对磺胺氯吡嗪钠甲氧苄啶可溶性粉的抗球虫效果进行了研究，结果显示，此药物对球虫病的临床治疗效果较好。关琛等[24]研究了张家口市部分养鸡场鸡柔嫩艾美耳球虫耐磺胺氯吡嗪钠的情况，指出治疗鸡球虫可根据药物敏感性试验结果进行调整，缓解因耐药性对养鸡产业造成的经济损失。

3.1.2 中兽药

由于化学药物易产生抗药性，易造成药物残留。中兽药凭借成分安全、对肝脏损伤小等特点成为近年的新兴产业。中兽药对球虫的作用机制主要有杀虫抑虫、增强机体免疫力、抗菌消炎，常见的抗球虫中药有青蒿、白头翁、苦参、柴胡、常山等。代培培[25]在鸡日粮中添加石榴皮，探讨其对鸡球虫病的防治效果。结果显示，石榴皮具有一定的抗球虫效果，还可保护肠道绒毛的完整性。黄海斌等[26]测试复方中草药和鼠李糖杆菌共发酵物的抗球虫效果，发现此药物可增加体重、减轻盲肠病理变化、降低排出卵囊数。牛彪等[27]研究了青蒿散抗鸡球虫的药效，发现此药物可缓解盲肠病理变化，降低排出卵囊数。廖义潇等[28]研究表明，使用高、中剂量的牛至油-青蒿素复方纳米乳治疗鸡球虫病的效果较好。王建丽等[29]研究发现，使用青蒿、诃子、苦参、柴胡、黄芪、山楂、木香等7味中药组成的复方中药制剂具有一定的抗球虫作用，还可提高肉仔鸡增重。

3.2 疫苗

目前广泛应用的鸡球虫疫苗多为弱毒苗和强毒苗，但此类疫苗存在一些缺点，如强毒苗有可能造成鸡群感染球虫病，弱毒苗研发成本较高。因此，新型疫苗成为研究热点，筛选鸡球虫入侵宿主关键分子更是研发新型疫苗的重点。鸡球虫入侵宿主的关键分子包含微线蛋白、棒状体蛋白、致密颗粒蛋白、热激蛋白、蛋白激酶、表面抗原等。

王雅坤[30]通过试验将柔嫩艾美耳球虫表面蛋白EtCab与重组乳酸杆菌制备疫苗并进行了免疫效果评价，结果显示免疫重组乳酸杆菌疫苗可较好地预防此病。高阳[31]通过转录组学和蛋白质组学鉴定差异表达的基因和蛋白，筛选出EnSAG、Enp25、EnMIC3 蛋白分子，制备重组亚单位疫苗，对其免疫保护效果进行评价。结果显示，此疫苗可减少球虫卵囊，增加鸡群平均体重。毕天奇等[32]制备的堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗对雏鸡具有较好的免疫效果。崔凯玲等[33]研究了白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-2（IL-2）重组融合基因佐剂对鸡球虫活疫苗的增效作用，筛选出最小有效剂量、最优给药方式以及最短免疫间隔时间，为新型鸡球虫疫苗的研发提供了一定依据。

3.3 综合防控措施

球虫病的综合防控措施是基于使用疫苗、天然饲料添加剂、预防性抗球虫药物以及改进圈舍环境的管理方式。保证环境、食水卫生及适当通风，可最大限度地减少卵囊孢子的产生，降低发病率。应制定科学合理的管理制度，加强饲养管理，定期对舍内地面、墙壁、料槽、水槽等进行消毒；分群饲养，养殖密度合适；舍内通风良好，无有害气体，保证鸡舍内温度适宜。此外，有研究表明，饲料中添加益生菌、益生元、有机酸、植物制剂等天然添加剂可提高机体免疫力，防止致病菌和球虫病入侵[34-35]。

4 结论

鸡球虫病传播速度快，对雏鸡危害大，可对养鸡业造成严重的经济损失。本文总结了近年来鸡球虫病的流行情况，综述了鸡球虫病的诊断技术和防治方法的研究进展和应用情况，提出加强饲养管理、合理使用药物和疫苗、加强营养是预防此病的主要措施；一旦出现患病鸡应立即隔离，并对鸡舍进行彻底消毒；根据当地鸡群流行病学和耐药情况选择合理的药物，制定科学的用药方式进行治疗，如联合用药、穿梭用药、轮换用药和中草药等。