罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测CA153的性能研究

于佳 天津医科大学总医院滨海医院 （天津 300480）

内容提要： 目的：研究罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测血清糖类抗原（Carbohydrate antigen，CA）153的性能。方法：于2020年1月～12月在本院住院、门诊患者中选取20份血液样本，参考美国临床实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）系列文件和相关文献，同时与具体工作对罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测CA153的精密度、生物参考区间、线性范围等进行验证与评估。结果：批内精密度变异系数（Coefficient of variation of precision，CV）高、低值分别为2.68%和3.95%，＜1/4CLIA’88TEa（6.35%）；批间精密度CV高、低值分别为3.63%和2.51%，＜1/3CLIA’88 TEa（8.34%）；所测线性范围值与厂家提供范围值相似；CA153符合率为100.00%。结论：罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪测定CA153其检测性能均与厂家提供的相关性能符合，且达到相关质量要求，检测符合率较高，在临床具有较高的参考价值。

近年来，国内医疗技术不断发展，我国医学实验中检验项目逐渐完善，检验项目的方法学性能评估、医学实验室认可是目前检验科研究的重点内容[1]。罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪在临床常用于检测心肌损伤、贫血、肿瘤标志物以及传染病症等多种项目的检测，该检验技术使用了国际先进的电化学发光免疫技术，具有检测结果准确、操作简便、自动化程序高等优点[2]。血清糖类抗原（Carbohydrate antigen，CA）153是目前临床应用较为广泛的癌症诊断与病情监测指标。据调查，仅有各项性能的验证结果均符合要求的新检验仪器设备、检测方式才可在本实验室开展，随后在临床工作中开展服务[3]。因此本文以CA153为例，对罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪进行性能验证，阐述如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

于2020年1月～12月在本院住院、门诊患者中选取20份血液样本，检测CA153。20份样本中男、女各11例、9例，年龄21～75岁，平均（45.27±6.38）岁。

纳入标准[4]：20份样本均无严重溶血、脂血、黄疸等情况。

排除标准：中途转院、死亡患者；不愿意参与本次研究。

1.2 方法

仪器：罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪；检测：检测试剂、校准品、质控品均为罗氏诊断公司生产的原装配套产品。空腹采集受试者2mL静脉血，自凝后离心10min（3000r/min），实施血清分离，将样本置于-20°C冰箱内待检。CA153的临界值是31.3 U/mL，若检测指标超过临界值，则为阳性。

1.3 观察指标与判定标准

精密度评价[5]：选择罗氏公司配套的不同浓度水平的质控品，参考美国临床实验室标准协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）Pl5-A2标准，实验周期5d，每天检测一批样本，重复检测3次，对同批次样本、不同批次样本精密度变异系数（Coefficient of variation of precision，CV）进行计算。同一批次不同样本精密度将质量目标设定在CLIA’88允许总误差（Total allowable error，TEa）在1/4之内，不同批次精密度将质量目标设定在CLIA’88 TEa在1/3之内。

线性范围评价：参考CLSI EP6-A2线性评价方法，分别选取1份低、高浓度样本（L、H），依据仪器所规定线性范围配置不同系列浓度血清。各样本均检测2次，并记录，将预测值设为X，实际值设为Y，使用多项式回归方式进行拟合。

参考区间评价：依据CCLSC 28-A2评价方式，依据标准操作程序（standard operating procedure，SOP）要求在罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪进行检测，对结果进行统计，若两份检测结果均在厂商参考区间范围内，则表示该区间可用于本实验室。

2.结果

2.1 精准度结果

CA153不同浓度相对应的精密度数值，见表1。

表1. CA153不同浓度对应的精密度数值 (U/mL)

2.2 CA153批内、批间精密度验证结果

高、低浓度样本CA153批内CV%均＜1/4CLIA’88，批间CV%均＜1/3CLIA’88，表示此方式精准度与标准要求符合，见表2。

表2. CA153批内、批间精密度验证结果(±s)

表2. CA153批内、批间精密度验证结果(±s)

项目 CV批内低值CV 高值CV 1/4CLIA’88 是否接受CA153 3.95 2.68 6.35 是项目 CV批间低值CV 高值CV 1/3CLIA’88 是否接受CA153 2.51 3.63 8.34 是

2.3 线性范围评价、参考区间评价实验室结果

CA153测量结果为1.06～288.72 U/mL，厂家参考范围1.0～300 U/mL；CA153参考区间0～25 U/mL，结果符合率为100.00%。

3.讨论

电化学发光免疫分析主要特点包括灵敏度高、仪器价格低、可实现自动化等，故该技术已被临床广泛应用并取得了良好效果。根据医学实验室-质量和能力的专用要求，仪器说明书中明确规定的参数均是在设备处于最为理想的状态下进行测定的，但因为每个实验室的水质、电压、温度、湿度等外部因数存在不同程度的差异，同时并非所有实验操作人员操作习惯均一致，因此在检测系统投入使用前各实验室都必须对仪器其性能及参数进行详细的分析和验证[6,7]。《医疗机构临床实验室管理办法》文中明确提出在保证检验分析系统、分析仪器的质量时，必须对其进行相关测试，包括其性能、规定参数等[8]。医学实验室-质量和能力的专用要求同时规定：每个实验室在引进新的检测系统、检测设备时必须对仪器性能进行规范化、针对性的操作分析，同时将验证结果与临床检验标准进行比对，保证其标准符合临床实际应用[9]。

罗氏Cobas601电化学发光免疫分析仪具有较高的灵敏度、准确性，且价格低廉、操作简便，能够实现自动化等优点，已在临床中得以广泛应用。在实际实验室中，对同种样本使用不同仪器检测，其结果可能会存在一定差异，轻则影响诊断、治疗效果，重则引发医患纠纷，因此确保检验结果准确性，是为临床诊断、治疗提供有效理论依据的关键。故依据实验室能力认可需求，各个实验室均需对所检测项目每年实施一次性能验证，进而保障实验性检测结果可靠性、准确性[10]。

CA153是临床诊断恶性肿瘤常见肿瘤标志物，该指标最开始于乳腺癌上皮细胞上发现，其是糖蛋白变异体，一旦细胞发生癌变，则会促进糖基化转移酶活化，进而使细胞表面糖类发生改变[11]。精密度可反映出监测系统分析性能，可对检测系统的重复性进行检验[12]。本文使用罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测CA153，结果显示，批内CV高低值分别为2.68%、3.95%，批间CV高低值分别为3.63%、2.51%，表明该仪器在检测环境中系统重复性符合需求，具有较高的精密度，可满足临床检验的质量标准。另外有研究发现部分仪器参考区间验证结果得出“可以直接引用厂家提供的参考区间作为这些检测指标的参考区间”的结论，但由于临床调试时间较短和样本容量较少、样本局限性较强，故在该情况的试验得出的结果或无法完全反映当地实地检测状况，结果存在一定差异性，在全球范围内也多次出现厂家提供的参考区间与当地实验室使用不契合的情况[13]。因此这种片面的结果不能清晰、完全地反映当地实验室的情况，但在具体实践开展中又需要充分考虑到实践成本及人员精力，故目前均按仪器生产厂家给予的参考区间进行操作[14]。若对仪器的精密度有更高追求，要结合当地实际情况及当地人群设定具体参考区间，而这样则需要设定更加精密的取样人群的取样标准，同时为提升数据的说服力需广泛采集健康人的标本，在更具测定结果结合临床实际标准制定最精确、最符合当地的参考区间，最后再采取最科学的统计方法对其进行归纳并定期对参考区间及仪器性能进行评审。

正确度主要是经过检测定值的质控品，并对其偏倚进行精准计算，若最终结果在厂商规定范围内，则可被确认[15,16]。依据SOP评标标准，可经过对比定值校正品而准确验证正确度。本文高、低浓度样本CA153批内CV%均＜1/4CLIA’88，批间CV%均＜1/3CLIA’88，表明该检测系统检测CA153的正确性可符合要求。精密度是用于评估检测值稳定性的最重要指标之一，该检查也可用于反映操作系统随机误差。精密度的检测是进行仪器性能分析和评价的基础和前提，本次试验的精密度检测主要参照精密度评价程序EP15-A2文件，数值符合临床肿瘤标志物检测指导文件中对精密度的具体要求。

线性范围指试验样本在没有浓缩、稀释等预先处理的情况下可被直接测定出检测物的范围，范围能具体反映性能评价。本次试验在验证试剂线性范围时主要参考临床相关文件，共分析多个不同系列浓度的标本，这些标本基本可对于预期检测范围进行覆盖。本次试验结果提示线性范围良好，线性范围与生产厂家指定的检测范围相差不大，结果符合临床常规实践标准。且本次实验室检测的线性范围与厂家提供的范围相似，分析原因可能为实验室内不同工作人员以及试验技术的差异，均会造成线性范围差异。依据罗氏配套试剂说明说显示，各实验室均应建立各自参考范围，本文研究显示，CA153结果符合率为100.00%，符合要求，能够直接将厂家提供的参考区间作为CA153参考区间。

综上所述，罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测CA153均有较高的精准度，其各个参数均可满足临床需求与实验室有关要求。但本文还存在一定的不足之处，例如样本数量少、研究时间短以及未引用客观性指标等，故在今后研究中可进一步增加样本数、引用客观性指标以及延长研究时间等，以深入研究罗氏Cobas601全自动电化学发光分析仪检测CA153的性能。