超声联合无创产前基因检测早期筛查胎儿染色体异常的诊断价值

孙晓武

胎儿染色体异常在临床较为常见,属于一种先天性疾病。为降低新生儿染色体异常率,确保优生优育,积极开展产前诊断工作十分必要［1］。产前超声属于一种应用率较高的产前诊断方式,具有无创性特点［2］。无创产前基因检测同样具有无创特点,是临床用来判断是否存在染色体非整倍体异常的技术,已被广泛应用于全球［3］。本研究为提高胎儿染色体异常早期筛查准确性,联合应用产前超声与无创产前基因检测方式,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016 年5 月～2019 年2 月于本院进行早期筛查的7234 例孕妇,从中选取624 例需行羊水细胞染色体核型检测的高危孕妇为研究对象。纳入标准：①对本研究知情同意；②自愿参与本研究；③早孕期出现异常超声结构；④均为单胎孕妇。排除标准：①错过最佳羊水细胞染色体核型检测时间；②拒绝接受检查；③因终止妊娠而未行羊水细胞染色体核型检测。624 例孕妇年龄23～45 岁,平均年龄(29.96±3.28)岁；孕周11～16 周,平均孕周(13.28± 1.29)周。

1.2 方法 624 例孕妇均行产前超声、无创产前基因检测及羊水细胞染色体核型检测。

羊水细胞染色体核型检测方式：采用超声仪进行定位,严格遵循无菌操作原则,行羊膜腔穿刺,抽取 20 ml 羊水,行10 min 离心处理之后留取0.5 ml,将其制作成为细胞悬液,然后再加入到培养基中,将其混匀,在37℃温箱中进行开放培养,培养液适时更换,继续进行培养,对羊水细胞生长情况进行观察；将适量秋水仙素加入培养瓶中,促使细胞分裂于中期停止,然后再行37℃低渗、固定、制片、显带以及染色处理,最终获得羊水细胞表本片,之后再行核型分析与计数。

无创产前基因检测方式：采集10 ml 外周血,放置在EDTA 抗凝管内,行血浆分离处理,对血浆内游离DNA 进行提取,行聚合酶链式反应(PCR)扩增处理,获取样本DNA 文库,对其进行高通量检测,将测得的基因序列和人类参考基因组进行对比分析。当样本chr21 T 值≥3 时,便可认为存在较高唐氏综合征风险；当样本chr18 T 值≥3 时,便可认为存在较高18-三体综合征风险［4］。

产前超声检测方式：诊断仪器采用GE Voluson E10 彩色多普勒超声诊断仪,选择二维探头,探头频率设置为1.6～4.5 MHz,检查前嘱咐孕妇充分排空膀胱,检查体位取仰卧位,严格遵循英国胎儿医学基金会标准采集、分析图像,由2 名高资质医生行图像质量控制,行阴道超声检查,选择阴道超声探头,探头频率设置为5～9 MHz,对矢状切面、颅脑横切面、胸部横切面、腹部横切面以及胎儿双侧上下肢切面进行采集,判断胎儿超声结构(马蹄内翻足、腹壁缺损、颅内结构异常、十二指肠闭锁、心脏畸形等)、软指标(脉络丛囊肿、鼻骨缺失、胎儿颈部透明带增厚、肱骨或股骨缩小、肾盂扩张、肠管强回声、心室强光点、脑室扩张等)以及和染色体异常相关的超声指标(静脉导管a 波倒置、三尖瓣反流、额上颌角增大)情况［5］。

1.3 观察指标 将羊水细胞染色体核型检测结果视为金标准,分析无创产前基因检测、产前单独超声检测与联合应用诊断胎儿染色体异常的准确率。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件处理数据。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 羊水细胞染色体核型检测结果 羊水细胞染色体核型检测结果显示,共有54 例染色体异常胎儿,先天性卵巢发育不全(Turner 综合征)、13-三体、18-三体、21-三体综合征胎儿分别有2、4、18、30 例。

2.2 产前超声检测结果 超声检测结果显示,共有156 例染色体异常胎儿,其中胎儿超声结构、软指标以及和染色体异常相关的超声指标异常者分别有52、88、16 例。

2.3 无创产前基因检测结果 无创产前基因检测结果显示,共筛查出62 例染色体异常胎儿,其中13-三体、18-三体、21-三体综合征胎儿分别有8、24、30 例。其中52 例经羊水细胞染色体核型检测分析确诊,13-三体、18-三体、21-三体综合征胎儿分别有4、18、30 例。

2.4 三种诊断方式诊断准确率对比 超声联合无创产前基因检测诊断准确率高于超声检测、无创产前基因检测,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 三种诊断方式诊断准确率对比(%)

3 讨论

早孕期行超声检查的主要内容包括严重结构异常、非整倍体染色体筛查。国际妇产科超声学会(ISUOG)指出［6］,产前超声特别是阴道超声在早孕期胎儿发育状况评价方面具有重要作用。早孕期经超声检查可判断胎儿存活情况,对胎儿大小进行测量,对孕周进行核对,通过测量胎儿颈部透明带增厚,可协助行染色体筛查［7-9］。早孕期胎儿超声筛查染色体异常的常见指标包括额上颌角增大、静脉导管a 波反向、三尖瓣反流、鼻骨缺如、胎儿颈部透明带增厚等［10-12］。本研究中,经超声检查共发现156 例胎儿可能染色体异常,其中胎儿超声结构、软指标以及和染色体异常相关的超声指标异常者分别有52、88、16 例。无创产前基因检测是通过抽取母体外周血来对胎儿游离DNA 含量进行检测,并对染色体异常风险率进行推算。Turner 综合征、13-三体、18-三体、21-三体综合征等均为常见的遗传性疾病,本研究经无创产前基因检测发现,13-三体、18-三体、21-三体综合征胎儿分别有8、24、30 例。本研究将羊水细胞染色体核型结果作为金标准,分析各种方式的诊断准确性,结果发现,超声联合无创产前基因检测诊断准确率高于超声检测、无创产前基因检测,差异有统计学意义(P<0.05)。究其原因,虽然经产前超声能观察到胎儿严重结构异常,但对胎儿染色体异常的检出率尚有待提高,尤其是21-三体综合征胎儿。无创产前基因检测虽然在筛查染色体异常方面的优势明显,能避免宫内感染与流产,但各种可能会对孕妇外周血游离胎儿DNA 产生影响,对测定结果产生影响。故联合应用超声与无创产前基因检测诊断胎儿染色体异常可发挥优势互补作用,进一步提高诊断准 确性。

综上所述,胎儿染色体异常早期筛查中应用超声联合无创产前基因检测的诊断价值显著,可提高筛查准确性。