大鳞副泥鳅皮肤抗氧化酶活性的昼夜节律研究

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用大鳞副泥鳅购买于沈阳市浑南区泥鳅养殖池塘，运回沈阳农业大学水产养殖实验室进行暂养。抗氧化酶活性试剂盒购买于南京建成生物工程研究所。

1.2 试验设计

试验开始前在养殖缸(300L)内加入高锰酸钾消毒，排净后加入100L水，曝气24hrs。选取300尾(5g±0.3g)体质健康的大鳞副泥鳅，分别放入三个养殖桶中，每桶100尾，室内自然光照条件下暂养10d，水温16±0.5℃。暂养期间8:00时和17:00时各投喂1次，投喂量为总质量的1%，投喂1h后换水25%。取样前2d停止投喂。

1.3 测定指标及方法

在24hrs内每4hrs取样一次(00: 00时，04: 00时，08: 00时，12: 00时，16: 00时和20: 00时)，每次取样每个养殖桶随机取2尾，解剖后取皮肤组织，保存于-20℃冰箱待测。主要检测皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)、SOD、GST、GSH-Px、MDA和CAT。实验严格按照试剂盒说明进行操作。

1.4 数据处理

所有数据均采用SPSS26.0软件进行单因素方差分析(One Way ANOVA)，所有分析的显著性水平设定为P<0.05，数据表示为平均值±标准误差。所有图像均在Microsoft Excel中以散点图的形式生成。

2 结果

结果显示，大鳞副泥鳅的抗氧化酶活性呈现明显的昼夜节律。其中T-SOD和GSH-Px在04: 00时出现峰值，显著高于谷值(P<0.05)。GST和T-AOC在00: 00出现峰值，CAT在08: 00时出现峰值，显著高于谷值(P<0.05)。同时，MDA的峰值出现在12: 00时，谷值出现在04: 00时，差异性显著(P<0.05)。

注：每个时间点代表平均值±标准差(n=5)。白色和黑色条分别表示白天和黑夜。NOTE：Each time point represents mean ±S.E.M. (n=5). White and black bars indicate day and night.图1 皮肤组织抗氧化酶活性的昼夜节律Figure 1. Circadian rhythm of antioxidant enzyme activity in skin

3 讨论与分析

水生生物通过内部昼夜节律和外部环境周期的同步变化，调节内分泌和代谢水平，从而适应环境生存。皮肤作为大鳞副泥鳅防御体系的第一道屏障，在抗氧化防御体系中发挥着重要作用。在夜间，大鳞副泥鳅的各种抗氧化酶活性均有提高，说明其在夜晚具有更高的抗氧化能力。众所周知，光照是产生昼夜节律的重要因素。有报道指出，光照与鱼类的生长和生理状态密切相关，如增重率、生长率和抗氧化状态[5-6]，这与该试验结果一致。此外，MDA在机体内的含量过高会产生中毒反应，甚至死亡。该试验中，皮肤MDA含量在光照后迅速升高，12:00时出现峰值。据此推测，这与物种的生活习性相关。大鳞副泥鳅生活在水体的底层，夜间是其活动的高峰期，而长时间暴露在明亮环境中会造成不必要的生理压力，从而导致抗氧化酶活性降低。相类似的结果也在牛蛙和小龙虾研究中有过报道[7-8]。