大白沙鹅鸭疫里氏杆菌病的诊断

梁 琴，梁自芸，李 媛

（广西北海市动物疫病预防控制中心，广西 北海 536000）

2020年7月合浦县石康镇陈某一养鹅场发病，16日龄大白沙鹅，存栏8 000 只，11 日龄发病，每天死十几只，至16日龄已死亡近百只，未免疫禽流感。经实验室诊断，确定为鸭疫里氏杆菌病，经药敏试验，首选大观霉素和氟苯尼考，其次左氧氟沙星和克林霉素；使用时考虑抗生素的剂量、疗程和使用方法，采用单一方式轮换给药，效果显著，现报告如下：

1 临床症状

严重拉稀，喘气蹲地不动，拉黄白色或黄绿色水样带气泡稀粪；脚软难以站稳，站立时摇头晃脑，头颈歪斜转圈；倒退，仰翻卧地，两腿呈划水状,不易爬起；缩颈嗜睡，头歪向一侧呈濒死状态，3 d内死亡；用过强效西林、安普霉素和环丙沙星无效。

2 解剖病变

解剖4 只鹅：肺出血（2/4），心有出血点（1/4），心包混浊（2/4），肝有白膜（3/4），肾肿（4/4）只，胰出血（2/4），直肠、小肠和十二指肠肠壁出血（1/4），脑、脾和气囊未见病变。

3 细菌学检验

3.1 病料涂片染色镜检：

取心、肝和脾分别涂片，革兰氏染色，镜检，未见病原菌。

3.2 细菌分离培养鉴定

无菌操作，分别取病料（心、肝、脾和脑）接种巧克力平板、麦康凯平板和SS 平板，一组烛缸外需氧、另一组主缸内厌氧37 ℃24 h培养，同时接种正常死亡的鹅脑对照，结果只有烛缸内接种脑的巧克力培养基划线处长出细小、凸起、边缘光滑、透明发亮露珠状菌落，生长缓慢。挑取单个菌落涂片，革兰氏染色镜检，见红色两极着色细小短杆菌；挑取另一相同菌落做纯培养。挑取纯培养物在麦康凯平板和SS平板上划线，分别置需氧和厌氧中37 ℃培养24 h，均无菌落，说明纯培养物不是大肠杆菌和沙门氏菌。无菌操作，用生理盐水洗下纯培养菌苔菌落，用接种针蘸取菌液接生化管，置烛缸37 ℃厌氧培养24～72 h，结果：不发酵糖，不产吲哚和硫化氢，硝酸盐还原和西檬氏枸橼酸盐利用阴性，明胶液化和产尿素为不定，氧化酶、过氧化氢酶以及磷酸酶阳性，七叶苷水解酶、透明质酸梅和硫酸软膏素酶阴性；以分离株的核酸为模板，用扩增16 s rRNA编码基因的通用引物进行PCR扩增，将长约1.5 kb的扩增产物测序后，与RA参考菌株的16s rRNA编码基因序列进行比较，序列相似性在99%以上；根据以上结果，确定为鸭疫里氏杆菌。

3.3 药敏试验

药敏纸片购自杭州微生物试剂有限公司。无菌操作，用一次性注射器吸取巧克力平板上洗下的纯培养菌液，分别注入4个TSA平板中；如果培养基较干，静置片刻，待稍吸收，吸取多余菌液，贴药敏纸片，做好标记。20 种药物敏感试验结果：抑菌圈直径20 mm以上的有大观霉素和氟苯尼考；抑菌圈直径15～20 mm的有左氧氟沙星和克林霉素；其他药物（米诺环素、林可霉素、罗红霉素、庆大霉素、诺氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶素、丁胺卡那、红霉素、新霉素、杆菌肽、环丙沙星、恩诺沙星、多西环素、阿莫西林、头孢氨苄）无抑菌圈。综合以上结果，首选大观霉素和氟苯尼考；其次左氧氟沙星和克林霉素；采用单一方式轮换给药，避免耐药性，效果显著。

4 防治

通过改善饲养管理和鹅舍及运动场环境卫生是最重要的预防措施。应经常清扫地面并更换垫料，消除地面的尖锐物和铁丝等，防止造成鹅脚部受到损伤；定期清洗料槽和饮水器，消毒并干燥，保证良好的卫生条件。

育雏期间要保证良好的温度和通风条件，适时调整饲养密度，避免过度拥挤。鹅舍要保证足够的通风，避免舍内氨气等有害气体的蓄积对呼吸道黏膜的刺激和伤害。

保证雏鹅饲料的质量安全，全程饲喂与日龄相适配的营养均衡的全价饲料，注意补充维生素和微量元素等，尽量减少因营养不良或其他应激因素造成机体免疫力降低而发病。

药物预防仍然是防控鸭疫里氏杆菌病的一个主要措施，由于抗菌素广泛频繁地使用，鸭疫里氏杆菌对药物的耐药性越来越多，效果越来越差，需及时对症筛选高敏药物。使用时为避免超量或滥用抗生素，应按照说明书给药，每个疗程在4 d以上，采用单一或者联合方式轮换方式给药。

5 体会和讨论

该群鹅发病于不易发病的夏季，但发病于最易感日龄，解剖病变不典型，发病率不高，无典型的“三周炎”病变，提示临床诊断仍需结合实验室检验；因无与相应血清型对应的疫苗，当日发病即死，提示需及时做药敏试验，筛选高敏药物，尽早预防的重要性。

根据笔者多年经验，病料（心肝脾）直接涂片，革兰氏染色镜检，几乎看不见与纯培养相似的鸭疫里氏杆菌；未见两极着色细小杆菌，不可排除鸭疫里氏杆菌的可能性，结合临床症状和解剖病变，需接种巧克力培养基或TSA培养基，厌氧培养24～48 h予以确定。根据笔者多年经验，挑取心肝脾在培养基上划线，分离成功率很低，很容易污染，大多长出2 个以上菌落且难以区别，难以纯化培养，降低工作效率。从脑分离成功率很高，通常只长出一种菌落，更易分离纯化。感觉上，与鸭相比，鹅的鸭疫里氏杆菌生长较慢。

近年来的研究表明，我国大部分地区鸭疫里默氏菌分离株均有不同程度的耐药性，耐药谱介于5～13种之间（该病例耐药16种），可见鸭疫里默氏菌的耐药性已经变得越来越普遍。

综上所述，鹅的鸭疫里氏杆菌对鹅养殖业影响较大，一旦发生感染，不但给养殖户带来较大的经济损失，还会胁迫到整个地区禽业养殖的健康发展。因此各动物疫病防控部门需加强鸭疫里氏杆菌相关知识的宣传教育，带动当地养殖户对鸭疫里氏杆菌疫病的防控，从而优化养殖质量，促进禽类养殖业的发展。