一款含蓝铜胜肽精华液的制备及其抗皱功效评价

赵绚 王领 刘佳伟

关键词：蓝铜胜肽；抗皱；功效评价

随着社会的进步、科学技术的发展以及生活水平的提高，人们追求天然、绿色、健康安全的意识日渐增强，绿色化、功能化的化妆品深受人们青睐。近年来，以胜肽为主要活性成分的护肤品在市场上比比皆是，其中蛰伏多年的蓝铜胜肽开始重新活跃，频频出现在各种化妆品配方中，被称为“宝藏成分”。

蓝铜胜肽（CopperTripeptide-1，GHK-Cu）为甘氨酰-组氨酰-赖氨酸三肽（GHK）与二价铜离子相结合而成的化合物，因其与水相溶后溶液为蓝色，也被称为“蓝铜肽”[1]。蓝铜胜肽是一种活性三肽，在1973年，由Pickart研究团队首次从“人的血浆里分离纯化而得”[1]。通过进一步的研究，学者们发现Cu2+与蓝铜胜肽之间拥有良好的亲和性，两者间能自发结合从而形成GHK-Cu化合物[2，3]。蓝铜胜肽以GHK为载体，络合和运载Cu2+进入细胞从而发挥相应的作用[2，3]。

铜离子的存在，对自然界中多种生物的生命活动都有着十分重要的作用与功能，包括细胞呼吸作用、抗氧化防御、结缔组织的形成和血液凝固等多种生命活动过程[1-3]。除此之外，蓝铜胜肽具有多种优势：（1）刺激胶原蛋白与弹力蛋白形成，紧致松弛肌肤，逆转老化肌肤变薄，修复保护性肌肤屏障蛋白[4，5]；（2）恢复肌肤修复能力，增加皮肤细胞间黏质产生，改善老化肌肤结构，平滑粗糙肌肤，减少皮肤受损[5]；（3）刺激葡萄糖聚胺形成，增加皮肤厚度，减少皮肤松弛，紧实肌肤[6，7]等。因此，蓝铜胜肽的重要性不言而喻，成功的从众多多肽中脱颖而出，成为护肤品领域的新贵。其抗衰老的原理是蓝铜胜肽可以促进胶原蛋白生成，刺激葡萄糖聚胺合成，而胶原蛋白增长可以增强皮肤弹性，改善细纹，使面部饱满坚实。蓝铜胜肽性情温和兼具多种功效，可抗老、可修复、可抗皱、可抑制脱发、可抗自由基等[7]。多种功效协同作用使其独一无二，成为现下精简护肤的一种有效手段。

材料与方法

01材料与仪器

甘油聚醚-26，北京信诺久恒科贸有限公司；双丙甘醇，北京信诺久恒科贸有限公司；透明质酸钠，华熙生物科技股份有限公司；皱波角叉菜，上海博烁实业有限公司；泛醇，上海理鸿化工科技有限公司；PEG/PPG-17/4二甲基醚，上海理鸿化工科技有限公司；1，2-己二醇，北京信諾久恒科贸有限公司；对羟基苯乙酮，北京信诺久恒科贸有限公司；三肽-1铜，山东济肽生物科技有限公司。

面部影像分析VISIA图像分析软件（Canfied公司，美国）、皮肤弹性测试探头Cutometer（MPA580，德国CK公司）、皮肤显微镜及活性皮肤表面分析系统VisioScan（VC20plus，德国CK公司）

测试产品为含有蓝铜胜肽的化妆品，实验室自制，详见表1。

02含蓝铜胜肽的精华液配方组成及工艺流程

将A相中甘油聚醚-26、双丙甘醇、透明质酸钠、皱波角叉菜进行预分散，后加入剩余其他原料，放入85℃水浴锅中搅拌均匀，搅拌器转速为300r/min，保温30min后降温，当产品温度降至65℃时加入B相中1，2-己二醇和对羟基苯乙酮，搅拌均匀。继续降温，产品温度降至45℃时，加入剩余其他原料，搅拌均匀，得含蓝铜胜肽的精华液。

03方法

3.1受试者筛选

受试者筛选工作参考2015版《化妆品安全技术规范》。受试者的选择遵循人体测试的医学和伦理学标准，所有受试者的测试均必须出于受试者本人自愿，并在测试前签署知情同意书。

招募健康男女受试者30人，年龄为18～45岁，志愿者排除条件符合《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》纳入、排除标准。

3.2产品评价

参照2015版《化妆品安全技术规范》对所制备产品进行安全性、稳定性、感官评价。

3.3产品使用及测试安排

3.3.1实验样品使用方式

受试者每日早晚洁面后，按照产品使用说明使用产品，每次使用0.3g～0.5g（一至两泵）精华，轻轻按摩至吸收，实验期间停用其他抗皱护肤品。

3.3.2测试部位

面部左右脸颊部位。

3.3.3测试指标

面部VISIA图像分析、皮肤弹性数值、皮肤粗糙度数值

3.3.4对照组选择

本研究为面部皮肤抗皱功效测试，对照选择以自身前后对照。将所有受试者使用产品前的皮肤皱纹分值、皮肤粗糙度、皮肤弹性测试数据作为对照，分别在使用产品第14和28天后，测试受试者相应的指标作为实验组。

3.3.5实验流程

①志愿者由研究人员进行筛选，满足入组、排除标准，并且签署志愿者协议书后参加测试，实验开始前48h停用类似功效化妆品。

②实验测试时，清水清洗受试部位，在温度21.0℃±1.0℃，相对湿度50%±10%RH的恒温恒湿环境中，静坐30min之后进行数据采集。填写自评问卷。发放样品和产品使用说明。

③受试者按照使用说明进行使用，周期为28天，分别在第0天、第14天、第28天进行皮肤测试和回访。

3.3.6受试者自我评估（问卷调查）

在第0天、第14天、第28天测试时对受试者进行产品使用评估调查。

3.4数据分析

应用EXCEL软件对各个测量值进行描述性统计，包括数量、最大值、最小值、均值、标准差等。

应用SPSS软件Shapiro-WilkTest方法进行数据改善值正态分布的显著性检验，若Sig.（双侧）>0.05，则呈正态分布，进行配对样本t检验，显著性差异水平α取0.05；若Sig.（双侧）<0.05，则呈非正态分布，进行Wilcoxon检验，显著性差异水平α取0.05，分析使用产品前后皮肤参数是否具有显著性差异。

结果与讨论

01人体功效评价实验结果

1.1皮肤指标分析测试结果

1.2皮肤抗衰指标结果分析

皮肤老化是机体衰老的直接体现，主要表现为皱纹增生、皮肤干燥萎缩、色素沉着和失去弹性等[8]。皱纹和粗糙度是反映肌肤年轻状态的重要指标，皱纹分值和粗糙度值越低，肌肤越光滑，更显年轻态。面部皱纹分值、粗糙度分值测量结果见表2，表3和图1，在测试周期内，与本底值相比，面部皱纹分值和粗糙度分值均呈下降趋势，面部皱纹平均值在第14天和28天时，分别降低10.82%和21.13%，且面部皱纹分值改善表现出显著性差异明显（0.001≤P＜0.01）。另从图2可见，测试者使用样品后面部皱纹明显减少。面部粗糙度平均值在第14天和28天时，分别降低19.91%和32.00%，且在第28天时，面部粗糙度值改善表现出显著性差异明显（0.001≤P＜0.01）。另从图3可见，测试者使用样品后面部粗糙度明显减轻。

1.3皮肤弹性指标结果分析

皮肤衰老过程中皮肤真皮层的变化主要为胶原蛋白减少，成纤维细胞增殖能力下降。皮肤衰老问题主要体现在皮肤粗糙增厚，弹性下降，皱纹增多，出现色斑，皮肤暗淡没光泽[8，9]。补充胶原蛋白，增强弹力蛋白活性，改善皮肤弹性是延缓皮肤衰老的有效方法。面部弹性分值R2、Q1值测量结果见表2，表3和图4，在测试周期内，与本底值相比，面部弹性R2和Q1分值均呈上升趋势，面部弹性R2值平均值在第14天和28天时，分别升高8.57%和13.18%，且在第28天时，面部弹性R2值改善表现出显著性差异明显（0.001≤P＜0.01）。面部弹性Q1平均值在第14天和28天时，分别上升8.63%和12.23%，且在第28天时，面部弹性Q1值改善表现出显著性差异明显（0.001≤P＜0.01）。

通过VISIA面部影像分析和皮肤表面分析可知，测试期内，使用样品后测试者面部皱纹和粗糙度明显减少，表明该测试样品具有一定的紧致肌肤和改善细纹的作用。通过面部弹性数据表明，与本底值相比，皮肤弹性数值呈上升趋势，测试数据表明该样品能够有效提高皮肤弹性，使肌肤紧致。

02受试者主观评价结果

受试者在使用28天后，对面部水润度改善程度满意的占比100%，对面部紧致度改善程度满意的占比96.67%，對面部光泽感改善程度满意的占比96.67%，对面部粗糙度改善程度满意的占比96.67%，对面部弹性改善程度满意的占比100%，对面部细纹改善程度满意的占比100%，对面部整体改善程度满意的占比100%。

结论

蓝铜胜肽具有较好的抗衰老效果，并且可以刺激胶原蛋白与弹力蛋白形成，紧实肌肤及减少细纹，可用于制备具有一定功效的化妆品。本文通过配方设计制备了含蓝铜胜肽的精华液，并运用人体实验法通过30名受试者连续使用该精华液28天的实验数据，进一步验证了其抗皱功效，结果表明含蓝铜胜肽的精华液有明显的补水、提高皮肤弹性的效果，在降低皮肤粗糙度、淡化细纹方面也有显著效果。因此，蓝铜胜肽具有较好的开发价值和开发前景。