血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌术后淋巴结转移中的水平变化及联合检测价值*

田 涛，杨俊省

山东省枣庄市立医院肿瘤科，山东枣庄 277100

食管癌是临床常见的消化道恶性肿瘤，据统计，我国食管癌发病率高达21/10万，且呈逐年升高趋势[1-2]。手术是临床治疗食管癌的主要手段之一，能通过切除癌变病灶达到治疗目的，但由于食管淋巴管分布密集、引流途径复杂，从而导致术后易发生淋巴结转移，进而致使预后较差[3]。及早确诊淋巴结转移、明确转移情况是制订针对性治疗方案的关键所在。血清学指标具有取材方便、检测耗时短等优点，是诊断恶性肿瘤的重要手段，故积极探索较为可靠的血清学指标成为临床热点。神经元特异性烯醇化酶(NSE)属于新型肿瘤标志物，糖类抗原-50(CA-50)是传统肿瘤标志物，胃泌素释放肽前体(proGRP)是激素类肿瘤标志物，三者均被用于多种恶性肿瘤诊断中，具有良好的诊断价值[4-5]。但关于三者在食管癌术后淋巴结转移中的水平变化及联合检测价值仍未明确，本研究拟对此进行研究，并进行生存分析，旨在为食管癌的临床诊断、治疗方案的制订及延长患者生存周期提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年3月至2020年3月本院收治的食管癌术后淋巴结转移患者102例作为转移组(术前无转移，随访6个月发生淋巴结转移)，其中男75例，女27例；年龄27～72岁，平均(52.31±6.22)岁；病变部位：胸上段8例，胸中段62例，胸下段32例；病理类型：鳞癌91例，腺癌8例，小细胞癌3例；临床分期：Ⅰ期10例，Ⅱa期59例，Ⅱb期33例。另选同期食管癌术后无淋巴结转移患者61例作为无转移组(术前无转移，随访6个月未发生淋巴结转移)，其中男48例，女13例；年龄25～72岁，平均(51.56±5.89)岁；病变部位：胸上段5例，胸中段39例，胸下段17例；病理类型：鳞癌56例，腺癌4例，小细胞癌1例；临床分期：Ⅰ期15例，Ⅱa期38例，Ⅱb期8例。两组年龄、性别、病变部位、病理类型差异无统计学意义(P>0.05)；两组临床分期差异有统计学意义(P<0.05)。纳入标准：均经胃镜病理检查证实为食管癌；均接受手术治疗；预计生存期>1年。排除标准：术前已发生淋巴结转移者；合并其他良恶性肿瘤者；存在心、肝、肾等其他重要脏器严重功能不全者；伴有急慢性感染性疾病者；存在自身免疫性疾病者。本研究经本院伦理委员会审批通过。患者及家属均知情，并签订知情同意书。

1.2方法 两组患者于入院当日采集清晨空腹静脉血3 mL，离心处理，离心半径为10 cm，离心速率为2 500 r/min，离心时间为15 min，取上清液，保存于-70 ℃恒温冰箱内，备用。采用购自德国罗氏公司的全自动电化学发光仪(型号为Roche Cobas E602)及其配套试剂盒检测血清NSE、CA-50、proGRP水平，严格遵循试剂盒说明书进行操作。所有患者均通过门诊、电话或微信等方式随访1年，剔除失访病例后统计1年生存率。

1.3观察指标 (1)两组血清NSE、CA-50、proGRP水平。(2)血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移风险的影响。(3)血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移的诊断价值。(4)不同淋巴结转移度、转移数、转移域数患者血清NSE、CA-50、proGRP水平。(5)血清NSE、CA-50、proGRP与食管癌术后淋巴结转移情况的相关性。(6)生存分析。

2 结 果

2.1两组血清NSE、CA-50、proGRP水平 转移组血清NSE、CA-50、proGRP水平高于无转移组(P<0.05)，见表1。

2.2血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移风险的影响 由表1数据计算所有患者血清NSE、CA-50、proGRP的均值分别为22.24 ng/mL、49.81 U/mL、99.13 pg/mL，各指标以≥均值为高水平，<均值为低高水平。危险度分析显示，血清NSE、CA-50、proGRP高水平患者发生术后淋巴结转移的风险分别是低水平患者的3.086倍(95%CI：2.115～4.503)、11.855倍(95%CI：5.110～27.504)、2.538倍(95%CI：1.781～3.617)，均P<0.05，见表2。

表1 两组血清NSE、CA-50、proGRP水平比较

表2 血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移风险的影响(n)

2.3血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移的诊断价值 以转移组作为阳性标本，无转移组作为阴性标本，绘制ROC曲线，结果显示，血清NSE、CA-50、proGRP单独检测诊断食管癌术后淋巴结转移的曲线下面积(AUC)分别为0.735(95%CI：0.660～0.801)、0.835(95%CI：0.768～0.888)、0.815(95%CI：0.746～0.871)，3项指标联合检测诊断食管癌术后淋巴结转移的AUC为0.927(95%CI：0.876～0.962)，大于各指标单独诊断，见表3、图1。

表3 血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移的诊断价值

图1 血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移的诊断价值

2.4不同淋巴结转移情况患者血清NSE、CA-50、proGRP水平 单因素方差分析显示，不同淋巴结转移度、转移数、转移域数患者血清NSE、CA-50、proGRP水平差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移度>40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴结转移度在20%～40%及<20%的患者(P<0.05)；淋巴结转移度在20%～40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴结转移度<20%的患者(P<0.05)。≥4枚淋巴结转移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于3枚、2枚、1枚淋巴结转移的患者(P<0.05)，3枚淋巴结转移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于2枚、1枚淋巴结转移的患者(P<0.05)，2枚淋巴结转移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1枚淋巴结转移的患者(P<0.05)；转移域数≥2个的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1个转移域的患者(P<0.05)。见表4。

表4 不同淋巴结转移情况患者血清NSE、CA-50、proGRP水平比较

2.5血清NSE、CA-50、proGRP与食管癌术后淋巴结转移情况的相关性 Spearman相关分析显示，血清NSE、CA-50、proGRP与食管癌术后淋巴结转移度、转移数、转移域数呈正相关(r>0,P<0.05)，见表5。

表5 血清NSE、CA-50、proGRP与食管癌术后淋巴结转移情况的相关性

续表5 血清NSE、CA-50、proGRP与食管癌术后淋巴结转移情况的相关性

2.6生存分析 随访1年，转移组失访3例。以ROC曲线获取的血清NSE、CA-50、proGRP最佳截断值为界分为阳性与阴性，NSE≥21.92 ng/mL为阳性、NSE<21.92 ng/mL为阴性，CA-50≥45.08 U/mL为阳性、CA-50<45.08 U/mL为阴性，proGRP≥76.15 pg/mL、proGRP<76.15 pg/mL为阴性。K-M曲线分析显示，转移组血清NSE、CA-50、proGRP阳性患者1年生存率低于阴性患者(Log-rankχ2=2.704、3.258、2.816，P<0.05)，见图2。

图2 转移组不同血清NSE、CA-50、proGRP水平患者1年生存曲线

3 讨 论

相关资料数据统计显示，胸段食管癌腹腔淋巴结转移发生率约为26%，颈部淋巴结转移发生率约为30%，纵膈淋巴结转移发生率约为34%，防治形势极为严峻[6-8]。同时，国内外研究均证实，食管癌具有术后易发生淋巴结转移的特点，且术后淋巴结转移是导致患者术后死亡的重要因素之一，需给予重视[9-10]。因此，积极探索较为可靠的指标早期诊断食管癌术后淋巴结转移对于提高术后生存率具有重要意义。

NSE属于细胞内的大分子蛋白质，近年来有报道指出，其血清水平在肺癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中呈异常升高趋势，可作为恶性肿瘤发生的血清学标志物[11-12]。CA-50是常规糖类抗原类肿瘤标志物，主要在肺部、胃部、肝部、结肠、胆囊、胰腺、子宫等多种器官、组织的糖脂及高分子糖蛋白中分布，参与上述器官、组织的恶性肿瘤发生过程[13-14]。proGRP属于胃泌素释放肽的前体结构，在肿瘤组织中呈高表达状态[15]。相关研究表明，与健康者、食管良性病变患者相比，血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌患者中的水平明显较高，可见三者均参与食管癌发生[16-17]。在此基础上，本研究结果显示，转移组血清NSE、CA-50、proGRP水平高于无转移组，且高水平患者发生术后淋巴结转移的风险明显升高，说明血清NSE、CA-50、proGRP不仅参与食管癌发生过程，还会促进术后淋巴结转移。分析其原因，主要有以下方面：(1)NSE与肿瘤生长、增殖密切相关，在炎症及肿瘤生长环境中，NSE会由细胞内大量释放出来，发挥控制肿瘤细胞生长的作用，还具有上调血管内皮生长因子表达、加速肿瘤内部新生血管生成的作用，从而在食管癌术后淋巴结转移中发挥促进作用[18]。(2)有报道显示，细胞发生恶性病变时或激活胚胎期的转化酶或导致糖基转化酶失活，从而促使细胞表面糖类结构及抗原性质改变，进而造成糖类抗原过多合成、释放，形成肿瘤标志物，且随着肿瘤细胞不断生长、侵袭、扩散，糖类抗原含量呈逐渐增加趋势[19]。故CA-50水平在食管癌术后淋巴结转移中显著升高。(3)proGRP是新被发现的激素类肿瘤标志物，具有调控细胞周期、减弱上皮细胞分化和成熟能力，导致在恶性肿瘤发展过程中肿瘤细胞由G1期转化为S期的时间显著缩短，从而加速癌细胞增殖、转移，促进淋巴结转移[20]。提示临床可将血清NSE、CA-50、proGRP作为诊断食管癌术后淋巴结转移的血清学指标。本研究进一步分析发现，血清NSE、CA-50、proGRP虽然均对食管癌术后淋巴结转移具有一定诊断价值，但仍存在较大局限性，故尝试探讨3项指标联合检测的诊断价值，结果显示，3项指标联合检测的诊断价值明显高于各指标单独诊断，为临床提供可靠的诊断思路。

本研究还表明，血清NSE、CA-50、proGRP水平随淋巴结转移度、转移数、转移域数增加呈逐渐升高趋势，与淋巴结转移度、转移数、转移域数呈正相关，可见血清NSE、CA-50、proGRP还能用于评估食管癌术后淋巴结转移度、转移数、转移域数，有利于制订针对性治疗方案，从而控制淋巴结转移进展。此外，随访1年，转移组血清NSE、CA-50、proGRP阳性患者1年生存率低于阴性患者，说明上述指标血清水平还会影响生存预后。但本研究未详细探讨血清NSE、CA-50、proGRP对食管癌术后淋巴结转移患者长期预后的预测价值，今后需作进一步探讨与分析，以便为临床提供更全面的数据支持。

综上所述，血清NSE、CA-50、proGRP水平升高会显著增加食管癌术后淋巴结转移风险，会对生存预后产生不利影响，这3项指标联合检测诊断食管癌术后淋巴结转移的价值较高。