水果蔬菜中吡虫啉的QuEChERS法测定

张小宁，刘 伟

（杨凌职业技术学院，陕西咸阳 712100）

农药残留问题一直是人们关注的焦点之一[1-2]。植物性食品的农药残留主要来源于水、土壤和农药喷洒这一农业生产活动。完善农药残留检测技术、建立健全的农药使用管理体系是保护生态环境的重要手段之一。

吡虫啉是烟碱类超高效杀虫剂，具有广谱、高效、低毒和低残留等特点，害虫不易产生抗性，并有触杀、胃毒和内吸等多重作用[3-4]。害虫接触药剂后，中枢神经正常传导受阻，使其麻痹死亡[5-6]。吡虫啉可有效防治蓟马、叶蝉、粉虱、蚜虫、稻甲虫、负泥虫、潜叶蝇和潜叶蛾等刺吸式口器害虫，对于鳞翅目和双翅目害虫也有很高的防治效果，可用于防治小麦、玉米、水稻、棉花、蔬菜、甜菜和果树等作物病虫害[7-10]。目前，农检实验室吡虫啉的检测方法多采用GB/T 23379—2009，通过多次提取、浓缩、固相萃取，最后通过高效液相色谱法测定[11-12]。

本研究在国家标准GB/T 23379—2009的基础上，借鉴NY/T 761—2008的预处理方法，采用了QuEChERS方法和固相萃取，比较了两者优劣，简化了预处理和仪器分析过程，缩短了检测分析时间，方法具有较好的重复性和灵敏度[13-14]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

吡虫啉标准品（GBW（E）084948，北京坛墨质检）；乙腈、甲醇（HPLC级，美国天地）；超纯水（实验室自制）；乙酸钠、硫酸镁、氢氧化钠（西陇，分析纯）。

1.2 仪器与设备

1260高效液相色谱仪（安捷伦公司）；D型干式氮吹仪（上海沪析实业有限公司）；MS3涡旋振荡器（德国IKA公司）；ME204电子天平（瑞士梅特勒公司）；固相萃取柱（C18，1 g/6 mL）。

1.3 实验方法

1.3.1 标准溶液的配制

标准中间液：准确移取100 μg·mL-1吡虫啉标准溶液1.0 mL，用甲醇稀释定容至10 mL，配制成浓度为10 μg·mL-1的标准中间液。

标准工作液：分别取0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL和1.00 mL中间液用甲醇水（3+7）稀释定容至10 mL，配制成浓度为0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1系列标准工作液。

1.3.2 样品处理

称取约25.0 g苹果样品于250 mL烧杯中，加入50.0 mL乙腈，高速匀浆2 min，过滤置于50 mL盛有3～7 g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡1 min，静置分层。

固相萃取：吸取上清液4 mL在40 ℃下氮吹至干，用2.5 mL乙腈水（1+3）涡旋复溶。C18固相萃取柱先用2.5 mL乙腈和乙腈水（1+3）淋洗活化后，将复溶后样品全部过柱，再用5 mL 20 mol·L-1氢氧化钠、5 mL水淋洗，最后用1.0 mL乙腈洗脱，加水1.0 mL涡旋混合后过0.45 μm滤膜装瓶待测。

QuEChERS：吸取上层清液10.0 mL加入1 g MgSO4，0.5 g NaOAc，涡旋30 s后静置5 min，取上清2 mL氮吹浓缩后，用乙腈水（1+1）稀释定容至1.0 mL，溶液过0.22 μm尼龙滤膜，液相色谱测定。

1.3.3色谱条件

色谱柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：1.0 mL·min-1；进样量10 μL；柱温：40 ℃；流动相A：甲醇溶液；流动相B：水；洗脱程序：70%甲醇（A）等度洗脱；检测波长：270 nm；检测器采集频率：500 ms；外标法定量。

2 结果与分析

2.1 标准谱图

本文采用高效液相色谱法-紫外检测器测定吡虫啉，检测波长为270 nm。得到较好的检测结果，保留时间为4.922 min，每次样品分析的时间小于10 min，大大缩短了GB/T 23379—2009中梯度洗脱的分析时间。色谱图如图1所示。

图1 吡虫啉标准溶液色谱图

2.2 标准曲线

依 次 测 定 浓 度0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50、 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1标准工作液，进样量10 μL，以浓度为横坐标，峰面积响应值为纵坐标，得到线性回归方程，线性关系良好。线性方程为A=57.611 34C+0.437 91（R=0.999 366）。

2.3 净化方法

依据1.3.2处理方法，添加浓度为2倍检出限即0.04 mg·kg-1时，分别采取固相萃取和QuEChERS净化，比较两种方法的峰面积和信噪比。通过对比发现，固相萃取法信噪比大，净化效果较优于QuEChERS法，但QuEChERS方法的回收率更高，详见表1。

表1 QuEChERS与固相萃取法的比较

2.4 准确度和精密度

分别选定青菜、白菜和苹果空白样品，添加浓度 为0.04 mg·kg-1、0.06 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1的 标准溶液，按QuEChERS方法进行处理（n=6），计算加标回收率和精密度，见表2。3种果蔬的加标回收率为80.2%～110.2%，精密度为1.3%～4.8%。符合实验室方法的一般要求（回收率在70%～120%质检，偏差小于10%）。

表2 吡虫啉的回收率和相对标准偏差（n=6）

3 结论

本研究基于GB/T 23379—2009和NY/T 761—2008，应用高效液相色谱法建立了一种处理简单、快速、准确定量分析水果中吡虫啉的方法，与GB/T 23379—2009相比，简化了提取、净化过程，通过等度洗脱缩短了检测时间，提高了检测灵敏度。结果显示，该方法可在10 min内完成吡虫啉的检测，具有良好的精确度和准确度，在0.05～1.00 μg·mL-1与 信 号 响 应 值 呈 现 良 好 的 线性关系，线性相关系数大于0.999，检出限远低于

0.02 mg·kg-1，加标回收率为80.2%～110.2%，相对标准偏差为1.3%～4.8%。