循环miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 水平与ACS 患者冠脉介入术后近期预后的关系

邱勋雾 李昭祺 萧少武

急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）是一种临床常见的急危重症［1］。随着医学技术的发展，近年来ACS 的诊疗水平明显提高，但因主要不良心血管事件（Major Adverse Cardiovascular Events，MACE）的发生率仍居高不下，因此患者预后质量仍未有明显改善［2］。目前临床上用于评估ACS患者预后的指标较多，但均存在一定局限性［3］。miRNA 是一组单链非编码小分子RNA，近年来有研究发现其与多种疾病进程及预后密切相关，最早有学者提出血浆miR-223水平与心血管事件存在相关性［4］。而miR-146ɑ在肾脏、心脏等组织中呈高表达，有研究显示［5］其在动脉粥样硬化斑块中高表达。miR-361-5p可调节血管内皮生长因子表达，在冠心病等相关疾病中起一定作用［6］。许佳昕等［7］的研究认为miRNA可能与ACS病变程度相关。本研究旨在通过探讨miRNA表达水平与ACS患者冠脉介入术后近期预后的关系，分析其在ACS患者预后评估中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年12 月至2021 年12 月就诊于文昌市人民医院心血管内科的196 例行冠脉介入术ACS 患者临床资料。纳入标准：①符合欧洲心脏病学会急性ST 段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction，STEMI）［8］和《非ST 段抬高急性冠脉综合征诊断和治疗指南》［9］；②患者均符合手术指征，行冠脉介入术；③所有患者均知情本研究并签署同意书。排除标准：①严重心律失常者；②急性心衰患者；③合并严重感染或恶性肿瘤者；④严重血液系统疾病、自身免疫性疾病者。本研究经文昌市人民医院伦理委员会审核并批准。

1.2 临床资料收集

一般临床资料包括年龄、性别、吸烟、饮酒、糖尿病等。收集所有患者入院次日外周静脉血12 mL 用于血常规、肝肾功能指标、实验室指标及miRNA 定量。血常规指标［白细胞（white blood cell，WBC）、中性粒细胞比例（neutrophil，NEUT）、淋巴细胞比例（Lymphocyte ratio，LY）］、肝肾功能指标［总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（Low-Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（Uric-Acid，UA］、实验室指标［同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）、高 敏C 反 应 蛋 白（Highly Sensitive C Reactive Protein，hs-CRP）、肌钙蛋白I（Troponin I，Tn I）、B 型尿钠肽（Brain natriuretic peptide，BNP）］、miRNA（miR-361-5p、miR-223 及miR-146a）。其中TC、LDL-C、Hcy 采用酶比色法，TG、BUN、UA 采用比色法，Cr 采用酶学法，其余采用化学发光法。采用实时荧光定量PCR 法检测，按TRlzol 法提取总RNA，按试剂说明书提示准备PCR 扩增体系。采用2-ΔΔCt法计算miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ表达水平相对定量值。

1.3 随访与分组

所有ACS 患者自出院后均随访6 个月，分别在术后1、3、6 个月采用门诊复查、电话等方式进行随访并记录发生（主要不良心脏事件）MACE 事件，包括：心源性死亡、再发ACS、再发心肌梗死、继发心力衰竭及再发心绞痛致入院。以ACS 患者随访期间是否发生MACE 分为MACE 组（n=29）和未发生MACE 组（n=167）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行数据处理，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验。采用多因素Logistic 回归分析循环miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平与ACS 患者冠脉介入术后近期预后的关系；采用受试者工作特征（ROC）曲线评估循环miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平预测ACS患者发生MACE的诊断效能。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 196 例ACS 患者随访期间发生MACE 情况

196 例ACS 患者共发生MACE29 例（14.79%），其中发生心源性死亡3 例（1.53%）、再发ACS6 例（3.06%）、再发心肌梗死8 例（4.08%）、继发心力衰竭5 例（2.55%）及再发心绞痛7 例（3.57%）。

2.2 影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的单因素分析

单因素结果显示，两组患者年龄、Cr、Tn I、BNP、miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的单因素分析［n（%）］Table 1 Univariate analysis of short-term prognosis of patients with ACS after coronary intervention［n（%）］

2.3 影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的多因素分析

Logistic 回归分析结果显示，miR-223是影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的保护因素（P＜0.05），miR-361-5p、miR-146ɑ是影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的独立危险因素（P＜0.05）。见表2。

表2 影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的多因素分析Table 2 Multivariate analysis of factors affecting the short-term prognosis of patients with ACS after coronary intervention

2.4 循环miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 预测ACS 患者发生MACE 的ROC 曲线分析

通过绘制ROC 曲线得出，循环miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ预测ACS 患者发生MACE 的曲线下面积（AUC）分别为0.763、0.701、0.794（P＜0.05）。见表3、图1。

表3 循环miR-361-5p、miR-223 及miR-146ɑ 预测ACS患者发生MACE 的ROC 曲线分析Table 3 ROC curve analysis of circulating miR-361-5p，miR-223 and miR-146ɑ in predicting the occurrence of MACE in patients with ACS

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

3 讨论

冠心病是我国心脑血管疾病中致死率位居首位，近年来发病率呈上升趋势且呈年轻化，给患者及社会医疗带来极大的经济负担［10］。ACS 是冠心病中的危急重症。研究证实，ACS 的发生发展与冠脉的不稳定硬化斑块、斑块钙化、破裂等造成冠脉腔狭窄有关［11］。目前临床上用于诊断冠脉病变程度的金标准是CAG，但其检查费用昂贵，需患者提前预约，为创伤性检查，存在一定风险，患者接受程度不高，临床应用具有局限性，进而影响ACS冠脉病变的早期诊断和后续治疗方案的抉择［12］。

有研究报道，miRNA 在ACS 患者行冠脉介入术后冠脉再狭窄中有较高的诊断价值［13-14］。miR-146ɑ可通过调控靶基因，参与心血管疾病、肿瘤等多种疾病的发展进程。miR-361-5p是一种与肿瘤存在相关性的miRNA，其可调控下游靶基因在多个阶段发挥功能进而参与肿瘤进展［15］。糖尿病患者发生缺血性脑卒中与miR-223低表达有关，miR-223水平呈低表达患者发生缺血性脑卒中的风险更高，其原因可能是miR-223 低表达造成血小板活性升高，从而使缺血性脑卒中的发病率更高。以上研究均提示miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平在冠心病发生发展中起重要作用。

既往已有研究表明miR-361-5p、miR-223及miR-146a 与心血管疾病进程密切相关。本研究进一步分析这三种血清miRNA 在ACS 患者预后中表达水平的差异。结果显示，两组年龄、Cr、Tn I、BNP、miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ水平差异有统计学意义。将上述因素纳入Logistic 回归分析，结果显示miR-223是影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的保护因素，miR-361-5p、miR-146ɑ是影响ACS 患者冠脉介入术后近期预后的独立危险因素。在巨噬细胞中miR-223过表达可显著延缓脂质沉积，而miR-223低表达则可诱导脂质沉积，miR-223能够调控脂蛋白和胆固醇代谢。而载脂蛋白E 能够抑制NF-κB 通路调控miR-146ɑ表达水平。在心肌内皮细胞中，miR-223可通过降低RPSKB1 的表达，从而调控RPSKB1/H1F1α 信号通路，起到抑制血管生成的作用。同时本研究通过绘制ROC 曲线得出，循环miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ预测ACS 患者发生MACE 的曲线下面积（AUC）分别为0.763、0.701、0.794，表明三种血清miRNA表达水平在预测ACS预后方面有较高的诊断价值。

综上所述，随着冠脉病变程度加重，ACS 患者 循 环miR-361-5p、miR-146ɑ水 平 表 达 水 平 升高，miR-223水平降低，与MACE 发生率相关，提示miR-361-5p、miR-223及miR-146ɑ有可能成为辅助ACS 预后评估的潜在标志物。