CXCL17在慢性乙型肝炎患者中的变化及其与病毒载量和肝纤维化的关系

陈晓宇 薛国辉 许海波

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是指人体感染乙型肝炎病毒持续时间6个月以上患者，临床表现主要为乏力、厌食、恶心、腹胀、肝区疼痛等症状[1]。患者感染乙肝病毒后，长期持续损伤肝脏系统，进而引发全身感染症状，随着病情加重，可发展为肝硬化、肝癌等，严重威胁患者身体健康[2]。肝组织病理检查是评价CHB患者肝功能纤维化的金标准，然而，该方法是一种有创性操作，对患者肝脏功能具有一定的损伤[3]。研究[4]发现，肝纤维化的主要病理改变为反复或持续性肝细胞外基质增生与沉积。有研究[5]报道，肝星状细胞能够分泌趋化因子，同时可以表达多种趋化因子受体，与肝纤维化密切相关。部分趋化因子在CHB患者中异常表达，并且与患者肝功能和病毒载量有关[6]。当前，CHB患者治疗随访期间仍然缺乏可靠的实验室参考指标。CXC趋化因子家族配基17(CXC chemokine family ligand 17，CXCL17)是趋化因子家族最新成员，具有抗炎、抗菌、促进血管生成、募集免疫细胞等多种功能，能够促进特定免疫细胞(单核细胞、树突细胞和巨噬细胞)募集到此类黏膜屏障中，维持黏膜表面上皮细胞的稳态[7]。然而，CXCL17在CHB患者中的表达情况以及与肝功能、肝纤维化、病毒载量的关系尚不清楚，故本研究旨在通过分析CHB患者血清CXCL17水平与肝功能指标、肝纤维化指标以及病毒载量的关系，了解CXCL17在CHB患者疾病发生、发展中的具体影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年6月至2021年6月九江市第一人民医院肝病科收治的50例CHB患者纳入试验组，选取同期50例健康体检者纳入对照组，其中，试验组男性28例，女性22例，年龄20～68岁，平均(43.86±9.05)岁。病程1～15年，平均(7.92±1.58)年；对照组男性26例，女性24例，年龄20～69岁，平均(44.84±10.81)岁，两组研究对象基本资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究已获得医院伦理委员会批准(审批号：JJSDYRPMYY-YXLL-2021-237)。

试验组纳入标准：均符合CHB诊断标准[8]；乙型病毒性肝炎(hepatitisbvirus，HBV)DNA阳性，且持续时间>6个月；均知情同意。对照组健康体检者纳入标准：体检结果无明显异常，且无肝病史。

试验组排除标准：合并其他肝脏疾病；免疫或血液系统疾病；恶性肿瘤患者；精神疾病；心、肾功能障碍患者；高血压、糖尿病患者。

1.2 方法 两组研究对象均清晨空腹采集静脉血，采集两份血样各5 mL，一份血样经肝素钠常规抗凝处理，采用阻抗法检测血小板(platelets，PLT)；另一份血样3 500 r/min离心分离血清，采用酶联免疫吸附法测定血清CXCL17、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase，GGT)，采用化学发光法检测透明质酸(hyaluronic acid，HA)、Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅲ，PCⅢ)、层粘连蛋白(laminin，LN)、Ⅳ型胶原(collagen Ⅳ，CIV)水平，采用实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)法检测HBV病毒载量拷贝数。

采用恩替卡韦(每次0.5 mg，1次/天)治疗6个月后，所有患者定期入院接受检查(每个月1次)，对所有患者进行编号，采用直接抽样法选取20例CHB患者，HBV DNA<500拷贝/毫升时，空腹采集静脉血，采用酶联免疫吸附法测定患者血清CXCL17水平。

1.3 仪器与试剂 运用科华KHB酶标仪检测CXCL17，运用SYSMEX2100全自动血液分析仪检测PLT，生化分析仪为日立7600，全自动免疫发光分析仪为MAGLUMI 4 000 plus，乙肝病毒载量采用ABI 7500 PCR扩增仪检测。

1.4 观察指标 ①CHB患者和健康体检者血清CXCL17水平及实验室指标：CHB患者于入院后空腹采集静脉血，健康体检者于体检当日采血，测定血清CXCL17水平及实验室指标(包括AST、ALT、GGT、PLT、HA、PCⅢ、LN、CIV、FIB-4、HBV DNA)；②分析CHB患者血清CXCL17与实验室指标的相关性；③记录CHB患者HBV DNA<500拷贝/毫升时，其CXCL17表达情况。

2 结果

2.1 两组对象血清CXCL17水平及实验室指标比较 CHB患者血清CXCL1、AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV水平均高于健康体检者(P<0.05)，CHB患者PLT水平低于健康体检者(P<0.05)。见表1。

表1 两组对象血清CXCL17水平及实验室指标比较

续表1

2.2 试验组CXCL17与实验室指标的相关性 Pearson相关性分析显示，CHB患者血清CXCL17水平与PLT呈负相关(P<0.05)，与AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV、CG、HBV DNA均呈正相关(P<0.05)。见表2。

表2 CHB患者CXCL17与实验室指标的相关性

2.3 CHB患者HBV DNA<500拷贝/毫升时，血清CXCL17表达情况 治疗后，CHB患者HBV DNA<500拷贝/毫升时，血清CXCL17[(36.93±7.16)ng/L]水平低于治疗前[(75.58±12.64)ng/L]，差异有统计学意义(t=11.898，P<0.001)。

3 讨论

CHB具有发病率高、流行性广的特点，据统计，我国慢性HBV感染者约7 000万例，其中CHB患者2 000～3 000万例[9]。CHB作为一种传染性疾病，与母婴垂直传播、输血、性传播、免疫等因素有关[10]。乙肝病毒感染机体后，在肝细胞中大量生长繁殖，形成乙肝相关的病毒血症及炎症反应，当机体免疫功能降低时，对肝脏造成免疫损伤[11]。CHB难以彻底根治，临床主要以抗病毒治疗，延缓疾病进展[12]。CHB患者肝细胞坏死区发生胶原纤维增生，初期增生形成小条索称为肝纤维化[13]。长期以来，临床依靠肝脏活检诊断肝纤维化，然而这种创伤性检查具有一定的局限性[14]。近年来，血清学指标评价肝功能、肝纤维化一直是众多医学研究者关注的热点，寻找与肝纤维化密切相关的血清因子对于临床诊断以及指导临床治疗具有重要意义。

趋化因子参与免疫调节、血管生成、肿瘤发生等过程[15-16]。CXCL17在肝纤维化过程中表达增加，进而损伤肝细胞，加重肝纤维化[17-19]。本研究结果显示，CHB患者血清CXCL17、AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV水平均高于健康体检者，CHB患者PLT水平低于健康体检者，Pearson相关性分析显示，CHB患者血清CXCL17水平与PLT呈负相关，与AST、ALT、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV、HBV DNA均呈正相关，表明CHB患者血清CXCL17水平变化与肝功能及肝纤维化有关。CXCL17具有抗炎、抗菌、免疫、促进血管生成等作用，在骨骼肌、胃、肺以及泌尿系统中均可表达，能够通过信号转导途径在癌细胞中表达[20]。Burkhardt等[21]研究发现，在特发性肺纤维化中CXCL17表达升高，可能参与肺纤维化的发病机制。有研究[22]发现，CXCL17可以通过下调MMP1和miR-29介导的皮肤成纤维细胞I型胶原参与纤维化，在小鼠模型中局部注射CXCL17，可减轻博来霉素诱导的小鼠皮肤纤维化。本研究部分CHB患者经抗病毒治疗后，HBV DNA<500拷贝/毫升时，血清CXCL17水平低于治疗前，表明临床抗病毒治疗可以降低血清CXCL17水平，对于阻止肝纤维化具有重要作用。然而，本研究纳入病例有限，统计学中不可避免出现一定的偏差，可能会一定程度影响研究结果，在后续研究中，仍需扩大样本，进一步证实CHB患者血清CXCL17水平与肝纤维化的关系，并深入探究CXCL17水平变化在肝纤维中的具体影响机制。

综上所述，CHB患者血清CXCL17水平异常升高，CXCL17水平变化与病毒载量及肝纤维化有关，临床抗病毒治疗可以降低血清CXCL17水平。