人炭疽关联的家畜疫情流行病学调查方案制定及实施

高青华，高传庆，孙圣福，胡莉萍，楚遵锋，张 月，马慧玲，兰邹然，3

（1.滨州市农业农村局，山东滨州 256600；2.山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022；3.南京农业大学，江苏南京 210008）

炭疽是由炭疽杆菌引起的一种人兽共患传染病，畜间以牛、马、羊等食草动物最易感。在炭疽自然疫源地环境中存在的炭疽杆菌会通过各种途径感染人和动物，人和动物感染后排出的炭疽杆菌又会污染环境。人炭疽病例容易被发现，而动物炭疽常因皮肤被毛发覆盖而不易被发现，只有动物死亡后，才会被有经验的兽医识别。环境中的炭疽杆菌容易感染动物，而人类主要通过接触病畜毛皮和食肉而感染，如果手部皮肤出现破损，就更易被感染，尤其是屠宰从业人员，此外吸入含有炭疽杆菌的粉尘或气溶胶也可被感染[1]。

2021 年山东省降雨量超乎预期，而雨水冲刷导致炭疽杆菌从地下到地表，容易造成人畜感染。山东省卫健委通报，在连续6 年全省未报告人间炭疽病例后，2021 年又出现了人间病例，从而引起了省委、省政府的高度关注。出现人炭疽病例后，依据农业农村部印发的《炭疽防治技术规范》要求，兽医部门需开展动物间的紧急流行病学调查[2]。本研究结合实践，参考《炭疽防治技术规范》，就出现人炭疽病例后的畜间紧急流行病学调查方案的制定实施和注意事项展开探讨，希望对兽医工作者开展类似工作有所帮助。

1 方案制定与实施

《炭疽防治技术规范》要求，在出现人间炭疽病例时，需要成立调查组开展动物间紧急流行病学调查，以便确定感染来源，掌握畜间及环境中的炭疽杆菌感染及分布状况，大致需要开展以下工作：其一，确定调查目的；其二，确定调查范围；其三，确定调查方式；其四，确定采样数量和检测方法；其五，确定调查时间；其六，方案实施；最后，收集、整理和分析数据。

1.1 调查目的

调查目的主要有两个：一是追溯人感染病例的关联动物，协助卫健部门查找人感染病例的可能传染源；二是掌握调查区域范围内的畜间病例，以及环境中的炭疽杆菌污染情况。

1.2 调查范围

人间炭疽病例所在县级区域的所有牛羊养殖场户以及屠宰、加工、销售场点。

1.3 区域划分

1.3.1 核心区 人间炭疽病例关联的动物养殖、交易、屠宰和加工场点。

1.3.2 重点区 以核心区为中心，周边3 km 范围内所有牛羊养殖场户、屠宰场点，以及全县与其有关联的牛羊屠宰场点、加工和销售场点。

1.3.3 一般区 核心区、重点区以外的，全县其他区域的牛羊养殖场点。

1.4 调查方式

1.4.1 核心区 临床排查并填写专项流行病学调查表，现场采集血样和环境样品，溯源调查人间病例发病前20 d 内养殖场内饲养动物的调入、调出情况，屠宰、加工、销售相关动物及动物产品的流动情况，以及放牧、割草等活动。

1.4.2 重点区 临床排查并填写专项流行病学调查表，采集环境样品。

1.4.3 一般区 进行相关动物养殖场点临床排查。

1.5 采样数量

1.5.1 核心区 采集所有与人感染病例关联的动物抗凝血样品，每头（只）动物1 mL，并采集这些动物关联场点的环境样品，每个场点20 份，采样中应考虑到每个场点的样品分布。

1.5.2 重点区 每个场点采集环境样品5 份。

1.5.3 一般区 根据临床排查情况进行采样。

1.6 检测方法

对血样，采用碱性美蓝荚膜染色镜检法（或其他染色法）或荧光PCR 方法检测；对环境样品，采用荧光PCR 方法检测。

1.7 调查时限

3 d 内完成所有调查、采样和检测工作。

1.8 实施要求

各乡镇（街道办）兽医站将动物炭疽排查日报表于每天下午3 点前报县动物疫病预防控制机构。炭疽流行病学调查表于开始调查后第3 天下午5 点前报县动物疫病预防控制机构。对检测发现的阳性动物，严格按照《炭疽防治技术规范》处置。对核心区，由养殖户和畜牧兽医部门共同开展消杀工作；对重点区和一般区，由畜牧兽医部门指导养殖户自行开展消杀工作。

1.9 报告撰写

由紧急流行病学调查组撰写报告，根据调查进度写出初步调查报告、阶段性调查报告和调查报告终稿等。

2 注意事项

2.1 划定区域，基于风险抽样，减少工作量

通常情况下，根据人间病例关联情况，将调查范围划为核心区、重点区和一般区。核心区一般确定为与人间病例紧密关联的养殖、屠宰、销售和加工场点，如果人间病例所在县从事零星宰杀动物的场点比较容易确定，那么可以将这些场点也纳入核心区进行重点调查和采样。核心区的调查往往决定整个调查的质量和进程，所以在制定调查方案时，确定核心区要慎重，应认真研究后确定；选择调查场点时，应考虑动物种类，是仅调查牛相关场点，还是仅调查羊相关场点，或是牛羊相关场点都调查，这取决于与人间病例关联的动物种类。

2014 年后山东省已连续6 年未报告人间炭疽疫情，2021 年再次发现人炭疽病例，这与动物的调入和雨水的异常增多有一定关系，但人炭疽病例数量较少，推断关联的动物感染数量也不会太多。因此，没有必要开展大范围采样，否则会增加大量无效劳动。采样时要注重基于风险的采样，找准与人间病例密切相关的养殖、屠宰、加工、销售场点以及相关动物、环境，这样才能提高采样效率，找准问题，发现炭疽病源。在制定方案时，一定要重点考虑采样环节的设置，从开展的采样检测情况看，大部分活动物检测结果为阴性。对活动物采样比较困难，所以应尽可能减少采样数量，以减轻工作量，提升工作效率。因此，风险场点的环境样品应是采样重点。

2.2 做好个人防护

炭疽样品采集涉及风险点采样，因此一定要做好个人防护。鞋套和手套应选择紧固、不容易扎破的，同时还要考虑便利穿戴和脱下，防护服需要保证质量，尽可能防止采样时被感染。到现场前，可服用阿莫西林、环丙沙星、红霉素、罗红霉素、阿奇霉素等抗菌药物预防。另外，在对牛、马等大动物采样时，一定要做好保定工作，防止其对人产生伤害。

2.3 做好车辆消毒

到达风险点的车辆也存在炭疽杆菌污染风险，所以要避免车辆过于接近风险场点。人员上车前应脱下穿戴的防护用品，不可将用过的防护用品带回到车内。制定车辆消毒规程，对去过风险点的车辆开展消毒工作，包括车辆外表和车辆内部的消毒。

2.4 现场调查时及早申请公安部门介入

从目前人间炭疽病例的发生情况来看，多数病例通过与发病或病死动物接触而感染[3-5]。而宰杀发病或病死动物是非法的，因此相关人员往往存在隐瞒心理，现场与其交流时获得的信息可信度较低，这通常会直接影响调查效率。因此，对于炭疽的现场调查，一定要申请公安部门尽快介入，如果仍然不能获取可靠信息，则建议公安部门采取侦破手段，来获取真实信息。

2.5 多种检测方法结合使用

动物炭疽的检测可参考《动物炭疽诊断技术》（NY/T561—2015），将碱性美兰荚膜染色法、革兰氏染色法等用于细菌学检查，也可以使用PCR方法进行核酸检测。染色镜检法和PCR 法各有利弊，需要结合使用。染色镜检法操作简便，检测成本较低，但是由于整个检测过程均需人工操作，从视野中寻找目标菌，工作量较大；而PCR 方法由于可以采用批量快速核酸自动提取技术，工作量相对较小，适合于大批量样品检测。从理论上来说，染色镜检法的检出限应该会比PCR 法更低，毕竟提取和扩增炭疽杆菌需要一定炭疽杆菌拷贝数。荧光PCR 法检出限也较低，但仍不及染色镜检法的检出限。目前农业行业标准和出入境动物检疫标准中还没有纳入荧光PCR 检测方法，但是市场上已有不少荧光PCR 商品试剂盒，期待早日将荧光PCR 方法纳入动物炭疽诊断相关标准，以满足实际需求。

2.6 其他措施

一旦发生洪涝灾害，务必按照农业农村部《洪涝灾害后动物防疫技术指南》，做好灾后消毒、死亡畜禽无害化处理、紧急免疫等防疫措施。