MYST2基因与大白猪瘦肉率和日增重的性状关联分析

2022-12-05李昌武刘永刚万长华谢式云易永红

养猪 2022年6期

李昌武，刘永刚，万长华，廖柱，谢式云，易永红

（1.海南罗牛山畜牧有限公司，海南海口 570100；2.云南农业大学，云南昆明 650000；3.海南罗牛山股份有限公司，海南海口 570125）

我国是世界上猪肉消耗与生产大国，居民在猪肉上的消费在各种肉类消费总和中所占的比例不容小觑。我国畜牧业中养猪产业所占地位不言而喻，因此，在保留大白猪原有优点的基础上再进一步提高其日增重和瘦肉率，能够为人们提供更多优质肉制品以及改善人们生活，同时也具有重要的经济价值，值得关注和研究。发掘及筛选与猪生长速度及瘦肉率相关的基因，对我国积极参与国际上猪基因产权的争夺并进一步利用这些基因用于改进我国养猪生产也具有重要的意义。随着分子生物学技术的兴起和迅速发展，发展了常规育种与分子标记辅助选择（MAS）相结合的方法，可以有效地加快猪生长速度及瘦肉率性状的选择进展。MYST2（组蛋白乙酰转移酶2），也称作HBO1和KAT7（Lysine Acetyltransferase 7，赖氨酸乙酰转移酶7），是组蛋白乙酰转移酶MYST（MOZ、YBF2、SAS2和Tip60）家族（HAT）的成员之一。MYST2基因目前已经被证实在调节细胞增殖[1]、控制脂肪的生成[2]、调节胚胎发育过程[3]以及胎儿肝脏中红血球母细胞的存活密切相关[4]。Jishuang等[5]的研究表明，在AA鸡（Arbor Acres Broiler Chicken，艾拨益加肉鸡）中上调MYST2对其IMF（Intramuscular Fat，肌内脂肪）的沉积有一定影响。Wang等[6]通过研究猪MYST2基因mRNA的替代以及该基因突变与产仔大小性状的相关性中表明，该基因与大白母猪和地方种母猪所有产仔呈现大小显著相关关系。

这些数据为进一步了解猪的这种基因奠定了基础。除此之外，也有相关证据表明MYST家族成员在控制细胞中具有核心和特异性作用，在细胞凋亡、细胞周期和成体干细胞稳态到早期胚胎的形成中均起到一定的调节作用[7]。但是截至目前，还鲜少有关于利用猪MYST2基因作为大白猪瘦肉率和平均日增重的遗传标记的研究或进行大白猪瘦肉率和平均日增重标记辅助选育的报道。

1 研究目的

1）探明MYST2基因与大白猪的活体瘦肉率是否存在关联；2）探明MYST2基因与大白猪的平均日增重是否存在关联。

2 材料与方法

2.1 试验猪群与数据分析

2019年10月，随机选择云南农业大学动物科学技术学院试验动物群中150头180日龄的大白猪群为试验材料，采用已建立的PCR-PstI-RFLP方法进行多态性检测，并分析猪不同基因型与活体瘦肉率和平均日增重的相关关系。采用SAS统计软件General Linear Module程序进行单标记方差分析并进行显著性检验，所采用模型为：Yij=μ+Gi+Sj+bijX+Eij，其中Yij为性状表现值，μ为平均值，Gi为基因型效应（包括加性效应和显性效应，加性效应用1、0、-1分别代表AA、AB、BB基因型，显性效应用1、-1、1代表AA、AB、BB基因型），Sj为性别效应，bij为活体体重的回归系数，X为活体体重，Eij为残差。

2.2 试验方法

（1）从猪耳组织中提取基因组DNA，根据猪MYST2基因序列和两条遗传标记特异引物（表1），用该两条引物在猪基因组DNA中进行PCR扩增，PCR反应体系为：2.0 μL DNA （100 ng），2.5 μL 2 mmol/L mixed dNTPs，2.5 μL 10×Taq DNA polymerase buffer，2.5 μL 25 mmol/L MgCl2，1 μL 20 μmol/L第1引物，1 μL 20 μmol/L第2引物，2 unit of Taq DNA polymerase（1 U/μL），11.5 μL无菌水。得到PCR产物。所述的PCR程序为：94 ℃ 4 min，35个循环94 ℃ 50 s，58 ℃ 45 s，72 ℃ 50 s，然后72 ℃ 10 min，最后4 ℃终止反应。

（2）将步骤（1）中得到的PCR产物用PstI限制性内切酶酶切，反应体系为：10 μL PCR产物，7 μL无菌水，1 μL PstI（10 U），2 μL 10×buffer，PCR产物PstI酶切反应条件为：混合物在37 ℃恒温培养箱培养4 h。在含有EB（溴化乙锭）的2%琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果，凝胶成像系统观察并记录基因型。