珠勒根-其木格化学成分与药理作用研究进展

宝 钢， 图诺木拉， 希古日干， 哈力嘎， 其日格尔， 敖敦格日乐， 拉喜那木吉拉

[内蒙古民族大学蒙医药学院，国家药监局中药(蒙药)质量控制重点实验室，内蒙古 通辽 028000]

龙胆科植物约有80属700种，广泛分布于世界各洲，但主要分布在北半球温带和寒温带。我国龙胆科植物有22属427种左右，大多数的属和种分布于西南山岳地区，其中以龙胆属、肋柱花属、獐牙菜属种类为最多[1]。蒙医常用的大多属于珠勒根-其木格类、地格达类和吉勒泽类。本文只对珠勒根-其木格类中白花龙胆、达乌里龙胆、蓝玉簪龙胆的化学成分与药理作用进行综述，以期为龙胆属植物的深入研究提供依据。白花龙胆GentianaalgidaPall.为多年生草本，高15～25 cm，叶条状披针形或矩圆状披针形，茎生叶对生，花2～5朵着生枝顶端，黄白色，带斑点，蒴果长圆锥形；达乌里龙胆GentianadahuricaFisch.为多年生草本，高15～25 cm，基部为残叶纤维所包围，根长圆锥形，黄褐色，茎常斜升，叶对生，披针形，聚伞花序，顶生或腋生，花1～3朵，蒴果矩圆形，种子椭圆形；蓝玉簪龙胆GentianaveitchiorumHemsl.为多年生草本，高10～15 cm，茎生叶对生，花单生枝端，无花梗，蒴果长圆锥形，种子多数[1]。这3种药材均为龙胆科龙胆属植物，在蒙药中药用部位相同均采用干燥花，且功效相同,但白花龙胆的疗效在蒙医中为最佳。

1 本草考证

《蒙药正典》[2]记载“珠勒根-其木格分三种，其中白色(查干)者为上品，生于高原地区草甸，秋末大地封冻之时，叶似秦艽小而绿，无茎，从地面开出四到五朵白花，有红色光泽，簇生；蓝色(呼和)者初秋生长于潮湿的沼泽草甸，形状如上所述，叶小，花淡蓝色，很明显；黑色(哈日)者生于仲秋，状如上述蓝色者，略大，颜色鲜艳，且蓝。”《认药白晶鉴》[3]《认药学》[4]等蒙药本草著作所描述内容基本一致。目前，蒙医所认用的龙胆科植物白花龙胆即查干-珠勒根-其木格，亦称查干-邦占；达乌里龙胆即呼和-珠勒根-其木格，亦称呼和-邦占；蓝玉簪龙胆即哈日-珠勒根-其木格，亦称哈日-邦占。这3种药材的形态特征基本符合上述本草描述，故认定其为正品，药用其干燥花[5]。白花龙胆分布于吉林、甘肃、新疆、四川、西藏等地[6]；达乌里龙胆分布于内蒙古、青海、甘肃、四川、河北、山西、陕西、宁夏等地；蓝玉簪龙胆分布于西藏、青海、云南西北部、四川及甘肃等地。临床上主要用白花龙胆(查干-珠勒根-其木格)，这与文献记载“白色者为上品”[3-4,7]相符。查干-珠勒根-其木格味涩、苦，性寒，效柔、软、稀，具有清热、解毒、止咳、利喉咽的功效，主治咽喉肿痛、喑哑、肺热、毒热，临床上查干-珠勒根-其木格与三凉药、诃子、黄连等配伍制成的白花龙胆十味散，用于因巴达干热而咽塞喑哑[8]；与丁香、木香、竹黄、甘草、诃子配伍制成的丁香六味散，用于咽喉肿痛；与三子、肉豆蔻、广枣、苦参、北沙参等配伍制成的白花龙胆花十六味散，用于黏热浸喉，肺热引起的咳嗽[9]。

2 化学成分

2.1 萜类 萜类成分是龙胆属植物的主要有效成分之一，是该属植物的特征性成分。该类成分多数以糖苷形式存在，极少数以苷元形式存在，其中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、β-谷甾醇等在植物中分布比较广泛。药理研究表明，龙胆类植物的抗炎作用与其中的环烯醚萜苷类成分有关[10]。杨倩等[11]以龙胆苦苷为对照品，采用紫外分光光度法测定10批小秦艽花样品中总环烯醚萜的含量，测得其含量范围为67.95～155.16 mg/g。熊子增等[12]以齐墩果酸为对照品，采用紫外分光光度法测定10批小秦艽花样品中总三萜含量，测得其含量范围为24.98～92.77 mg/g。刘圆等[13]采用RP-HPLC法测定白花龙胆和蓝玉簪龙胆中的龙胆苦苷含量，测得龙胆苦苷在蓝玉簪龙胆中的含量为183.783 mg/g，在白花龙胆中的含量为109.382 mg/g。白雪等[14]首次建立区带毛细管电泳测定白花龙胆中龙胆苦苷、齐墩果酸、熊果酸含量的方法，与高效液相色谱法相比，此方法具有操作方便、进样量少、分析时间较短等优点。白雪等[15]还通过胶束毛细管电泳法同时测定白花龙胆和达乌里龙胆中的獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷、马钱苷酸含量。雷琼等[16]采用胶束毛细管电泳法同时测定白花龙胆、达乌里龙胆和蓝玉簪龙胆中的龙胆苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷、落干酸这4种环烯醚萜类成分的含量，发现此方法稳定可行。王文骊[17]采用高效液相色谱法对蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷的含量进行测定，结果发现龙胆苦苷与其他组分分离效果良好。卢永昌等[18]采用反相高效液相色谱法同时测定蓝玉簪龙胆花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的含量，发现该方法简便，结果准确且可靠。李姗等[19]采用HPLC测定方法比较高原地区多基源藏药蒂达的4种龙胆科植物蓝玉簪龙胆、肋柱花、铺散肋柱花和椭圆叶花锚中的3种环烯醚萜苷类化合物獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龙胆苦苷的含量，结果发现龙胆苦苷只存在于蓝玉簪龙胆中，而獐牙菜苦苷、獐牙菜苷在蓝玉簪龙胆中的含量小于肋柱花和铺散肋柱花中的含量，由此可知，环烯醚萜苷类成分可以作为区分龙胆科不同属植物的标志性成分。珠勒根-其木格中萜类化合物见图1、表1。

图1 珠勒根-其木格中萜类化合物结构

表1 珠勒根-其木格中萜类化合物

2.2 黄酮类 龙胆中含有多种黄酮类成分,主要有异荭草苷、异牡荆苷、獐牙菜素等。张秀艳等[26]从小秦艽Gentianadahurica干燥花中分离得到12种黄酮类成分，其中8种成分是从该植物中首次分离得到，包括山柰酚(49)、柚皮素(50)、木犀草素(52)、(2S)-5,4′-二羟基-7-O-β-D-葡萄糖-2,3-二氢黄酮(53)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(54)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(55)、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(56)、木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(57)。白雪等[14]首次建立区带毛细管电泳测定白花龙胆中异荭草苷含量的方法，同时也建立了胶束毛细管电泳法测定龙胆科药材白花龙胆和达乌里龙胆中异荭草苷含量的方法。丁艳霞等[30]采用HPLC法同时测定达乌里龙胆花中异荭草苷、异牡荆苷的含量，测得其含量范围分别为1.11～7.46、0.59～1.70 mg/g。珠勒根-其木格中黄酮类化合物见图2、表2。

图2 珠勒根-其木格中黄酮类化合物结构

表2 珠勒根-其木格中黄酮类化合物

图3 珠勒根-其木格中山酮类化合物结构

2.4 有机酸类 Yang等[25]从白花龙胆中首次分离得到5个有机酸类化合物，分别为油酸(71)、亚油酸(72)、二十九烷酸(73)、2,3-二羟基苯甲酸乙酯(74)、邻苯二甲酸正丁异丁酯(75)，见图4、表4。

图4 珠勒根-其木格中有机酸类化合物结构

表3 珠勒根-其木格中山酮类化合物

表4 珠勒根-其木格中有机酸类化合物

2.5 生物碱类 秦艽本身不含生物碱，但在提取分离过程中使用氨液，使得化学很不稳定的龙胆苦苷(裂环烯醚萜类)与氨水产生反应，形成矫作物，得到秦艽碱甲素(76)、秦艽碱丙素(77)等。目前，生物碱仍然是秦艽主要质量标准控制成分之一。珠勒根-其木格中生物碱类化合物见图5、表5。

2.6 甾体类 甾体类化合物在自然界中广泛存在，是一种以环戊烷骈多氢菲的甾体母核的成分。目前，从达乌里龙胆的根部分离得到3个甾体类化合物，分别为ajugasterone C(79)、20-hydroxyecdysone(80)、20-hydroxyecdysone 3-acetate(81)[10]，见图6、表6。

图5 珠勒根-其木格中生物碱类化合物结构

表5 珠勒根-其木格中生物碱类化合物

图6 珠勒根-其木格中甾体类化合物结构

表6 珠勒根-其木格中甾体类化合物

2.7 木脂素类 木脂素类化合物属于植物雌激素，具有清除体内自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌等作用。目前，从达乌里龙胆的根部分离得到1个新的木脂素类化合物，为7S,8R,8R-(-)-lariciresinol-4,4′-bis-O-β-D-glucopyranoside(87)[10]，见图7、表7。

2.8 香豆素类 Wang等[10]从达乌里龙胆的根部分离得到coniferin(88)，白花龙胆中分离得到5,8-二羟基呋喃香豆素(89)[19]，见图8，表8。

图7 珠勒根-其木格中木脂素类化合物结构

表7 珠勒根-其木格中木脂素类化合物

图8 珠勒根-其木格中香豆素类化合物结构

表8 珠勒根-其木格中香豆素类化合物

2.9 微量元素 田静等[36]采用电感耦合等离子体质谱法测定达乌里龙胆中的Fe、Ni、Cu、Zn、As、Ag、Cd、Pb、Cr、Mn等10种金属元素的含量，结果发现，Fe、Zn、Mn等元素在达乌里龙胆中的含量较高，As、Ag、Cd等元素的含量较低。

3 药理作用

3.1 抗炎 杨芳等[37]研究发现，白花龙胆花水提取物和乙醇提取物中、高剂量组对于二甲苯所致的小鼠急性耳肿胀和小鼠腹部毛细管通透性都有抑制作用，提示白花龙胆花具有抗炎活性。刘红等[38]通过实验证实，白花龙胆提取物对氨水导致的大鼠急性咽炎模型有改善作用，其作用机制可能与降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平有关。嘎鲁等[39]通过小鼠耳肿胀实验和肉芽肿实验发现，白花龙胆醇提物在一定浓度下具有抗炎作用。

3.2 抗氧化 邬卫东等[40]研究发现，小秦艽花总黄酮有较强的清除DPPH自由基的能力，且具有较好的抗氧化活性；随后，邬卫东等[41]对小秦艽花乙醇提取物依次进行石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，结果不同极性部位均具有一定的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有清除DPPH自由基和羟基自由基的能力。Dou等[42]研究发现，从蓝玉簪龙胆花中提取分离出来的芹菜素是黄酮类化合物，它具有抗氧化活性，不仅能减少活性氧的产生，而且能调节胆固醇新陈代谢。

3.3 抗病毒 卫飞鹏等[43]研究发现，蓝玉簪龙胆水煎液相比正丁醇、氯仿、乙酸乙酯提取液，在抑制病毒进入细胞方面效果显著，同时用蓝玉簪龙胆水煎液灌胃治疗感染呼吸道合胞病毒(RSV)的小鼠，病理切片显示，与对照组比较，药物组小鼠炎性渗出明显减轻；免疫荧光实验显示，经药物处理的切片荧光亮度及颗粒数均减少，提示蓝玉簪龙胆在抗RSV增殖和抗RSV引起的炎症2个方面都表现出一定效果。

3.4 抗菌 刘菁菁等[44]将蓝玉簪龙胆分别以乙醇、氯仿、正丁醇、蒸馏水提取，得到不同极性部分的产物，且各极性组分对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)菌株均有不同程度的抑菌作用，其中正丁醇组分的抑菌作用最强，其次为乙醇、水层组分。耿晓玲等[45]研究发现，蓝花龙胆提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用。耿晓玲等[46]还采用固液浸提法来提取蓝玉簪龙胆花中的有效成分，并通过体外抑菌试验评价其抑菌作用，结果表明，蓝玉簪龙胆花提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最为明显，MIC值为99.3 mg/L，对大肠杆菌(MIC值为225.5 mg/L)和白色念珠菌(MIC值为126.8 mg/L)的抑制作用其次，对沙门氏菌和志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用不明显(MIC值均大于250 mg/L)。

3.5 保肝 Cao等[47]研究发现，达乌里龙胆乙醇提取物可以减轻小鼠的肝脏损伤及脂肪变性，其作用可能与调节甘油三酯和胆固醇的过程有关。Zhang等[48]研究发现，蓝玉簪龙胆甲醇提取物对四氯化碳诱导的小鼠肝脏损伤有保护作用，其部分作用是由于它通过清除四氯化碳相关的自由基的能力。李鹏等[49]将大鼠随机分为正常组、模型组和蓝玉簪龙胆组，除正常组外均注射二甲基亚硝胺来建立大鼠肝纤维化模型，同时给予相应药物治疗，检测各组大鼠血清中谷丙转氨酶和透明质酸，肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)等指标，结果发现，与模型组比较，蓝玉簪龙胆组大鼠肝组织中的MAO、MDA水平降低，SOD、GSH水平升高，HE和Masson染色观察到肝纤维化程度改善。

3.6 抗肿瘤 樊慧等[50]研究表明，从小秦艽提取分离得到的2个三萜类化合物具有一定的抗MCF-7乳腺癌细胞增殖作用。

3.7 其他 耿铮等[51]将蓝玉簪龙胆乙醇提取液浓缩并经正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚萃取，得到不同极性部分产物，除正常组外将其余各组小鼠诱导成慢性支气管炎模型，造模成功后给药治疗，检测各组小鼠肺组织总抗氧化能力(T-AOC)、SOD活性，血清中TNF-α、IL-10水平变化，HE染色观察各组小鼠肺组织病理学变化，结果显示，与模型组比较，正丁醇组、水层组小鼠肺组织T-AOC活性升高，乙酸乙酯组、正丁醇组小鼠肺组织SOD活性升高，乙酸乙酯组、正丁醇组小鼠血清中TNF-α、IL-10水平降低(P<0.05，P<0.01)，HE染色病理切片表明，经蓝玉簪龙胆乙醇提取液各极性组分治疗后，乙酸乙酯组、正丁醇提取物组小鼠慢性支气管炎气道损伤显著改善。

4 小结及展望