黄牛人工授精技术操作要点

郑加银 孟元华 扎西祝玛

1.四川省凉山州凉山半细毛羊原种场，四川布拖 615350；2.四川省凉山州农业农村局，四川西昌 615000；3.四川省木里县农业农村局，四川木里 615800

黄牛人工授精技术的应用为四川省凉山州黄牛养殖业的经济发展作出了巨大贡献。为了加速本地黄牛品种改良，切实改善本地黄牛个体小、生长速度慢、产肉率低的问题，本文将推广普及黄牛人工授精技术。

1 黄牛人工授精站（点）建设

人工授精站（点）的建设应因地制宜，合理布局，充分考虑建站地点的能繁母牛数量，交通条件，人工授精技术员配备情况以及建站后的配种效益等。尽量结合国家建设项目，解决站（点）冻精来源及购买液氮、液氮罐等运行经费。建在交通方便、能繁母牛相对较多、群众养牛积极性高、有一定规模养牛户的乡（镇）。人工授精技术员可实行市场化运作方式实行合理收费。

2 黄牛冷冻精液的选择

2.1 购买正规公司的冷冻精液

可广泛收集信息和数据，选择信誉度高、生产技术先进、冷冻精液品质优良稳定、有国家种畜生产经营许可证的正规养殖公司产品[1]。

2.2 公牛冷冻精液的选择

所选公牛应具有完整的繁殖档案。如系谱、身体结构评分、育种价值报告、公牛后代测定、公牛亲本表现、遗传可靠性等，选择改良效果明显的育种公牛生产的冷冻精子。

2.3 冷冻精液的质量要求

剂量、生产单位、公牛品种、公牛编号、生产日期或批号打印在薄壁管壁上。质量要求：剂量≥0.18 mL，精子活力≥0.35，解冻后，具有有效活力的精子数量≥800 万，畸形率≤18%。

3 黄牛冷冻精液的保存

3.1 储 存

用液氮容器储存，将冷冻精子浸入液氮生物容器中，并在液氮罐中保持足够的优质液氮。应经常检测并及时添加液氮生物容器中的液氮量，以确保冷冻精子因液氮减少而失效。

3.2 分 装

冷冻精液储存在液氮罐中时，应采用50～100件/L 的小包装，以便于取用。

3.3 清 洁

定期对液氮罐进行清洁和检查，一般每年要对液氮罐的内罐进行清洗1 次，以清除积水和污垢。

3.4 开 罐

打开液氮罐时，罐盖儿应当倒置，以免污染。

4 母黄牛发情规律与初配标准

4.1 发情规律

黄牛属于常年发情的动物，但发情主要是集中在牧草丰盛、体况良好的夏秋两季。本地黄牛发情周期为18～22 d，平均为20 d。

4.2 初配标准

黄牛16～20月龄达性成熟，母牛体重达200 kg可初配。经产母牛分娩后60～90 d 即可配种[2]。

5 人工授精器械的准备和消毒

5.1 设备准备

人工授精前准备好：1 个30 L 冷冻精液储存液氮罐，2 支卡苏枪，2 个1 000 mL 烧杯，2 个长镊子，1 个普通显微镜，2 个温度计，1 把细管剪刀，工作服，雨鞋，一次性长臂手套，水桶，毛巾，肥皂，消毒棉球等。

5.2 仪器消毒

人工授精前要对卡苏枪、授精衣、镊子、小管剪等用臭氧或紫外线消毒0.5～1 h。

6 人工授精的具体操作

6.1 输精准备

1）授精员准备工作。剪去指甲，穿好工作服，清洗双手并消毒。

2）器械准备。准备好卡苏枪、外套管、细管剪、烧杯、温度计等所需器材，并进行无菌清毒处理。

3）做好场地和母牛牛体尤其是外阴部的清冼和消毒工作。

6.2 冻精解冻

在烧杯中装入300～500 mL 的温水，水温控制在38～40 ℃。在液氮罐内夹取细管冻精1 支，放入温水中晃动10～15 s 取出。用棉球擦拭细管冻精上的水珠，擦拭好即可使用。取出冻精后，及时盖上罐塞，防止挥发和异物落入罐中。

6.3 精子检查

1）精子活率检查。精子的活率是指直线前进的精子占总精子数的百分率。在显微镜下观察，全部精子都做直线运动评为1 级，90%的精子做直线前进运动为0.9 级，以下以此类推[3]。

2）精子密度检查。指每毫升精子的数量。在显微镜下，根据视野中的精子数量，可分为致密、中等和稀释水平。

3）精子质量评定。精子活力低于0.35 的精子不能使用。

6.4 输精时间

输精一般在母牛发情开始后4～16 h。主要从母牛的以下3 个方面确定。外部表现：当发情母牛进入发情后期时，母牛变得安静，食欲逐渐恢复正常；当其它牛爬上去时，臀部避开外阴，肿胀逐渐消退，出现皱纹。黏液：阴道黏膜呈暗红色，黏液量小，黏液颜色混浊或灰白色。直肠检查：宫颈由外向内逐渐变硬，但有弹性。毛囊壁薄，波动明显，触摸时有破裂感。

6.5 输精次数

为确保授精成功率，一般一个发情期可输精2次，每次间隔时间为8～10 h。如果次日还有发情表现，应进行第3 次输精。

6.6 输精方法

1）直肠-宫颈灌注。授精人员，一方面通过直肠抓住并固定宫颈；另一方面通过直肠经阴道将授精器插入宫颈。

2）直肠深部精子输送。授精人员，一方面通过直肠固定宫颈；另一方面通过阴道将授精器插入宫颈，到达卵泡发育侧的子宫体或子宫角，将精液推入宫颈3～5 cm。

7 人工授精的注意事项

1）切割后（进入生殖道前），未经消毒，小管内精液不得接触任何物体。

2）如果外阴用清水清洗，必须用0.1%高锰酸钾溶液清洗。精子输送枪头不得接触被清水污染的外阴。

3）授精枪不得直接面对授精人员的身体，以免母牛退场时将授精枪直接插入生殖道造成伤害。

4）托起母牛的尾根或后躯，避免意外伤害授精人员。授精后，慢慢拔出授精枪，捏阴蒂或腰部中心，使腰部塌陷，防止精液倒流。

5）在授精过程中，记住缓慢插入，适合深度，轻轻注射，缓慢退出，防止流动。插入输精枪时，先将输精枪以45 ℃的角度斜向上插入10～15 cm，然后平行向前插入，直至到达宫颈。

6）注意保护自身安全，避免被牛踢。

7）配种后随时记录配种结果。

8 结 语

采用人工授精技术，可克服因本地黄母牛个体小直配困难、公母牛所处地域相距过远、精液保存时间短等问题，同时可提高受胎率，降低不孕率，防止疾病传播，提高肉牛养殖的水平和质量，大幅增加养殖户的经济收入。