乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 水平及其与肝功能的相关性分析

陈媛 荀运浩 谌翠容 孙振江

杭州市西溪医院肝病科，浙江杭州 310023

乙型肝炎主要是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染导致，该病可导致患者短时间内出现急性肝功能失代偿，继发慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure，ACLF），也称作乙型肝炎病毒感染慢加急性肝衰竭（hepatitis B virus infection plus acute liver failure，HBV-ACLF）[1,2]。HBV-ACLF 患者具有起病迅速、病情进展快、病情急、治疗难度大、预后差等特点，短期病死率较高。积极了解疾病发生的危险因素，寻找和发病有相关性的预警指标，对指导疾病的临床治疗具有重要意义。目前许多研究认为，HBV 长期刺激可诱导肝脏血管炎症，对肝脏产生持续性损伤，是导致HBV-ACLF 发病的重要危险因素之一[3，4]。因此，本研究通过观察HBV-ACLF 患者血清白细胞介素-12（interleukin-12，IL-12）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、可溶性生长刺激表达基因2（soluble growth-stimulating expression gene 2，sST2）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）水平的变化，旨在探讨其临床意义及与肝功能的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2020 年6 月至2021 年6 月杭州市西溪医院收治的50 例HBV-ACLF 患者（HBV-ACLF 组）、50 例单纯慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者（CHB 组）作为研究对象，纳入标准：①HBV-ACLF 组诊断参照《肝衰竭诊治指南（2018年版）》[5]，CHB 诊断参照《慢性乙型肝炎防治指南（2015 年更新版）》[6]，根据临床症状、肝组织病理学检查、实验室指标检查等确诊；②患者依从性好，可配合研究。排除标准：①其余病毒感染；②伴有药物性肝病、酒精性肝病、自身免疫性肝病等；③原发性肝癌；④伴有先天性免疫功能异常；⑤伴有其余对器官功能、生命安全有影响的重大疾病；⑥伴有精神系统、神经系统异常者。并纳入同期在杭州市西溪医院接受体检的健康人50 名作为对照组，经检查肝、肾、心功能，血尿常规均无异常。HBV-ACLF 组男29 例、女21 例；年龄34～69岁，平均（48.73±8.42）岁；病程1～9 年，平均（4.82±1.67）年；CHB 组男26 例、女24 例；年龄28～67 岁，平均（47.69±9.11）岁；病程1～8 年，平均（4.75±1.80）年；其中轻中度CHB 患者28例、重度CHB 患者15 例、CHB 肝硬化患者7 例。对照组男25 例、女25 例；年龄30～65 岁，平均（48.11±9.52）岁。3 组患者的性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究已通过杭州市西溪医院伦理委员会批准（伦理审批号：LKTZ-2020-53）。

1.2 检测指标

所有受试者纳入研究后次日晨取空腹静脉血8ml，置3500 转/min 离心机离心处理10min，取血清标本待检。肝功能各项指标检测：天门冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、总胆红素（total bilirubin，TBiL）、白蛋白（albumin，ALB）试剂盒均购于上海科华生物技术有限公司。血清IL-12、VEGF、sST2、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）检测均选用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒进行，试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 23.0 统计学软件对数据进行处理分析，若数据符合正态分布，计量资料以均数±标准差（）表示，多组比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用最小显著差异（least significant difference，LSD）-t检验，计数资料以例数（百分比）[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，相关性分析采用Pearson 分析法，以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组患者肝功能各项指标比较

HBV-ACLF 组AST、ALT、TBiL 均高于CHB组与对照组，ALB 均低于CHB 组与对照组，CHB组AST、ALT、TBiL 均高于对照组，ALB 低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 3 组患者肝功能各项指标比较（）

表1 3 组患者肝功能各项指标比较（）

注：与HBV-ACLF 组比较，*P＜0.05；与CHB 组比较，#P＜0.05

2.2 血清 IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 水平比较

HBV-ACLF 组血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平均高于CHB 组与对照组，CHB 组血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 3 组患者血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 水平比较（）

注：与HBV-ACLF 组比较，*P＜0.05；与CHB 组比较，#P＜0.05

2.3 血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 和肝功能指标的相关性分析

Pearson 相关性分析显示，血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 和AST、ALT、TBiL 均呈正相关，与ALB 呈负相关（P＜0.05），见表3。

表3 血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 与肝功能指标的相关性分析

3 讨论

ACLF 的发病机制较为复杂，常见病因包括HBV感染、慢性酒精性肝病等，其中由于HBV 所导致的ACLF 占比可高达80%以上[7,8]。HBV-ACLF 患者发病后常出现急性黄疸加重、凝血衰竭等症状，并继发腹水、肝性脑病、感染、电解质紊乱等并发症，90d 内病死率可高达30%～60%，严重威胁患者的生命安全[9,10]。

IL-12 是一种促炎因子，主要分泌来自于Th1 细胞、树突细胞，与细胞免疫调节功能具有密切相关性[11]。有研究显示，HBV 在诱发机体免疫应答抵抗过程中，可对肝脏造成免疫性损伤，并促使Th1 细胞分泌IL-12，且IL-12 的增加可形成负反馈机制，对Th1 型细胞的免疫应答产生抑制作用，导致机体难以有效清除HBV 感染，从而引发一系列慢性损伤[12]。VEGF 目前主要应用于评价机体血管生成情况[13]，本研究结果显示，VEGF 表达的高低与肝功能损伤程度也具有相关性，且VEGF 和肝硬化患者的肝功能程度密切相关[14]。另有报道指出，血清VEGF 有助于预测肝癌切除术后患者肝衰竭的发生风险[15]。sST2 主要存在于外周血之中，在机体炎症、细胞凋亡、组织坏死等刺激下，随着体内炎性反应的激活，其表达出现急剧升高[16,17]。MCP-1 来自于单核巨噬细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等，对巨噬细胞的聚集、黏附过程可产生趋化作用[18,19]。李劲等[20]报道显示，血清sST2、MCP-1 在CHB 患者、肝衰竭患者中的表达存在明显差异，有助于患者病情的评估。

本研究通过观察发现，血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1 水平在HBV-ACLF 患者中明显升高，而CHB患者次之，且与肝功能指标具有显著相关性，主要原因是由于肝脏具有特殊的免疫微环境，含有丰富的Kupffer 细胞，肝脏中的Kupffer 细胞在全身单核巨噬细胞中的占比可高达80%以上，当机体遭受到HBV 感染后，其会刺激肝脏Kupffer 细胞出现大量增殖，从而刺激单核巨噬细胞释放MCP-1，增加其表达，同时当肝脏遭受到炎症、坏死等损伤后，也能导致IL-12、sST2 等大量释放，且随着肝脏损伤程度的进一步加重，各指标的升高程度也会更加明显。此外，在CHB 的进展过程中，可逐渐加重肝脏血管炎性反应，且随着肝组织破坏的加重，易出现血管阻塞等情况。肝细胞在缺氧、缺血条件下，可促使VEGF 大量合成，使血管通透性增加，进一步降低肝组织内的有效血容量，加重肝细胞的缺氧、缺血程度，从而形成一种恶性循环。

综上所述，血清IL-12、VEGF、sST2、MCP-1水平在HBV-ACLF 患者中表达明显升高，与患者的肝功能具有显著相关性，有利于疾病的诊断和治疗。