一例鸡异刺线虫病的诊断与防治

田水凤

(湘西自治州龙山县红岩溪镇农业综合服务中心，湖南 龙山 416800）

鸡异刺线虫病是一类常见的禽类寄生虫病[1]，其病原体主要为鸡异刺线虫。鸡异刺线虫为一类小型线虫，它通常寄生于鸡的盲肠，引起鸡出现生长发育不良、消瘦、贫血、下痢及食欲废绝等一系列临床症状[2]。盲肠肿大、肠壁增厚及产生结节病变是鸡异刺线虫病特有的病理特征[3]。各种日龄的鸡均能感染鸡异刺线虫，但该虫主要危害于雏鸡，可导致雏鸡生长迟缓、极度消瘦和便血[4]。成年鸡轻度感染该病不出现任何临床症状，只当严重感染时才导致产蛋量下降或停止[5]。此外，蚯蚓是异刺线虫的保虫宿主，而异刺线虫又是组织滴虫的保虫宿主。异刺线虫携带组织滴虫，鸡因吞食含有异刺线虫的蚯蚓常暴发组织滴虫病，造成巨大的经济损失，严重阻碍全球养禽业的发展。

1 发病情况

2019年7月24日，湖南湘西州龙山县某养殖户于林间放养800多只3月龄大的广西三黄鸡。最近，某些鸡出现下痢、羽毛松乱而无光泽，食欲废绝或下降，体重减轻等一系列症状。部分病鸡排出带血稀粪，几天后因衰弱而亡（已死亡156只，病死率达19.5%）。养殖户曾以为是某细菌引起的传染病，一度使用阿莫西林、环丙沙星、四环素等药物对病鸡进行治疗，但治疗效果不理想。遂邀请笔者前往该养殖场进行诊治。

2 临床症状

大部分病鸡在感染该病的前期，除间歇性出现腹泻（粪便呈米黄色或褐色）之外无任何明显的临床症状。因治疗不当或不及时逐渐表现出生长发育不良、下痢、体重减轻、羽毛松乱而无光泽，食欲废绝或下降等一系列临床症状。后期，病鸡排带血稀粪，体格严重消瘦，胸骨突出，几天后因衰弱而亡。

3 剖解及病理变化

挑选1只病鸡进行解剖，可见病鸡羽毛杂乱且毫无光泽、体格消瘦、胸骨突出、泄殖腔附近的羽毛粘有粪便。剖开腹腔，可见鸡盲肠肿大。剖解肠道及盲肠，可见盲肠黏膜增厚、潮红出血，部分黏膜出现结节病变。整个盲肠内存在大量白色线形、尾端尖细，长度约为7mm～15mm的线虫。

4 诊断

4.1 初步诊断

根据临床症状、养殖户用药情况、剖检所见的虫体形状及笔者临床实践经验，初步诊断该病为鸡异刺线虫病与组织滴虫病混合感染。

4.2 分子生物学诊断

取病鸡盲肠道内容物及新鲜粪便于自封袋中，收集虫体于装满70%乙醇溶液的小瓶，两者置于冰盒内，拿回实验室进行分子生物学检测。用粪便DNA提取试剂盒（购买于北京天根生化科技有限公司）提取盲肠内容物及粪便中的总DNA；用血液、组织DNA提取试剂盒（购买于北京天根生化科技有限公司）提取虫体的总DNA。将提取好的DNA样品，置于-20℃保存，备用。

根据已公布异刺线虫cox1基因序列及组织滴虫18SrDNA基因序列设计两对引物，即cox1-F(CG TCTTGAGTTGGCTAAGC)，cox1-R(CAATAACCAT CGTAGCAGCC)；18SrDNA-F(ACTGTGAACAAATC AGGACG)，18SrDNA-R(CTGGTTCTGGTAAGTTTC CC)，分别对已提取的虫体DNA和盲肠内容物及粪便DNA进行扩增。反应体系均为50μL，反应条件均为：95℃（预热），5min；95℃（变性），30s；53℃（退火），30s；72℃（延伸），1min；共35个循环；最后72℃（延伸），5min。反应完成后，吸取5μLPCR产物在1.5%琼脂糖上进行凝胶电泳检测，结果显示cox1基因扩增结果为阳性，而内容物的18S rDNA基因扩增结果为阴性。将阳性PCR产物发送至上海生工生物有限公司进行测序。

将获得序列进行相互比对，结果显示两者cox-1序列的相似度为100%。将序列在GenBank上进行BLAST搜索分析，发现所获得的序列与鸡异刺线虫cox-1序列的相似度为99%，从而确定该病病原体为鸡异刺线虫，确诊该病为鸡异刺线虫病。

5 治疗

根据确诊结果，我们采用左旋咪唑+甲硝唑两种药物对病鸡及健康鸡群进行驱虫。使用左旋咪唑对鸡群进行驱虫，按20～25mg/kg比例拌料饲喂，1次/天，连喂5天[6]；甲硝唑按250mg/kg比例拌料饲喂，连喂1周[7]。此外，在水中添加B族维生素和维生素E，以增强鸡的抵抗力[8]。

6 预防措施

6.1 加强饲养管理

养殖户在进行饲料配比的过程中，应当注重鸡饲料的营养均衡搭配，增加维生素和矿物质的含量，以期提高鸡的身体素质，增强其抵抗力[9]。

6.2 改善养殖场内的卫生条件

及时清扫鸡舍，对鸡舍进行定期消毒，确保鸡舍地面干燥，鸡粪要置于一偏僻处堆积发酵[10]。

6.3 定期驱虫

作好计划性驱虫，对成年鸡每季度进行1～2次定期驱虫，对雏鸡每月进行驱虫一次。一旦发现病鸡立即隔离、治疗，驱虫的粪便堆积发酵。

6.4 杀灭中间宿主

鸡异刺线虫的保虫宿主为蚯蚓。根据蚯蚓的生活属性，在鸡场内使用杀虫剂对蚯蚓进行灭杀。

7 小结

鸡异刺线虫病是由几种异刺线虫寄生于鸡的盲肠所引起的一种常见的寄生虫病。该病主要引起鸡出现生长发育不良、消瘦、贫血、下痢及食欲废绝等一系列临床症状。其主要病理特征为盲肠肿大、肠壁增厚及产生结节病变。幼龄鸡发病较成年鸡严重，鸡大量感染则会导致死亡。然而，成年鸡轻微感染该病一般不出现任何明显的临床症状，容易被养殖户忽视，最易成为传染源。该病常与组织滴虫病混合暴发，病鸡所表现出来的症状也相似于鸡球病和大肠杆菌病，极容易误诊。然而，传统的检测技术操作过于繁琐，造成诊治极为不便，但利用分子技术检测不仅克服传统检测技术的缺陷，同时也大大提高了检测结果的精确性，为养殖户对该病的诊断和治疗提供了便捷有效的途径。此外，本文所采用的诊断和防治方法，也为以后的临床诊疗提供技术参考。 □