宁德地区部分规模化猪场猪伪狂犬病流行病学调查

叶裕香

（福建省宁德市动物疫病预防控制中心，福建 宁德 352100）

猪伪狂犬病（Porcine pseudorabies）是一种急性、高度接触性传染病，我国将其列为二类动物疫病。该病由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引发，各阶段猪群均可感染：新生仔猪主要侵害神经系统以及消化系统；妊娠母猪主要引起流产、死胎，公猪主要引起繁殖障碍；妊娠母猪及公猪均会出现呼吸系统临诊症状。猪伪狂犬病属于免疫抑制性疾病，感染后的猪不仅长期带毒、排毒，还易并发感染其他疾病，严重危害着养猪业的发展，是当前养猪行业的重大疫病之一。

为了解宁德地区规模化猪场猪伪狂犬病感染情况，本文对2019～2021年宁德地区部分规模化猪场开展猪伪狂犬病流行病学调查，采集样品如下：规模场血清样品及环境拭子样品各3240（头）份，屠宰场组织样品1080份、全血样品1350份、环境拭子样品1620份；分别对以上样品进行血清学、病原学检测。之后，对检测结果进行统计、分析，得到我市猪伪狂犬病流行规律，为我市猪场防制猪伪狂犬病及主管部门制定科学防控措施提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源（1）血清学样品 采集对象为宁德市9个县（市、区）的27个规模养殖场，平均每个养殖场采集血清样品、环境拭子样品各20份，2019～2021年共采集6次，合计采集血清样品、环境拭子样品3240（头）份。

（2）病原学样品 采集对象为宁德市9个县（市、区）的9个定点屠宰场：每个屠宰场采集组织样品、全血样品及环境拭子样品20～30份，2019～2021年共采集6次，合计采集组织样品1080份、全血样品1350份、环境拭子样品1620份。

1.1.2 主要试剂PRV（gB）及PRV（gE）抗体ELISA检测试剂盒购自爱德士生物科技有限公司，PRV荧光PCR检测试剂盒购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，其他化学试剂、耗材和药品主要购自生工生物工程(上海)股份有限公司。

1.1.3 主要设备 高速台式冷冻离心机、Brand可调微量移液器、Tecan infinite F50酶标仪、电热恒温培养箱、QIAGEN TissueLyserⅡ、SW-CJ净化工作台、奥盛Auto-Pure32A核酸提取仪、Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR Systems。

1.2 方 法

1.2.1 PRV（gB）及PRV（gE）抗体ELISA检测 按照爱德士生物科技有限公司试剂盒使用说明书所提供的方法进行检测和结果判断。

1.2.2 PRV病原检测

1.2.2.1 核酸提取 使用奥盛Auto-Pure32A核酸提取仪，结合试剂盒使用说明书，自动提取RNA。

1.2.2.2 病毒扩增 使用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司PRV荧光PCR检测试剂盒进行扩增，按照试剂盒使用说明书进行操作及结果判断。

2 结果

本次流行病学调查，主要是对2019～2021年宁德地区部分规模化猪场、屠宰场所采集的血清、组织、环境拭子等样品采用ELISA方法和荧光定量PCR方法分别进行抗体和病原检测，检测结果如下。

2.1 规模养殖场监测情况

2019～2021年共检测规模养殖场162个（次）：检测猪血清样品3240头份，检得猪伪狂犬病gB抗体平均个体阳性率83.86%，gE抗体平均个体阳性率7.93%，检出gE抗体阳性场群82个（次），gE抗体场群阳性率为50.62%；检测猪场环境拭子样品3240份，检出阳性样品108份，检出阳性场群60个（次），平均个体阳性率和场群阳性率分别为3.33%和37.04%。（见表1和表2）。

表1 2019～2021年规模养殖场猪伪狂犬病血清学调查统计表

表2 2019～2021年规模养殖场猪伪狂犬病病原学调查统计表

2.2 屠宰场点监测情况

2019～2021年共检测屠宰场点54个（次）：检测组织样品1080份，检出阳性样品23份，阳性场点22个（次），平均个体阳性率和场点阳性率分别为2.13%和40.74%；检测全血样品1350份，检出阳性样品14份，阳性场点14个（次），平均个体阳性率和场点阳性率分别为1.04%和25.93%；检测环境拭子样品1620份，检出阳性样品63份，阳性场点52个（次），平均个体阳性率和场点阳性率分别为3.89%和96.30%（见表3）。

表3 2019～2021年屠宰场点猪伪狂犬病病原学调查统计表

3 分析

3.1 规模养殖场猪伪狂犬病血清学调查

经观察可知，2019～2021年宁德地区规模化养殖场猪伪狂犬病血清样品gB抗体阳性率均在80%以上，2020年较2019年阳性率明显上升，但2021年有所回落，呈现出先升后降的趋势。gE抗体个体阳性率均在10%以内，2020年较2019年阳性率有所下降，但2021年则又上升至8.52%；gE抗体场阳性率均在50%左右，与个体阳性率相似，也呈现出先降后升趋势，2021年场阳性率甚至超过2019年（见图1）。

图1 2019～2021年规模养殖场猪伪狂犬病血清学阳性率

3.2 规模养殖场猪伪狂犬病病原学调查

经观察可知，2019～2021年宁德地区规模化养殖场猪伪狂犬病环境拭子样品个体阳性率在2%～4%，较平稳，上下起伏波动不大；2019年场阳性率为35.19%，2020年有些许下降，降至33.33%，但2021年又急剧上升。病原学个体阳性率及场阳性率都呈现出先升后降的趋势，且2021年二者都超过2019年（见图2）。

图2 2019～2021年规模养殖场猪伪狂犬病病原学阳性率

3.3 屠宰场点猪伪狂犬病病原学调查

经分析，2019～2021年宁德地区屠宰场点猪伪狂犬病病原学阳性率见图3～4。可知，不论是个体阳性率还是场阳性率，都表现出相同的流行趋势，即：组织样品与环境拭子样品的流行趋势都表现为先降低后升高，而全血样品的流行趋势则表现为逐年升高。

图3 2019～2021年屠宰场点猪伪狂犬病病原学个体阳性率

同时，通过观察可以发现，屠宰场点样品的个体阳性率整体处于较低水平：环境拭子个体阳性率为3%～5%、组织样品个体阳性率为1%～3%、全血样品个体阳性率则在2%以内。而屠宰场点样品的场阳性率整体处于较高水平：环境拭子场阳性率最高，均在80%以上，其中2019年、2021年的环境拭子场阳性率均达100%；组织样品场阳性率次之，为25%～50%；全血样品场阳性率相对最低，为15%～40%。

图4 2019～2021年屠宰场点猪伪狂犬病病原学场阳性率

4 讨论

上述部分规模化养殖场猪伪狂犬病gB抗体检测结果表明，宁德市大部分规模养殖场都有免疫猪伪狂犬病疫苗，且免疫效果较好，猪群抗体水平整体较高，猪能够获得较好的免疫保护，避免了因该病而引发大规模疫情的可能。gE抗体检测结果表明，在宁德市养殖场当中普遍存在伪狂犬病野毒感染现象，虽然个体阳性率均在10%以下，相对较低，但场阳性率却达50%左右；病原学检测结果进一步验证了伪狂犬病病毒在宁德市规模养殖场中普遍存在的现状。

根据2017～2019年宁德地区猪伪狂犬病流行情况调查，结合此次调查结果，可以发现gB抗体阳性率于2017～2020年，一直高于80%，且呈现逐年升高趋势，但2021年则出现下降的现象；而gE抗体阳性率则正好相反，2017～2020年逐年降低，但2021年则升高。之所以出现上述现象，原因如下：（1）宁德市于2016年开始大力开展猪伪狂犬病净化宣传、推广及试点示范工作，经过几年推广，猪伪狂犬病gB抗体阳性率升高、gE抗体阳性率降低，成效显著；（2）2018年8月非洲猪瘟传入我国后，宁德市各养殖场主生物安全意识有所提高，生物安全措施到位，进一步巩固了所取得的成效；（3）自2021年初起，生猪价格持续走低，到2021年6月，猪价开始跌破成本线，而大豆、玉米等却因动荡的国际局势、价格飙升，价格使得养殖场主入不敷出，或多或少的降低了生物安全意识，进而出现安全漏洞，最终导致2021年gB抗体阳性率降低、gE抗体阳性率升高。

屠宰场点猪伪狂犬病病原学检测结果表明，宁德市屠宰场点带猪伪狂犬病毒的形势极其严峻；特别是环境拭子样品的场阳性率，最高者可达100%，这需要各从业者及相关人员引起高度重视。屠宰场点环境拭子样品的阳性率之所以居高不下，主要原有：（1）由于猪伪狂犬病作为二类动物疫病，其传染性、危害性与非洲猪瘟、口蹄疫等重大动物疫病相比要弱很多，屠宰场点工作人员对其认知度要少很多、重视程度也自然不够，使得该病在屠宰场点检出率较高。（2）经过对各屠宰场点实地调研可知，部分场点存在待宰间猪压栏隔夜、屠宰间消洗不彻底及卫生死角多等现象，这自然使得所采样品的阳性检出率极高。

本流行病学调查报告通过对宁德市部分规模养殖场的血清、环境拭子及屠宰场的组织、全血、环境拭子等样品进行检测，再对检测结果进行统计、分析，得到宁德市2019～2021年的流行现状，并对结果加以讨论，为宁德市猪伪狂犬病的防制提供了依据。同时，养殖场主等从业者可以根据以上猪伪狂犬病的抗原、抗体消长规律制定或调整相应的免疫程序，以保障猪健康，进而保持猪场持续盈利。