复合微生态制剂对湖羊羔羊生长性能和血液蛋白指标的影响

2022-11-17姚逸安胡情情俞可心胡馨予王仕明

中国畜牧杂志 2022年11期

姚逸安，胡情情，俞可心，胡馨予，余荣，王仕明，管峰*

（1.中国计量大学生命科学学院，浙江杭州 310018；2.百欧康（中国）销售有限公司，浙江杭州 310000；3.浙江临安罗塘大湾里湖羊羊场，浙江临安 310018）

湖羊原产于我国太湖流域，具有适应南方湿热气候、繁殖力高等优点，种群平均产羔数达270%以上且为多胎FecB基因纯合体[1]。但在生产过程中，窝产羔数3 羔以上时容易出现母羊泌乳量不足和弱羔等问题，弱羔早期免疫力低下容易感染疾病，轻则影响生长发育，严重可能导致死亡，同时由于弱羔需要人工代乳或寄养，人力成本大大增加[2-3]。在疾病预防的传统方法中常使用抗生素，但其造成的药物残留、耐药性等问题已经给人类健康和公共卫生安全带来了隐患。随着我国饲料中全面禁止添加抗生素，研发可替代抗生素的饲料添加剂成为养羊业中保障羔羊健康生长亟待解决的问题。

微生态制剂（Microecological Preparation）是一类由益生菌等微生物经过加工制成的生物制品，一般被分为益生菌（Probiotics）、益生元（Prebiotics）和合生元（Synbiotic）三类[4-6]。由于微生态制剂可提高畜禽生长性能与机体免疫力，并具有无残留、无毒副作用、不产生耐药性等优点，被广泛运用于动物生产中[7]。微生态制剂可通过调节优化绵羊瘤胃和肠道菌群的平衡以提升机体免疫力，降低羔羊腹泻率和死亡率，促进营养物质吸收，从而提高生产性能[8]。但复合微生态制剂的最佳剂量以及对于产羔数不同的湖羊羔羊的应用效果尚无报道。本试验旨在研究不同剂量新型微生态制剂对不同窝产羔数湖羊羔羊的生长性能、血液蛋白指标的影响，探索复合微生态制剂的最佳剂量并为多胎羔羊的育肥提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料微生态制剂（商品名“犊益康”，每支60 mL，膏剂）由青岛正泰联合营养科技有限公司提供，其益生元主要包括牛初乳精华、中链甘油三酯、微量元素、维生素等，益生菌主要包括地衣芽孢杆菌（≥3.7×1010CFU/kg）、枯草芽孢杆菌（≥3.7×1010CFU/kg）、屎肠球菌（≥6.0×1010CFU/kg）。湖羊羔羊由浙江省临安市罗塘大湾里湖羊养殖场提供。

1.2 试验设计选取2020 年9 月出生的湖羊羔羊共110只，随机分为3 组。低、高剂量组每只羔羊出生后2 h内分别一次性灌服微生态制剂5、10 mL，对照组羔羊出生后不饲喂。在同期内出生的羔羊随机分组，1 窝羔羊在同一组，各组初生重无显著差异，组内（羔羊耳标丢失则不再计入分组分析）按照胎产羔数分为单羔群、双羔群、多羔群（≥3 羔），单羔在各组均少于5 只，未做群体分析，样本信息见表1。分组后进行打耳标、称重等相同操作。所有羔羊按照羊场常规过程饲养，试验期180 d。

1.3 饲养管理按照羊场一般饲养方式，羔羊断奶前和母羊同圈饲养，特别弱小羔羊由人工补喂牛初乳，每次约200 mL，一般3～10 次后直至正常采食。羔羊约30日龄后开始补饲羔羊颗粒料（主要成分为脱脂奶粉、牛奶、乳糖、乳清粉、食盐、矿物质、微量元素和维生素），体重约为20 kg 时断奶，断奶后公母分栏饲养。饲养期间所有羔羊自由采食。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 体重所有试验羔羊出生后记录羔羊初生重、胎产羔数，分别于15、30、60、180 日龄进行空腹称重；计算每只羔羊体重增重、平均日增重和相对生长率，相对生长率的计算参考陈新丹等[9]的计算方法。

1.4.2 血液蛋白指标分别于出生后2 h（初生）、2 日龄和10 日龄从对照组、低剂量组、高剂量组中随机各抽取5 只羔羊进行血液采集。羔羊晨饲前颈静脉采血约1.0 mL，收集于含肝素的真空采血管中，低温（0～4℃）保存带回实验室，3 500 r/min 离心10 min 分离血清，采用全自动生化分析仪（IDEXX Catalyst One，美国）测定血液中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和球蛋白（GLOB）含量，计算白蛋白/球蛋白（A/G）。

1.5 统计分析试验数据使用Excel 2019 进行整理，SPSS 20.0 进行差异显著性分析，对体重数据采用单因变量多因素方差分析，血液蛋白指标数据采用方差分析，LSD 法进行多重比较，P＜0.05 代表差异显著。群体样本≤5 时不进行统计对比分析，试验结果均以平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 复合微生态制剂对羔羊增重的影响单因变量多因素方差分析表明，试验处理与组内分群交互作用不显著，以剂量水平为主效应进行统计分析各分类的对照组、低剂量组和高剂量组之间的初生重、180 日龄重、总增重和平均日增重均差异不显著（表1）。由图1 可知，羔羊180 日龄重、总增重和平均日增重均与初生重正相关（P＜0.01）。由表1 可知，多羔群和与公羔群中高剂量组的羔羊初生重均低于对照组（P＞0.05），180 日龄重、总增重、平均日增重均高于对照组（P＞0.05）。微生态制剂对羔羊的总体增重性能影响不显著，口服10 mL微生态制剂在多羔群和公羔群中效果较好。

图1 180 日龄重（A）、总增重（B）、平均日增重（C）随初生重变化的散点图

表1 复合微生态制剂对羔羊增重的影响

2.3 微生态制剂对羔羊各阶段相对生长率的影响如表2 所示，双羔群中对照组在0～15 日龄的相对生长率高于低剂量组（P＜0.05），低剂量组在15～30 日龄的相对生长率高于高剂量组（P＜0.05），其余各分类群中各组羔羊相对生长率在0～15 和15～30 日龄差异均不显著。各分类群中低、高剂量组在30～60 日龄的相对生长率高于对照组（P＞0.05）。60～180 日龄，总样本中高剂量组的相对生长率高于对照组（P＜0.05），双羔群中高剂量组的相对生长率高于对照组和低剂量组（P＜0.05），其余各分类群中试验组的羔羊相对生长率均高于对照组（P＞0.05）。微生态制剂可能在羔羊断奶后对其生长性能有促进作用，但效果不显著。

表2 微生态制剂对羔羊各阶段相对生长率的影响 %

2.4 微生态制剂对羔羊血液蛋白指标的影响由表3 可知，羔羊初生时，各组羔羊血液TP、ALB、GLOB 以及A/G 的指标均无显著差异，A/G 均接近1.0。高剂量组2、10 日龄时血液TP、GLOB 含量均高于对照组（P＜0.05），且2 日龄时高于低剂量组（P＜0.05）；A/G 均低于对照组（P＜0.05）；低剂量组各时期血液中TP、GLOB 含量均高于对照组（P＞0.05），A/G 均低于对照组（P＞0.05）。血液中ALB 含量在各组间以及不同时间差异均不显著。

由表3 可知，高剂量组2 日龄羔羊血液中TP、GLOB 含量较初生时分别提高了58.47% 和93.97%（P＜0.05），10日龄时TP、GLOB含量低于2日龄（P＜0.05），但仍高于初生时（P＜0.05）；高剂量组2、10 日龄时ALB 含量均高于初生时（P＜0.05）。低剂量组2、10 日龄时TP、GLOB 含量均高于初生时（P＜0.05），且2 日龄含量最高；10 日龄ALB 含量高于出初生时（P＜0.05）。对照组10 日龄时TP、ALB 含量高于初生时（P＜0.05），其余指标随时间变化差异不显著。

表3 微生态制剂对羔羊血液蛋白指标的影响

3 讨论

3.1 微生态制剂对绵羊生长发育的影响羔羊出生至断奶前的胃部结构、主要菌群和消化物会发生很大变化[10]。微生态制剂中的益生菌及其代谢产物进入消化道后，通过补充优势菌群、拮抗病原微生物、促进分泌消化酶等多种方式改善肠胃环境，提高羔羊对营养物质的消化吸收能力，进而提高生长发育性能[11-13]。郭云霞等[14]研究表明，羊源微生态制剂可以提早绵羊羔羊的断奶日龄并显著提高羔羊平均日增重，降低羔羊腹泻发病率和死亡率。Soren 等[15]研究则发现，添加酵母和乳酸杆菌对羔羊的体重和平均日增重没有影响。可见，微生态制剂的作用效果可能受到其使用剂量和菌种搭配的影响。与传统的液体和固态粉末微生态制剂相比，本试验使用的新型微生态制剂为乳膏剂，具有储存期长、使用简易精确等优点[16]。本研究结果表明，在羔羊出生2 h 内以灌服5、10 mL 复合微生态制剂有利于改善羔羊胃内菌群结构和数量，提高消化能力，促进生长发育，但不能显著提高湖羊羔羊的生长性能；试验组全部群体在30～60、60～180 日龄相对生长率均高于对照组。一方面，微生态制剂的使用效果可能受到使用时间的影响。本研究中所采用的芽孢杆菌、乳酸菌主要以分解复杂化合物、产生维生素、促进肠道绒毛生长等机制，促进动物对营养物质的吸收以提升生产性能[17-18]，而羔羊哺乳期消化物以简单碳水化合物为主，同时母乳中所含的IgA 可能导致部分益生菌难以在肠道定植或发挥效用[10,19]。随着羔羊断奶以及日粮的改变，出生时灌服的微生态制剂的促生长效果逐渐减弱，总体生长情况无差异，但在后期试验组相对生长率较高，说明微生态制剂可能对断奶后的生长强度具有促进效果。另一方面，微生态制剂中含有的维生素和微量元素等物质对羔羊健康生长具有重要意义，但本试验饲喂周期短，难以对生长性能产生持续性影响，同时微生态制剂中各种成分的相互拮抗也可能引起使用效果的差异。从羔羊的总体生长状况来看，10 mL 复合微生态制剂组多羔群和公羔群的生长效果最佳，这可能与多羔群在羔羊出生时数量多，相对于单羔和双羔羔羊体重轻、体质弱等因素有关。也有研究表明，微生态制剂的使用效果存在性别差异[20]。复合微生态制剂对胎产羔数不同的湖羊羔羊的作用效果以及最佳饲喂剂量仍需要进一步研究。

3.2 微生态制剂对羔羊血液蛋白指标的影响动物血液中各类蛋白质含量的变化是衡量机体代谢状况和免疫能力的重要指标。血清TP 主要由ALB 和GLOB 组成，其含量可直接反映动物的生长发育和健康状况。ALB作为营养物质的载体其含量高低可直接反映动物的营养摄入情况，GLOB 主要由免疫器官分泌的抗体组成，在体液免疫过程中发挥重要作用[21]。微生态制剂可通过多种作用方式提高动物血液中各类蛋白质的含量，进一步影响机体免疫能力。研究表明，补饲微生态制剂可以有效提高羔羊血液中IgA 和IgG 浓度，还能提高IL-6含量以及细胞因子的水平[22-23]，显著降低羔羊腹泻率并提高存活率[24]。Devyatkin 等[25]研究表明，饲料中添加益生菌制剂可以显著提高羔羊血液中TP、ALB、GLOB 含量，降低血液胆红素和胆固醇水平，提高杀菌和吞噬指数。Yang 等[26]研究表明，绵羊口服重组枯草芽孢杆菌有助于促进绵羊外周血单核细胞增殖，显著提高血液中IgG 和IgA 含量，有效降低绵羊受寄生虫感染的机率。

哺乳动物免疫系统的发育存在于生命的各个阶段，肠道菌群对于早期免疫系统的影响尤为重要，尤其是在出生前和出生后的短时间内[27]。本试验结果显示，灌服5、10 mL 复合微生态制剂均可以不同程度地促进羔羊血液中GLOB、TP 含量，降低A/G，ALB 含量变化则不受微生态制剂影响，10 mL 灌服效果持续至10 日龄仍与对照组差异显著，说明微生态制剂有效提高了羔羊生长初期的体液免疫水平。何韵秋等[12]研究也表明，颗粒化混合日粮中添加复合益生菌制剂可显著提高湖羊血清TP 和GLOB 浓度，降低A/G，与本研究中微生态制剂对湖羊血液蛋白指标影响的结果一致；而各个时期试验组羔羊血液中作为营养物质载体的ALB 含量较对照组无显著差异，也与本试验中各组羔羊生长性能差异不显著的结果一致。益生菌通过刺激羔羊肠道，加强羔羊对初乳和微生态制剂中所含蛋白质的吸收能力，从而增加血液中ALB、GLOB 含量；同时微生态制剂中所含的益生菌、益生元可作为抗原或免疫系统激活剂等成分参与宿主的免疫反应，刺激肠道黏膜系统的发育和成熟，进一步提高羔羊免疫力[28-29]。总体来说，口服10 mL 复合微生态制剂可显著提升羔羊血液中GLOB含量，对羔羊早期免疫力的构建具有重要意义。