PGT-M辅助助孕妊娠结局的影响因素

赵 琴，蔡桂丰

（广东珠海市妇幼保健院生殖中心，广东 珠海 519000）

胚胎植入前单基因遗传学检测（preimplantation genetic testing for monogenic disorders，PGT-M）即胚胎植入前单基因遗传学检测技术，对单基因遗传病患儿家庭的胚胎进行活检和遗传检测，选择无遗传学异常的胚胎植入子宫从而获得健康的子代。PGT-M检测包括仔细检查一个人携带的突变和围绕它的染色体区域（每个染色体的彩色部分）。每个PGT-M测试设计都是独特的，并且是针对该家族的特定设计，因此将需要两个合作伙伴（通常是其他家族成员）的DNA样品来设计测试。然后，使用连锁分析来确定突变的“遗传指纹”，并诊断每个受试胚胎为受影响或不受影响。PGT在胚胎着床前即可诊断出胚胎遗传病情况，避免了传统产前诊断的有创性操作带来的并发症，消除了因终止异常胎儿给妊娠妇女带来一系列的身心损伤，从源头上控制了遗传病的发生[1]。目前，随着国家二孩政策的开放，我国不孕不育的患病率逐年增加，特别是高龄产妇（≥35岁）比例不断增加，而高龄是生育出生缺陷儿已知的高风险因素。因此，选择健康的胚胎移植显得十分必要。本研究通过对PGT-M辅助助孕妊娠结局的相关影响因素进行分析，以期为提升PGT-M助孕妊娠有效率提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2020年1月10日-2021年11月28日广东珠海市妇幼保健院生殖中心生殖科接受试管婴儿治疗的不孕不育患者33例作为研究对象，年龄25～40岁，平均年龄（33.90±4.96）岁。本研究经医院伦理委员会审批通过，患者知情同意并签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：①夫妻一方携带显性致病基因、夫妻双方都携带隐性基因，或者有特定遗传疾病家族史；②女方年龄25～40岁；③女方无子宫及卵巢病变；④符合2018年《胚胎植入前遗传学诊断／筛查技术专家共识》中PGT-M可应用于单基因遗传病和染色体异常的适应证[1]。排除标准：①卵巢储备功能下降；②子宫内膜异位症；③多囊卵巢综合征；④双侧输卵管积水；⑤不孕不育患者患有其他内分泌功能性障碍症状或生殖器存在肿瘤的状况；⑥伴随存在干扰试管婴儿辅助助孕技术的其他病症。

1.3 方法 收集患者临床相关资料，包括基础资料：不孕不育患者年龄、病因（α地中海贫血、β地中海贫血、多囊肾、耳聋1A型、甲基丙二酸尿症、神经性耳聋、显性耳聋22型）、胚囊评分（分数越高代表胚胎的形态越美观，分数由高到低依次是AA、AB、BB、BC、CB，通常C以上的囊胚可以利用，D级的囊胚可能需要放弃）、染色体检验结果[不携带父源和母源突变、不携带父源突变、不携带父源突变（缺失母源16号染色体）、不携带父源突变、检测异常、携带--SEA缺失杂合突变、携带父源1和母源突变、携带父源1突变、携带父源2和母源突变、携带父源2突变、携带父源和母源1突变、携带父源和母源2突变、携带父源和母源突变、携带父源突变、携带父源突变*（缺失母源16号染色体）、携带母源1突变、携带母源2突变*、携带母源突变。根据是否妊娠成功分为未成功妊娠组和成功妊娠组。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.00软件对数据进行统计和分析，计量资料采用（±s）进行表示，采用t检验；计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PGT-M辅助助孕妊娠结局的单因素分析 33例PGT-M助孕患者，其中有8例不孕不育患者成功妊娠，妊娠率为24.24%（8/33）。未成功妊娠组和成功妊娠组病因、染色体比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组年龄、胚囊评分比较，差异无统计学意义（P＞0.05），且β地中海贫血、多囊肾、甲基丙二酸尿症、神经性耳聋、显性耳聋22型患者均未成功妊娠，见表1。

表1 PGT-M辅助助孕妊娠结局的单因素分析[n（%）]

2.2 PGT-M辅助助孕妊娠结局的多因素分析 多因素Logistic回归分析显示，不孕不育患者染色体情况与病因是PGT-M辅助助孕妊娠结局的影响因素（P＜0.05），见表2。

表2 PGT-M辅助助孕妊娠结局的多因素分析

3 讨论

妊娠过程对于孕妇而言是一个非常复杂且特殊的过程，随着辅助生殖技术的不断发展，如何更好地使辅助生殖技术获得更佳的临床效果，逐渐成为广大生殖类临床学者和医生的重点关注方向。就当下的相关文献报道而言[2-5]，之所以会有大比例的妊娠失败概率，主要是由于夫妻双方在遗传性因子层面存在着一定的缺陷或存在着生理层面特征的缺陷，尤其是关于染色体和引发不孕不育病症的诱因非常重要。不断对试管婴儿辅助妊娠结局的影响因素进行更加深入的研究，对于促进人工体外受精加胚胎移植技术的发展有着非常重要的意义，在很大程度上能够提升不孕不育患者的临床妊娠率。

相关研究表明[6]，患者子宫内膜厚度与患者是否能够妊娠成功存在非常重要的关系，患者良好的社会心理因素也与试管婴儿辅助住院技术下的妊娠成功率密切相关。患者情绪波动大会影响到孕妇妊娠结局，因此对孕妇进行友好的心理预防和干预，对其妊娠结局有着非常重要的影响作用[7]。PGD技术是在辅助生殖和分子生物学快速发展的基础上，相互融合形成的一门新兴诊断技术，至今已有20多年的历史。该技术利用全基因组扩增、杂交或其他方法对体外受精形成的胚胎进行遗传学检查，了解其染色体倍性、插入缺失情况甚至位点突变情况，选择染色体正常胚胎植入宫腔，避免了由于染色体异常导致的反复流产或反复种植失败，从而达到提高着床率、降低流产率和出生缺陷的目的[8-11]。本研究中33例PGT-M助孕患者，其中有8例不孕不育患者成功妊娠，妊娠率为24.24%（8/33）；未成功妊娠组和成功妊娠组病因、染色体比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组年龄、胚囊评分比较，差异无统计学意义（P＞0.05），且β地中海贫血、多囊肾、甲基丙二酸尿症、神经性耳聋、显性耳聋22型患者均未成功妊娠；多因素Logistic回归分析显示，不孕不育患者染色体情况与病因是PGT-M辅助助孕妊娠结局的影响因素（P＜0.05），提示诱发患者出现不孕不育的病因以及夫妻双方染色体的缺陷和病因对于不孕不育患者采用试管婴儿辅助助孕技术完成妊娠有着非常重要的作用，因夫妻双方如果存在染色体缺陷和以上几种病因，可能使发育过程中出现胚胎停育和死胎，因此无法进行普通的试管婴儿[12-14]。

综上所述，不孕不育患者染色体情况与患者病因与PGT-M辅助助孕妊娠结局密切相关，但如果好的胚胎数量增多，能够在很大程度上提高试管婴儿辅助助孕技术的临床妊娠率。