2019—2021 年铜仁市手足口病原构成及柯萨奇病毒A6 临床特征调查研究

杨爱梅，刘莉

贵州省铜仁市人民医院儿科，贵州铜仁 554300

手足口病是一种由肠道病毒引起的儿童常见传染病，发病率高，重症患者病死率高。手足口病的主要传播途径是粪-口途径，亦可通过呼吸道、接触等方式传播，传染性强，易导致流行或暴发，高发于5 岁以下儿童，以发热和手、足、口腔、肛周疱疹为主要特征[1-2]。病毒还可以侵犯呼吸系统、中枢神经系统、心血管系统等引起肺水肿、肺出血、脑炎、迟缓性麻痹、心肌炎等，进展较快，甚至发生死亡[3-4]。手足口病分布极为广泛，多个地区均有病例，在热带和亚热带地区四季均可发病，温带地区以夏秋两季更为多见[5-6]。据相关报告，我国北方每年7月手足口发病率最高，而南方地区，每年的5 月和9—10月发病率将达到峰值[7-8]。该病主要包括柯萨奇病毒A6型、A10 型、A16 型以及EV71 等，2012 年柯萨奇A6 高发感染趋势在江浙沪等地出现,而近年来发现肠道病毒中柯萨奇病毒A6 型成为手足口病主要流行病原[9]。故此现以贵州省铜仁市人民医院儿科2019 年1 月—2021年11 月收集到的手足口病病例4 330 例为临床标本，分析病原体详细构成和柯萨奇病毒A6 临床特征，为铜仁市手足口病防控预警提供详实数据支撑，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

在本院就诊的患儿中共检出手足口病病毒阳性标本4 330 例（均为咽拭子标本），将采集完成的标本放入病毒采样管，存放温度为4℃，48 h 以内送往检测室完成病原体检测。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：所有患儿均为首次发病且入院前未接受过任何相关治疗；临床资料完整，并已通知家属本次取样研究。排除标准：合并急疹、水痘、带状疱疹以及严重性细菌感染患儿；先天性心脏病、脏器功能不全、其他传染性疾病携带患儿。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 采集患儿发病3 d 内的咽试子样本，采用专用采样棉签，单独分装，检测人员手部消毒，手持采样棉签尾部适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部，采样完毕后迅速将棉签放入装有3～5 mL 保存液（生理盐水或病毒营养液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥。所有检测完成后，统一送往检测室。

1.3.2 实验原理 试剂盒利用一步法实时荧光PCR 技术，分别以肠道病毒通用型、71 型、柯萨奇病毒A6 型、柯萨奇病毒xA16 型、柯萨奇病毒A10 型、肠道病毒基因编码区的高度保守区为靶区域，设计特异性引物及荧光探针，进行一步法RT-PCR 多重扩增，用于样本中肠道病毒RNA 以及肠道病毒71 型、柯萨奇病毒A6 型、柯萨奇病毒A16 型、柯萨奇病毒A10 型RNA 的同步定性检测。另外，本试剂盒带有内标物质，用于对核酸提取过程及PCR 扩增过程的监控，可减少假阴性结果的出现。

1.3.3 仪器与试剂 仪器为AFD4800 实时荧光定量PCR 仪、全自动医用PCR 分析仪SLAN-969、台式高速离心机、混匀器、冰箱（4℃、-20℃）、生物安全柜、紫外灯，试剂为手足口病毒肠道病毒VE71/A16/EV/A10/A6核酸检测试剂盒。

1.3.4 资料收集方法 通过电子病历系统，收集患儿人口统计学信息（包括年龄、性别、发病时间、住院时间）、临床症状（发热、皮疹、各系统受累情况）以及检测阳性病例数及各组病原数、柯萨奇病毒A6 人口学资料和临床资料（包括临床症状表现、生化指标）。

1.4 观察指标

详细记录全部手足口病病毒阳性标本检测出的不同病原体类型、数量、总占比以及柯萨奇病毒A6 临床特征的表现和症状占比。

1.5 统计方法

采用SPSS 26.0 统计学软件对数据进行处理，计数资料以[n（%）]表示。

2 结果

2.1 2019—2021 年铜仁市手足口病原体时间分布

2019—2021 年手足口病柯萨奇A6 病原体检出率最高，肠道病毒71 型（EV71）病原体检出率最低，见表1。

表1 2019—2021 年铜仁市手足口病原体构成[n(%)]

2.2 柯萨奇病毒A6 临床特征比较

2019—2021 年以柯萨奇病毒A6 为病原体的手足口病患者，发热症状人数占比最多，白细胞升高和CRP（C 反应蛋白）升高症状人数占比相对较少，见表2。

表2 2019—2021 年柯萨奇病毒A6 临床特征[n(%)]

3 讨论

手足口病由肠道病毒引起，是一种以手部、足部、口腔出疹为主要特征的急性传染病，在世界范围内均有流行特征，我国将手足口病法定为丙类传染病，主要传染途径为密切接触和粪口传播，可导致重大公共卫生问题。该病主要临床表现为发热和手部、足部以及口腔黏膜、肛周等出现水性疱疹，存在重症病例和病死率，严重危害儿童生命安全[10-11]。2008 年后，在法国和芬兰小规模爆发的手足口疾病中主要以柯萨奇A10 和柯萨奇A6为主要病原体，其中柯萨奇A6 病原体感染的患儿发病临床描述被确定为非典型[12-13]。根据我国2008 年后相关调查发现，自我国流行的手足口病原体感染主要是肠道病毒71 型（EV71）和柯萨奇A16[14-15]。但是近年来全国各地的病原学均发生了变化，柯萨奇A6 的检出率明显高于既往检测病原体，且多次发生区域性流行暴发[16-17]。而后在我国受柯萨奇A6 感染患儿的临床症状较于普通型手足口病更加严重，部分病例持续高热，疱疹可蔓延至患儿周身，皮疹分布及形态与经典型有区别，皮损较重，且成年人中也存在一定病例[18-19]。

本研究结果发现，2019—2021 年手足口病柯萨奇病原体分别为柯萨奇A16、柯萨奇A10、肠道病毒71 型（EV71）、肠道病毒通用型(EV)以及柯萨奇A6，其中柯萨奇A6 病原体检出率最高，与当下全国多地手足口病病原构成一致，说明铜仁市手足口病发病率仍高，且诱发该病的病原学均发生了显著变化。2019—2021 年以柯萨奇病毒A6 为病原体的手足口病患者，均出现发热、多形态皮疹、白细胞升高以及CRP 升高等症状，其中发热症状占比最高，白细胞升高和CRP 升高症状人数占比相对较少。后期随访中部分患儿在患病后4 周左右出现脱皮、指甲脱落等症状。与任小梅[20]的研究中不同年龄段3 组婴幼儿临床症状发热率最高，分别为86.38%、81.03%、76.92%的研究结果相一致。本院作为铜仁市仅有的一家开展手足口病病原学检测的专业机构，标本收集量足够全面，可代表铜仁市手足口病原分布情况。而针对本市手足口病病原体构成类型进行全面分析，可清晰了解当下该病具体情况，尽快确定当下感染的发生和性质，及早进行诊疗、选择适当的治疗方案以及采取有效的预防措施，防止感染和传播可能造成的广泛性危害。本研究并总结主要病原体柯萨奇A6 的临床特征，根据其实际情况，对全市儿科医疗机构开展培训，提高儿科医师对该病的诊治水平，做到早发现、早隔离、早治疗，达到控制疾病流行的目的，避免发生大规模传染病流行，以此全面提升本市对手足口病的诊断及救治能力，减轻家庭及社会负担，避免儿童受到疾病侵扰。

综上所述，本市检测结果发现目前除未分型的病例外，柯萨奇A6 为主要病原体，其临床症状以发热和多形态皮疹为主，导致白细胞和C 反应蛋白超过正常值范围，以及4 周左右可能出现脱皮、指甲脱落等症状，为手足口病的治疗及预防和控制工作起到一定的指导作用。