长顺绿壳蛋鸡快慢羽品系的建立与自别雌雄配套系的研究

丁金龙，刘敬寿

（长顺天农绿壳蛋鸡实业有限公司，贵州 长顺 550700）

长顺绿壳蛋鸡产区位于黔南州长顺县而得名，境内喀斯特地貌特征，地势复杂，山高坡陡，交通闭塞，闭锁繁育，形成独特的地方品种长顺绿壳蛋鸡。长顺绿壳蛋鸡体型紧凑，结构匀称，羽毛紧密，背部平直，皮肤为白色。喙平直，灰或黑色；虹彩橘黄色，耳叶红色或黑色；胫、爪黑色。公鸡单冠直立，5～7齿，髯大，呈鲜红色；颈羽、鞍羽赤红，背羽、腹羽红黑相间，主翼羽、尾羽墨绿而有光泽。母鸡羽色以麻黄色居多，有少量黑麻羽和白羽。雏鸡绒毛以黄麻色居多，少数为黑色、淡黄色，背上有条状黑色绒毛带，喙、胫、趾多为黑色[1]。

随着近年来经济水平提高，人们对生活品质追求越来越高，对食材的选择偏向健康和营养。长顺绿壳鸡蛋呈椭圆形，蛋壳墨绿色，厚而致密。长顺绿壳鸡蛋中硒、碘、锌等人体所需的矿物质含量较高，还富含大量对人有益的脑磷脂、卵磷脂、神经磷脂及多种微量元素和维生素[2]。长顺绿壳鸡蛋于2014年9月通过原国家质检总局批准对“长顺绿壳鸡蛋”实施地理标志产品保护。长顺绿壳鸡蛋具有很大的市场和推广价值。为了进一步节约绿壳蛋鸡的生产成本，提高经济效益，针对长顺绿壳蛋鸡建立快、慢羽（以下简称快慢羽）品系，使出壳雏鸡根据羽型鉴别雌雄，提高鉴别效率和准确率，减少鉴别感染风险，提高雏鸡成活，实现商品鸡分类饲养。

快慢羽基因是由性染色体上的一对同位点基因（K，k）控制，慢羽对快羽为显性。鸟类性染色体的基因型为雄性（ZZ）雌性（ZW）。快慢羽公母共有5种基因型，即快羽型公鸡（kk）、快羽型母鸡（k-）、慢羽型母鸡（K-）、慢羽型公鸡（Kk）或（KK）[3]。根据羽速表现型区分快羽型公母鸡和慢羽型母鸡为纯合子，慢羽型公鸡有两种基因型，可能存在杂合慢羽基因型，需要进行测交或基因检测选留纯合慢羽基因型，淘汰杂合慢羽型。雏鸡通过快慢羽鉴别雌雄简单便易、快速准确、节约成本，可利用快慢羽基因的性连锁这一特性，纯化品系，建立快慢羽雌雄自别的配套系。

1 材料与方法

1.1 材料

采用饲养于长顺天农绿壳蛋鸡实业有限公司原种场长顺绿壳蛋鸡纯种公鸡100只，母鸡1 500只为素材。

1.2 方法

1.2.1 种蛋收集 将长顺绿壳蛋鸡纯种100只公鸡人工采精于集精杯中，用输精枪混精后人工输精到1 500只母鸡，连续输精3遍后，12 d为1个周期，收集2个周期，第一次收集种蛋9 760枚，第二次收集9 680枚，合计19 440枚。

1.2.2 种蛋入孵 将每天收集的长顺绿壳蛋鸡种蛋在长顺天农公司原种场孵化车间熏蒸消毒20 min，熏蒸试剂采用28 ml/m³甲醛。每批次集蛋结束后用青岛41研究所生产的19 200型全自动孵化机进行孵化出雏。

1.2.3 出壳雏鸡观测羽型分布 参照包世增[4]，宋素芳、康相涛、孙桂荣等[5]划分羽型的方法，将快羽羽型分为2类，慢羽羽型划分为4类。快羽型：主翼羽长于覆主翼羽且绝对差值大于等于5 mm的为R1型，小于5 mm而大于2 mm的为R2型；慢羽型：等长型（主翼羽与覆主翼羽等长）；倒长型（主翼羽短于覆主翼羽）；未长出型（主翼羽未长出或主、覆翼羽均未长出）；微长型（主翼羽长于覆主翼羽在2 mm以内）。将出壳的雏鸡依据上述羽型划分方法进行快慢羽分类鉴别，统计出长顺绿壳蛋鸡纯系的快慢羽羽型分布。

1.2.4 翻肛鉴别 24 h内将分好类的长顺绿壳蛋鸡快慢羽鸡群进行翻肛雌雄鉴别，选留快羽型和慢羽的等长型、倒长型、未长出型且符合长顺绿壳蛋鸡外貌特征的健康雏鸡。

1.2.5 切脚标记 快羽R1型切左外脚趾；快羽R2型切左中脚趾；慢羽等长型切右外脚趾；慢羽型倒长型和未长出型切右中脚趾。

1.2.6 饲养方法 饲养地点在长顺天农绿壳蛋鸡实业有限公司原种场，进苗前将育雏舍升温至35 ℃[6]。育雏舍饲养阶段0～7周，全自动控温，1～2周33～35 ℃，2周之后每周下降2 ℃，直至降至室温[7]。8～18周龄在育成舍饲养，19周龄后在单体产蛋笼饲养，全程的饲养管理和免疫保健均按照长顺绿壳蛋鸡饲养管理手册进行。并分别在8、12、18周龄对长顺绿壳蛋鸡快羽群和慢羽群进行外观和生长性能选择，淘汰不符合育种要求的个体。在13、17周龄和30周龄对快慢羽群进行白痢检测，淘汰阳性个体。在28周龄对快慢羽群进行白血病检测，淘汰阳性个体。31周龄对留种公鸡进行精液品质测定，选留发育良好、外观符合品种特征且精液品质好的健康种鸡备用。

1.2.7 基因型检测 根据快慢羽伴性遗传规律，快羽为隐性，其表现型和基因型一致，不必再进行基因检测，可确定快羽鸡为纯合基因型[8]。在慢羽鸡中，由于母鸡性染色体为异型染色体，在Z染色体上只有1个K基因，虽属于显性遗传，但表现型仍与基因型一致，也不需要进行基因检测[9]。但慢羽型母鸡中等长型羽型存在鉴别误差，需要对慢羽型母鸡中等长型羽型群体（切右外趾）和慢羽公鸡群体进行基因检测。慢羽公鸡和慢羽等长型母鸡进行基因检测。

1.2.8 纯繁验证及纯系扩群 34周龄将选出的快羽公鸡群和母鸡群混精自交扩群；将基因检测出的纯合慢羽群混精自交扩群。分别收取2批种蛋，每批3 000枚合格种蛋，熏蒸消毒后在原种场孵化车间进行孵化，分别统计后代雏鸡快慢羽群体准确率。用快羽公鸡群杂交慢羽母鸡群，收2批种蛋，每批500枚各个种蛋，熏蒸消毒后在原种场孵化车间进行孵化，统计杂交后代雏鸡快慢羽自别雌雄准确率。

1.2.9 纯系扩群建立纯系 根据上述出苗测定结果，若快慢羽纯系的快慢羽比例达到99 % 以上，配套系自别准确率达98 % 以上，即可组建长顺绿壳蛋鸡快慢羽纯系。

2 结果与分析

2.1 育种素材孵化结果

长顺绿壳蛋鸡素材群种蛋孵化出苗统计结果见表1。2个批次平均受精率91.8 %，出苗率85.5 %，健雏率95.55 %。经快慢羽观测雏鸡统计结果见表2，快羽比例为77.3 %，慢羽比例为22.7 %，由此可见长顺绿壳蛋鸡原始群主要以快羽为主。

表1 长顺绿壳蛋鸡素材群孵化出苗结果

表2 雏鸡快慢羽羽型分布

2.2 慢羽公鸡和慢羽等长型母鸡基因检测结果

经过对长顺绿壳蛋鸡外观表型、生长性能、疫病净化选择后，共选留下慢羽公鸡278羽，慢羽等长型母鸡594羽，采血进行基因检测结果见表3，慢羽公鸡杂合子有116羽，纯合子162羽，纯合子比例58.3 %，慢羽等长型母鸡杂合子31羽，纯合子比例94.8 %。

表3 慢羽公鸡和慢羽等长型母鸡基因检测结果

2.3 自繁扩群建立快慢羽纯系及验证

将通过品种选择留下的快羽群和基因检测留下的慢羽群分别自繁扩群，分别建立快羽纯系和慢羽纯系。根据孵化出雏快慢羽观测验证结果见表4。由表4可以看出：快羽系中快羽占比99.86 %，慢羽系中，慢羽占比99.96 %，符合建立纯系要求。长顺绿壳蛋鸡快慢羽自别雌雄配套系后代快慢羽自别雌雄准确率均在99 % 以上，符合大生产使用要求。

表4 快羽系、慢羽系自繁扩群出雏羽型分布

表5 长顺绿壳蛋鸡快慢羽自别雌雄配套系验证结果

3 讨论

从长顺绿壳蛋鸡孵化结果分析，其受精率、出苗率、健雏率均在正常范围，孵化2批种蛋共计19 418枚，受精率、出苗率、健雏率结果相差不大，收集慢羽鸡占比数据具有代表性。

长顺绿壳蛋鸡以快羽为主，慢羽鸡占比22.7 %，没有找到长顺绿壳蛋鸡慢羽占比相关报道，与其他地方品种慢羽鸡占比没有比价价值。

本配套系在对慢羽公鸡杂合子测定中，选择用慢羽基因检测的方式，而非其他学者宋素芳[5]、谢金防[10]、欧阳建华[11]等采用的测交测定的方式，测定效率和准确率更高，成本更低。

利用慢羽伴性遗传基因选育快慢羽自别雌雄配套系，其准确率一般在98 % 以上，如宋素芳报道：公雏99.23 %，母雏99.58 %[5]，谢金防报道：98 %[10]，欧阳建华报道：公雏100 %，母雏95.79 %[11]等。本配套系准确率达到99.76 %，略高于98 %，可作为一项可靠的技术在生产中推广。

在蛋鸡和其他地方鸡品种的生产中，早已利用快慢羽自别雌雄技术，长顺绿壳蛋鸡作为我国优质地方品种还在使用翻肛鉴别的传统技术，本研究为长顺绿壳蛋鸡提供一种快慢羽鉴别雌雄技术，提高鉴别效率和准确率，降低生产成本，减少鉴别感染风险。

4 结论

从出雏羽型观察得出长顺绿壳蛋鸡主要以快羽型为主，占77.3 %，慢羽型占比22.7 %。慢羽型公鸡和慢羽等长型母鸡基因检测纯合子占比分布为58.3 % 和94.8 %。

组建快慢羽纯系扩繁后代出雏快羽系中快羽占比99.86 %，慢羽系中慢羽占比99.96 %。通过基因检测能够快速准确的确定慢羽纯合子公鸡和慢羽母鸡，与传统测交基因试验相比减少工作量和提高准确率。快慢羽自别雌雄配套系后代准确率达到99.76 %，虽未达到完全纯合，但较一般翻肛鉴别准确率在95 % 以上要求，该研究比其鉴别准确率提高4 % 以上，较宋素芳报道：公雏99.23 %，母雏99.58 %[5]，谢金防报道：98 %[10]，欧阳建华报道：公雏100 %，母雏95.79 %[11]等配套系水平略高，可以应用于生产推广。