一例猪弓形虫病诊断

华学峰

（安徽省芜湖市繁昌区繁阳镇农业综合服务中心畜牧兽医站，安徽 芜湖 241200）

0 引言

猪弓形虫病大多数情况下呈隐性感染，没有特别明显的临床症状，还特别容易和其他疾病混合感染，最后造成误诊。因此建立快速、准确的诊断方法尤其重要。过去100年来，人们诊断弓形虫病主要依靠直接镜检等病原学检查方法，但是这些方法不仅耗时耗力，准确性还不高。而这些年分子诊断技术的不断发展和完善成熟，目前，弓形虫病分子诊断方法主要包括DNA探针技术、PCR技术、单克隆抗体技术及基因芯片技术。本病在我国主要是隐形感染，临床症状不明显而且易与猪瘟、猪肺疫等疫病混淆，所以临床诊断比较困难，特别容易误诊为猪瘟，从而误治。因此，建立高效、快速诊断弓形虫病对预防和治疗该病具有重要意义[1]。

2019年6月到8月在安徽省繁昌县某猪场接诊一起病例，仔猪精神不振，食欲减退，怀疑为猪弓形虫病或者猪瘟、猪肺疫等病。基于以上情况，本文即以一例猪弓形虫的诊断，以期为临床正确诊断本病提供一些帮助。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例来源

安徽繁昌某猪场发病病猪，收集发病仔猪的腹水和肝脏、肺脏、淋巴结内脏器官。

1.1.2 试剂

姬姆萨染料：购自苏州亚科科技有限公司。甲醇、二甲苯、95%乙醇等均为国产分析纯级产品。

1.2 方法

1.2.1 流行病学调查

在笔者联系该猪场3个月内，通过现场观察，调查档案，了解到了猪场的饲养规模，发病及死亡情况等。

1.2.2 临床症状观察

对发病仔猪的表面皮肤、毛发、尿液还有精神与食欲状况进行观察。

1.2.3 剖检检查

在猪场对其中的1例发病仔猪进行剖检，观察其内部肝肺等脏器病变情况。

1.2.4 病原学检查

（1）细菌分离取发病仔猪的肝、肺、淋巴结等脏器，在无菌环境下保存，对剖检的器官进行细菌分离，用手术剪剪一小块，在平板上轻微的蘸一下，接着用四区划线法培养分离细菌。24 h后，用接种环挑取单个菌落接种至液体培养基，培养24 h备用。如分离到细菌，通过革兰氏染色方法鉴定。

（2）吉姆萨染色在无菌环境下，取发病仔猪的肝、肺、淋巴结制成触片；取1滴发病仔猪的腹水，滴到载玻片上的左端，接着用盖玻片推片，然后风干制成涂片。再在玻片上滴2～3滴甲醇固定，最后用吉姆萨液染色1 h，清洗后干燥镜检[2]。

2 结果与分析

2.1 流行病学调查

该猪场是育肥猪场，饲养的都是长白猪，一共饲养母猪50头。该猪场的产房刚刚转入保育栏的一批小猪开始发病，共有152头，1周内共有19头仔猪精神抑郁，食欲减退，耳鼻及四肢末端呈蓝紫色。工作人员曾采用抗生素类治疗无明显效果，死亡5头。

2.2 临床症状观察

发病初期仔猪存在发热、腹泻、无甚食欲、精神萎靡，呼吸困难、尿液发黄、形神俱枯等症状。后期身体多处出现紫红色的瘢痕或者小红点，同时，可见该病猪发生癫痫状痉挛，后躯麻痹，运动障碍等神经症状，见图1。

图1 临床症状

2.3 剖检检查

小猪肌肉发白无血色，胸腹腔内有渗出物，腹腔内有透明积液，肝脏边缘有淤血斑，颜色深浅不一，不均匀。肺脏有明显的“实变”现象，肺部表面出血严重。淋巴结严重水肿，出血严重，呈紫红色甚至黑紫色；脾脏边缘较整齐，但有明显的出血点和淤血斑，见图2。

图2 病理变化

2.4 病原学检查

采用血平板分离细菌时未见到细菌。

吉姆萨染色镜检结果显示可看到细胞质内外明显的一头稍减一头钝圆的弓形虫滋养体，还看到明显的假包囊，直径大小为10～15μm，内含弓形虫滋养体，白细胞核被挤向一边，见图3和图4。

图3 吉姆萨方法检测弓形虫滋养体

图4 吉姆萨方法检测假包囊

7月以后猪场开始发病，诊断初期怀疑方向不明确，无法确定是什么病因，并且用一些抗生素的治疗效果不大。在7月底挑取一头病猪准备剖检观察。剖检结果怀疑为猪弓形虫病，8月初带回病料（肝、肺、淋巴结、腹水）进行检测，最终通过病原学与PCR检测确诊为猪弓形虫病。证明该猪场感染猪弓形虫病。经检测显示该猪场只有部分小猪感染此病，究其原因，主要和猪场的周围环境和饲养管理密切相关。猪场位置比较偏僻，饲养条件不尽人意。此次疫病的发病原因分析可能是由于饲养员看护管理不善，导致野猫进入产房，抓咬小猪导致。并且该弓形虫的DNA传染性很强，可短时间内传至别的仔猪带虫，在转入保育栏时，仔猪的免疫力降低从而导致发病。猪弓形虫病本身就缺少特异性的临床症状迷惑了兽医的判断，使得治疗方向错误从而延误治疗时机，而导致了猪场的经济损失。对于后期用药，则是以磺胺药为主，并辅以增加抵抗力的保健药品[3]。

3 结束语

猪弓形虫病对养猪业的发展形成了巨大的威胁，建立有效的防治措施是决不可忽视的。目前来说，还没有切实可行的从根本上完全控制和杜绝弓形虫感染的方法。积极采取防治措施可以大大降低该病造成的伤害和损失。科学的封闭式饲养管理，尽量降低对动物体的应激；制立完善严格的检疫制度，定期抽检弓形虫，检测为阳性要及时淘汰；猪场工作人员要注意避免与猫接触等，这些都是控制弓形虫病的感染和传播的有效措施。