青皮配方颗粒制备工艺和质量标准研究

2022-10-10时向利张江艳

化工设计通讯 2022年9期

朱倩，时向利，张江艳

（1.江苏康缘药业股份有限公司质量部，江苏连云港 222000；2.江苏康缘医药商业有限公司质量部，江苏连云港 222000）

青皮是芸香科植物橘以及相关变种的干燥幼果或尚未成熟果实的果皮，最早对青皮记载出自金·张元素的《珍珠囊》：“青皮主气滞，破积结，少阳经下药也”。目前临床中主要将其用于治疗胸肋胀痛、胃痞、疝气、食积、乳房肿胀、乳核等诸多症状。配方颗粒是应用现代科学生产工艺，经提取浓缩、干燥、制粒、分装等工艺将单味中药饮片制备成可直接冲饮的颗粒制剂，不仅有利于药物的吸收，更有利于中药房的调剂效率，是对传统中药饮片剂型的改革[2]。本次研究将以标准汤剂的出膏率、橙皮苷含量等作为参照，对青皮配方颗粒制备工艺进行评价和优化，同时建立青皮配方颗粒的质量标准，以期为有效控制产品质量提供参考。

1 材料

青皮饮片购自于中药饮片厂（批号分别为2020012、2020033以及2019009），经专业人士鉴定均为芸香科植物橘及其变种的干燥幼果或未成熟果实的果皮，符合《中国药典》（2020）中关于青皮药材的相关条件；青皮对照药材（批号：121155200502，中国食品药品检定研究院）；橙皮苷（批号110721201115，以95.3%计，中国食品药品检定研究院）。甲醇（色谱级）；水（超纯水）。

2 方法及结果

2.1 青皮提取工艺

2.1.1 正交试验设计

参考相关文献设计正交试验。根据预实验结果，本次研究以橙皮苷含量、出膏率作为考察指标，以加水量、煎煮时间、煎煮次数作为因素，应用L9（3）4正交表开展实验研究，见表1。

表1 因素水平

2.1.2 实验设定及结果

采用电子天平（MS-105瑞士 Mettler Toledo公司）精准称取各个批次的青皮饮片各3份，每份10g，共9份样品。根据设计好的正交试验表的研究方法加工青皮煎煮液，然后将煎煮液浓缩，对浓缩的青皮煎煮液中的橙皮苷含量和出膏率进行测定，见表2。

表2 青皮配方颗粒煎煮正交试验

表3 方差分析表

通过试验结果可以看出，各个因素之间影响大小顺序分别为C＞A＞B，且以A3B3C2作为煎煮条件时制备所得的青皮配方颗粒效最佳。在考虑A2与A3，B2与B3之间数据相差的差异性无显著意义，从节约能耗、降低工时、节约生产成本等方面进行综合考虑，选择A2B2C2作为最佳的青皮配方颗粒提取调节，即在加水12倍量、煎煮两次，每次30min的条件下，即可获得最佳的煎煮效果。

2.1.3 对照品指标

采用标准汤剂作为配方颗粒衡量基准制备青皮标准汤剂。取青皮对照品饮片10g，12倍加水量浸泡30min后煮沸，文火微沸30min后，再加入10倍量水平煎煮20min，去渣留液。将两次滤液合并后减压浓缩到150mL。将制备好的浓缩液利用真空冷冻干燥机（RE-3000A，上海亚荣生化仪器厂）冻干处理后，即可得到青皮标准汤剂冻干粉。

取橙皮苷对照品适量，加入制备好的50%甲醇（标准品），制备成每1mL含橙皮苷0.15mg的对照品溶液。

制备青皮配方颗粒时取青皮饮片2 500g，按照上述设计好的流程制备煎煮液，滤过后加入适量的麦芽精，采用喷雾干燥技术干燥后再次加入适量的麦芽精华和二氧化硅助流，搅拌制粒后制备成青皮配方颗粒。每个批次各制备一批配方颗粒（QP01、QP02、QP03）。

2.3 正交试验结果验证

2.3.1 薄层色谱鉴别

取青皮样本0.2g，研磨后加入10mL甲醇，利用数控超声波清洗器（KQ-600型，昆山市超声仪器有限公司）超声处理20min后过滤留液，蒸干后再次加入甲醇2mL溶解，制备成供试品溶液。

取制备好的青皮配方颗粒加入甲醇10mL，按照供试品制备方法制成对照品溶液。另取青皮阴性样本0.2g，按照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。取制备好的各组样本各2μL，对照药物溶液1μg，加入1%氯氧化钠溶液制备的硅胶C薄层板（G型，青岛海洋化工有限公司）中，采用乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）作为展开剂，展开至3cm后取出晾干，再次以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20∶10∶1∶1）的上层溶液作为展开剂，展至8cm，取出晾干。再喷三氯化铝溶液，利用暗箱三用紫外分析仪（ZF-7，上海佳鹏科技有限公司）进行检验，检验波长设定为365nm。可见供试品溶液色谱与对照药材溶液色谱对应位置存在着相同颜色的荧光斑点，而阴性对照则无干扰。

2.2.2 出膏率测定

青皮标准汤剂的出膏率根据冻干粉量来计算，即出膏率=冻干粉重量/汤剂制备所用饮片量 ×100%。青皮配方颗粒出膏率则根据干燥后的干膏粉量计算，即配方颗粒出膏率=浸膏干膏粉重量/原料饮片重量 × 100%。通过测定可见，3个不同批次青皮提取物出膏率在16.03%～29.14%，均值为25.48%，SD=2.15%。根据相关标准计算青皮标准汤剂出膏率在17.84%～33.12%，而三个不同批次青皮饮片的出膏率分别为24.83%、26.04%和25.57%，均在标准汤剂出膏率范围之内，表明本次研究设计的青皮配方颗粒提取工艺合理。

2.2.3 橙皮苷含量测定

采用A2B2C2作为制备工艺，以标准汤剂的橙皮苷含量作为对照，对正交试验准确性进行评价。结果可见，标准青皮汤剂的橙皮苷含量为8.01%，而采取A2B2C2作为提取条件时，青皮样本的橙皮苷含量为7.90%，通过结果可以看出，A2B2C2作为提取条件效果良好。

2.4 青皮配方颗粒制备

根据《中国药典》2020版中关于颗粒剂的相关操作方法和规定，以研究设计好的提取工艺制备青皮提取物，再将提取物制备成配方颗粒。制备颗粒时将A2B2CB提取工艺制备的干膏与配料按照1∶1的比例加入辅料，再将浓缩好的药液加入到全自动颗粒机制备成青皮配方颗粒。

2.5 青皮配方颗粒质量检验

2.5.1 粒度检测

3个批次的青皮各称取适量制备成青皮配方颗粒，每份10g，分别过5号筛和1号筛，分析青皮颗粒中能过5号筛但未能通过1号筛的颗粒比例。结果可见，3个批次青皮配方颗粒中能够5号筛但未能通过1号筛的颗粒比例分别为11.9%、12.4%和12.7%，均未超过15%，符合《中国药典》（2020版）相关规定。

2.5.2 水分检查

根据《中国药典》（2020）中颗粒制剂水分测定相关方法，对制备好的青皮颗粒水分进行测定。结果显示，三个批次青皮配方颗粒水分含量分别为5.08%、4.94%以及5.17%。三个批次的青皮配方颗粒水分均未超过8%，符合相关规定要求。

2.5.3 干燥失重检查

称取3个批次的青皮配方颗粒各10g，置入到电热恒温干燥箱内，以80℃的温度恒温烘烤至颗粒恒重，再次对颗粒进行称重。结果可见，3份样本干燥失重比为0.0131g、0.0139g和0.0111g，干燥失重比平均值为0.0127g，符合相关规定标准。

2.5.4 溶化性检查

取不同批次的青皮配方颗粒各10g置入到烧杯内，加入80℃蒸馏水30mL，对液体匀速搅拌约5min，观察颗粒的溶化情况。结果可见，颗粒在加入热水后快速溶解，经搅拌后出现轻微的浑浊现象，所有颗粒均溶化，符合《中国药典》（2020版）相关规定标准。

2.5.5 流动相考察

休止角测定采用固定漏斗法，即将三个串联在一起的漏斗采用铁架台进行固定，然后将最下方的漏斗放置在距离水平绘图纸约1cm高度的位置，然后将颗粒小心地沿着漏斗壁倾倒于漏斗内，直至下方颗粒形成的锥体尖端能够接触到漏斗下方口为止，对圆锥体的高度以及锥体底部半径（R）tanØ=H/R，其中Ø即休止角。结果可见，三组样本的休止角分别为24.6°、23.4°和24.1°，均＜40°，符合相关要求。

2.5.6 重复性考察

以青皮橙皮苷含量作为重复性考察指标，检测时取青皮橙皮苷，按照供试品溶液配制方法，制备供试品溶液6份，利用色谱法对供试品溶液中的橙皮苷含量进行测定，结果可见，6份样本平均橙皮苷面积RSD分别为0.68%，可见该方法具有良好的重复性。

2.5.7 加样回收实验

精准称取制备好的青皮配方颗粒粉末6份，每份0.2g，分别置入到50mL量瓶内，加入适量的甲醇，超声处理30min后冷却，再次加入甲醇定容后摇匀，精准吸取25mL置入到50mL容量瓶内，精密加入对照品溶液3mL（橙皮苷质量浓度为0.483g/L），再次加入甲醇定容后摇晃均匀，抽取滤液后，按照色谱条件进行测定，计算回收率。通过结果可见，3个不同批次青皮配方颗粒的回收率分别为96.41%、97.58%和98.55%，RSD为1.42%，可见该工艺回收率良好。

3 讨论

采用正交试验对青皮配方颗粒的生产条件进行筛选优化，经优选后，以A2B2C2作为青皮药物提取工艺，即加水12倍量、煎煮两次，每次30min，所得提取物无论是在稳定性还是在出膏率方面，均表现良好。橙皮苷可溶于稀碱、吡啶或超过70℃的热水，微溶于甲醇，因此煎煮液采用水作为溶媒，通过加热可有效提取到青皮内的橙皮苷成分。研究以青皮作为对照药材，采用TLC法对青皮配方颗粒和对照品药材的色谱进行对比，可见两者相应位置上的斑点颜色相同，斑点清晰，表明两者成分相同。通过对该工艺制备的青皮配方颗粒质量进行考察，以橙皮苷作为考察指标，结果表明，所得青皮配方颗粒具有良好的稳定性和可重复性，以该参数制备的青皮配方颗粒成本质量稳定，有利于降低生产成本，且质控简便，可用于工业生产。