血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平与阿尔茨海默病患者病情程度的相关性及临床意义

王伟 郑丽平 常立国 郭富山

聊城市第三人民医院神经内科，聊城 252000

阿尔茨海默病（AD）为神经系统退行性疾病，主要表现为进行性认知功能损伤，近年AD发病率随人口老龄化呈逐渐升高趋势，影响患者生存质量［1-3］。研究表明，AD的发生、进展与神经损伤联系密切，其中血清同型半胱氨酸（Hcy）具有神经毒性作用，为神经损伤评估常用指标，同时参与AD疾病进展［4-6］。因此，血清微小核苷酸-26b（miRNA-26b）、β淀粉样前体蛋白（β-APP）等脑损伤相关指标水平可能与AD病情程度存在一定联系［7-9］。本研究选取聊城市第三人民医院收治的65例AD患者，旨在观察AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平变化，分析其与病情程度的关系，为AD诊断、防治提供新思路，现报道如下。

资料与方法

1、一般资料

选取2019年8月至2022年3月聊城市第三人民医院收治的65例AD患者为观察组，根据总体衰退量表（GDS）分为轻度AD组（27例）、中度AD组（21例）、重度AD组（17例），另选取同期60例健康体检者为对照组，其中观察组男28例，女37例，年龄64～86（75.61±5.13）岁；文化程度：24例小学，29例初中，12例中学及以上。对照组男31例，女29例，年龄63～86（74.82±5.27）岁；文化程度：10例小学，12例初中，6例中学及以上。两组基线资料均衡可比（均P＞0.05）。

本研究经聊城市第三人民医院伦理委员会审批通过，患者及家属均了解本研究并当面签订知情同意书

2、纳入及排除标准

纳入标准：（1）符合阿尔茨海默病学会AD诊断标准［10］；（2）简易智能精神状态量表（MMSE）评分：小学≤20分，初中及以上≤24分；（3）病史记录完整；（4）Hachinski缺血指数量表（HIS）评分≤4分；（5）日常生活能力量表（ADL）评分＜26分。排除标准：（1）伴有心脑血管疾病；（2）依从性较差，无法配合取样；（3）伴有恶性肿瘤疾病；（4）近期存在感染史；（5）存在肝肾等器质性疾病；（6）存在视听力严重障碍或其他干扰影响神经系统评估准确性。

3、方法

3.1、血清相关指标检测AD患者均于入院后抽取5 ml空腹静脉血，离心（4000 r/min，10 min，半径为19 cm）处理，采用全自动生化分析仪（厂家：日本日立公司，型号：7600-110型）检测血清Hcy水平；采用放射免疫法测定血清β-APP水平；采用荧光定量PCR仪（厂家：北京同洲维普科技有限公司，型号：C7型）检测血清miRNA-26b水平。

3.2、病情评估相关量表 采用总体衰退量表（GDS）评分评估AD患者痴呆程度，计分0～7分，GDS评分≤3分为轻度，4～5分为中度，6～7分为重度［11］。采用MMSE评定AD患者认知功能缺损程度，计分0～30分，＜27分为认知功能障碍，≥27分为认知功能正常；其中认知功能障碍分为轻度（21～26分）、中度（10～20分）、重度（0～9分）。采用ADL评估AD患者日常生活能力，计0～100分，＜20分为完全依赖；20～49分为重度依赖；50～74分为中度依赖；75～95分为轻度依赖；96～100分为生活自理。

4、观察指标

（1）对比两组血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平。（2）对比不同病情程度AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平。（3）对比不同病情程度AD患者GDS、MMSE、ADL评分。（4）分析血清miRNA-26b、HCY、β-APP水平与AD患者GDS、MMSE、ADL评分相关性。

5、统计学分析

采用SPSS 23.0对数据进行分析，符合正态分布的计量资料以（±s）表示，多组间比较以单因素方差进行分析，两两比较以LSD-t检验，以Pearson相关性分析探究血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平与AD患者GDS、MMSE、ADL评分的关联性，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结果

1、两组血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比

观察组血清miRNA-26b水平低于对照组，血清Hcy、β-APP水平均高于对照组（均P＜0.05），见表1。

表1 两组研究对象的血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比（±s）

表1 两组研究对象的血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比（±s）

注：观察组为阿尔茨海默病患者，对照组为健康体检者；miRNA-26b为微小核苷酸-26b，Hcy为同型半胱氨酸，β-APP为β淀粉样前体蛋白

组别观察组对照组t值P值例数6560 miRNA-26b 0.51±0.161.07±0.2813.861＜0.001 Hcy（μmol/L）21.45±6.2915.07±4.386.529＜0.001 β-APP（ng/L）92.57±28.6051.54±9.2710.607＜0.001

2、不 同 病 情 程 度AD患 者 血 清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比

重度AD组血清miRNA-26b水平较轻度AD组、中度AD组低，血清Hcy、β-APP水平较轻度AD组、中度AD组高（均P＜0.05），见表2。

表2 不同病情程度的AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比（±s）

表2 不同病情程度的AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平对比（±s）

注：AD为阿尔茨海默病，miRNA-26b为微小核苷酸-26b，Hcy为同型半胱氨酸，β-APP为β淀粉样前体蛋白；与轻度AD组对比，aP＜0.05；与中度AD组对比，bP＜0.05

组别轻度AD组中度AD组重度AD组F值P值例数2721 17 miRNA-26b 0.58±0.140.54±0.15a 0.36±0.15ab 12.537＜0.001 Hcy（μmol/L）17.83±4.3922.20±4.54a 26.27±5.62ab 16.620＜0.001 β-APP（ng/L）81.21±22.6898.96±25.89a 102.72±26.47ab 4.9720.010

3、不同病情程度AD患者GDS、MMSE、ADL评分对比

重度AD组GDS评分较轻度AD组、中度AD组高，MMSE、ADL评分较轻度AD组、中度AD组低（均P＜0.05），见表3。

表3 不同病情程度的AD患者GDS、MMSE、ADL评分对比（分，±s)

表3 不同病情程度的AD患者GDS、MMSE、ADL评分对比（分，±s)

注：AD为阿尔茨海默病，GDS为总体衰退量表，MMSE为简易智能精神状态量表，ADL为日常生活能力量表；与轻度AD组对比，aP＜0.05；与中度AD组对比，bP＜0.05

组别轻度AD组中度AD组重度AD组F值P值例数2721 17 GDS评分2.51±0.394.36±0.38a 6.22±0.43ab 461.953＜0.001 MMSE评分23.47±3.1916.24±2.55a 6.76±1.31ab 214.556＜0.001 ADL评分24.10±1.3718.93±1.59a 13.58±1.68ab 251.369＜0.001

4、相关性分析

Pearson相关性分析显示，血清miRNA-26b与GDS评分呈负相关，与MMSE、ADL评分呈正相关（均P＜0.05）；血清Hcy与GDS评分呈正相关，与MMSE、ADL评分呈负相关（均P＜0.05）；血清β-APP与GDS评分呈正相关，与MMSE、ADL评分呈负相关（均P＜0.05）。见表4。

表4 AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平与GDS、MMSE、ADL评分的相关性分析（65例）

讨论

AD为认知功能障碍综合病症，相关数据显示，预计到2050年全世界痴呆患者将达1.15亿，其中AD占比50%～70%，为世界公共问题［12-14］。AD发病原因可能涉及年龄、遗传、炎性反应、神经传递障碍、细胞骨架改变等多种因素，病因复杂，个体病情程度差异较大；为明确AD患者病情程度，及时进行针对性诊治，近年临床将AD研究关注点逐渐转向血清相关指标水平［15-17］。

本研究结果显示，观察组血清miRNA-26b水平低于对照组，且不同病情程度AD患者血清miRNA-26b水平对比差异有统计意义（P＜0.05），可见血清miRNA-26b与AD病情程度联系密切。梁昌权等［18］探究AD患者血清表达中指出，血清miRNA-26b是AD发生的独立危险因素，可能通过调节Hcy、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、心房钠尿肽（ANP）水平，促使血脂代谢改变，参与AD病情进展，与本研究结果相似。本研究进一步研究发现，血清miRNA-26b与GDS评分呈负相关，与MMSE、ADL评分呈正相关（均P＜0.05）；进一步证实，血清miRNA-26b水平改变与AD病情密切相关，临床检测血清miRNA-26b水平，对及时诊治、延缓AD病情进展具有积极作用。

脑血管病变可造成血管性认知功能障碍，还可导致AD的发生、进展［19-21］。本研究结果显示，观察组血清Hcy、β-APP水平较对照组高，不同病情程度AD患者血清Hcy、β-APP水平对比差异有统计学意义，且Pearson相关性分析显示，血清Hcy、β-APP与GDS评分呈正相关，与MMSE、ADL评分呈负相关（均P＜0.05）；提示血清Hcy、β-APP水平可一定程度反映AD病情进展。血清Hcy水平越高，AD患者痴呆程度越深，认知功能障碍、生活依赖程度越严重；β-APP水平升高反应机体神经系统损伤严重，其代偿性高水平表达以营养、保护神经［22-24］。Hcy产生于含硫氨基酸代谢，作为氨基酸半胱氨酸的异种可激活血小板，介导血管平滑肌增生，促使血液高凝，加剧氧化应激反应［25-27］。Hcy高水平表达可促进胶原形成，造成血管弹力纤维受损，可多途径产生毒性作用，损伤神经细胞，干扰海马区神经元细胞DNA修复，造成神经元损伤和丢失，损伤认知能力［28-30］。此外相关报道指出，β-APP作为单跨膜蛋白，广泛存在于各组织细胞，经轴突快速转运机制运输，正常神经元中β-APP处于较低水平，若机体发生缺氧、兴奋性毒素等损伤，β-APP水平迅速升高；AD发生、进展过程中，β-APP可调节脑中载脂蛋白E代谢，与其建立生物联系，参与神经系统损伤反应，发挥神经保护作用，可维持神经元稳定状态，控制神经元兴奋性［31-32］。

综上所述，AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP参与AD病情进展，其水平变化与病情严重程度具有一定相关性，可作为AD诊断、治疗参考指标。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突