自身免疫性肝病相关自身免疫性抗体检测的临床应用

喻娓

（武汉市第七医院检验科，湖北 武汉 430071）

自身免疫性肝病（autoimmune liver disease）属于一种慢性肝脏疾病，主要包括原发性硬化性胆管炎（PSC）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）、自身免疫性肝炎（AIH）等[1，2]。目前，关于自身免疫性肝病的病因、病机尚未完全明确，普遍认为由自身免疫及肝胆损伤所引起[3]。临床缺乏特异性表现，且如果不及时有效治疗，可能会引发肝衰竭，严重威胁患者的生命安全[4]。同时不同分型临床治疗方法存在差异，因此早期发现、明确诊断具有重要的临床价值[5]。有研究指出[6]，不同类型与病理特征的自身免疫性肝病具有各自的特点，自身免疫性抗体可能也存在差异[7]。本研究结合2019 年6 月-2020 年12 月我院传染科接诊的140 例肝炎患者临床资料，观察自身免疫性肝病相关自身免疫性抗体的临床应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年6 月-2020 年12 月武汉市第七医院传染科接诊的140 例肝病患者为研究对象，其中原发性胆汁性肝硬化（PBC）34 例、自身免疫性肝炎（AIH）60 例、丙肝6 例、血吸虫肝病4 例、肝硬化24 例、肝功能不全10 例、药物性肝炎2 例。年龄17～82 岁，平均年龄（49.55±32.58）岁；女82例，男58 例。本研究经过医院伦理委员会批准，患者自愿参加本研究，并签署知情同意书。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：①均符合临床肝病诊断标准[8]；②均未合并肝肿瘤、酒精性肝硬化等肝脏疾病[9]。排除标准：①合并肝、肾、心、脑血管系统等严重疾病者；②认知障碍、合并严重恶性肿瘤；③依从性较差，不能配合者；④随访资料不完善者。

1.3 方法

1.3.1 仪器和试剂 采用荧光显微镜（BH-2 型，重庆澳浦），应用欧蒙（杭州）医学诊断有限公司提供的抗核抗体IgG 检测试剂盒，基质分别为人Hep-2 细胞（HEP-2 cell）、猴肝（HEPAR PRIM）。采用浩欧博全自化学发光免疫分析仪，应用江苏浩欧博生物医药股份有限公司提供的自身免疫性抗体八项的检测试剂盒。采用日立牌全自动生化分析仪（型号：7600）及其配套试剂（由四川迈克生产）进行血清肝功能ALT、AST、GGT、ALP 各指标检测。

1.3.2 检测方法 运用磁微粒化学发光法对抗CENPB 抗体（CENPB）、抗线粒体抗体（M2）、抗Ro52抗体（Ro52）、抗GP210 抗体（GP210）、抗Sp100 抗体（Sp100）、抗肝肾微粒体抗体（LKM-1）、抗肝胰抗体与抗可溶性肝抗原抗体（SLA/LP）、抗1 型肝细胞溶质抗原抗体（LC-1）进行测定；运用间接免疫荧光法对抗核抗体（ANA）进行稀释度检测，阳性评定标准为在不同的基质细胞里有特征性黄绿色荧光形态出现。血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）检测C 采用酶法，严格按照《WS/T 404.1-2012 临床常用生化检验项目参考区间》[10]的相关标准进行操作。正常值：ALT 为5～40 U/L，AST 为8～40 U/L，GGT＜40 U/L，ALP 为40～110 U/L[11]。

1.4 观察指标 比较患者的自身抗体（CENPB、M2、Ro52、GP210、Sp100、LKM-1、SLA/LP、LC-1）检出情况、PBC 和AIH 患者肝功能（ALT、AST、GGT、ALP）水平以及ANA 荧光核型（均质型、颗粒型、核仁型、胞浆颗粒型）。

1.5 统计学方法 采用统计软件包SPSS 21.0 版本对本研究的数据进行统计学处理，采用（±s）表示符合正态分布的计量资料，组间比较采用t检验；计数资料采用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验；P＜0.05说明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组患者自身免疫性抗体检出率比较 PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 检出率均高于丙肝、血吸虫病、肝硬化、肝功能不全、药物性肝炎，差异有统计学意义（P＜0.05）；而M2 抗体检出阳性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 检出率，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 各组患者自身免疫性抗体检出率比较[n（%）]

2.2 PBC、AIH 患者肝功能指标水平比较 AIH 组患者血清ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC 组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 PBC、AIH 患者肝功能指标水平比较（±s，U/L）

表2 PBC、AIH 患者肝功能指标水平比较（±s，U/L）

2.3 PBC、AIH的ANA 荧光核型比较 AIH的ANA荧光核型中均质型比例高于PBC 组，颗粒型低于PBC，差异有统计学意义（P＜0.05）；二者核仁型、胞浆颗粒型比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 PBC、AIH的ANA 荧光核型比较[n（%）]

3 讨论

随着对自身免疫性肝病发病机制的不断深入研究，其发病的诊断率越来越高[12，13]。目前，该病发病机制尚未明确，且无显著特异性表现，多数患者肝功能异常，常常被误诊成为其他肝炎[14]。治疗自身免疫性肝病通常使用激素类免疫抑制剂，如果诊断错误将严重影响临床治疗疗效[15]。肝组织受到病毒感染后，肝细胞表层白细胞会大量活化，刺激自身B 细胞释放自身抗体[16，17]。而自身抗体主要是器官、自身组织、细胞成分、细胞的抗体，在正常机体中呈较低水平表达。如果自身抗体表达水平超过正常水平，即提示机体肝功能受到一定损伤[18]。在不同种类慢性肝病均具有相似的临床特征，即人体血清中具有肝脏疾病自身免疫性抗体，增加临床诊断难度[19]。但是不同病型自身免疫性肝病对血清ANA 水平的影响各有差异，其中以AIH 造成的影响最为明显。自身免疫性肝病相普遍存在特异性自身抗体，且自身抗体的滴度水平通常较高。因此，及时有效鉴别自身免疫性肝病对于患者的治疗有重要意义[20]。

本研究中PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 检出率均高于丙肝、血吸虫病、肝硬化、肝功能不全、药物性肝炎（P＜0.05），表明不同肝病患者以上各自身免疫抗体阳性率存在差异，但是PBC、AIH 患者各自身免疫抗体检出阳性率较高，血清自身免疫抗体的高敏感性能够用于筛查PBC、AIH，可作为检测PBC、AIH的一个重要标志物。同时在PBC、AIH 患者中，M2 抗体检出阳性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 检出率（P＜0.05），该结论提示在自身抗体谱检测中，血清M2 抗体的高敏感性能够用于筛查自身免疫性肝病，可作为检测自身免疫性肝病的一个重要标志物。AIH 患者ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC（P＜0.05），表明AIH 患者肝功能ALT、AST、GGT、ALP 均高于PBC 患者，通过检测肝功能指标，可较好的鉴别PBC 和AIH，进一步为AIH的诊断提供一定的指导意义，该结论与金巧菲等[21]的报道相似。此外，AIH 患者ANA 荧光核型中均质型比例高于PBC 患者，颗粒型低于PBC 患者（P＜0.05），二者核仁型、胞浆颗粒型比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示AIH 患者ANA 荧光核型主要表现为均质型，而PBC 主要表现为颗粒型，为鉴别AIH 提供一定有效的参考。核型特征在自身免疫性肝病中也具有一定的表现，对临床的鉴别诊断也具有一定的临床意义。总之，肝功能、核型辅助协助自身免疫性抗体检测，可进一步为自身免疫性肝病的鉴别诊断提供可靠依据。

综上所述，自身免疫性肝病相关自身免疫性抗体的临床中具有较高的应用价值高，但是为了进一步提高自身免疫性肝病的鉴别诊断，可辅以肝功能指标和核型检测，以进一步提高自身免疫性肝病的临床诊断水平。