FSH、二氢吡啶对关中奶山羊精液品质的影响

张永涛，王鹏飞，李德娴，邹家浩，王广，袁宇欣，余梦琦，陈璐，李广

（1.西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100；2.泾阳县动物卫生监督所，泾阳 713799）

FSH（促卵泡激素）是垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种激素，成分为糖蛋白，在动物体内呈脉冲式分泌，主要作用为促进卵泡颗粒层细胞增生分化和卵泡成熟。FSH在雄性动物中的主要作用是促进曲细精管成熟，调节精子的生成[1,2]。二氢吡啶（Dilludine）是一种具有部分天然抗氧化剂作用的新型多功能添加剂，可抑制脂类化合物的过氧化过程，形成肝保护层；具有改变血清中的某些激素水平、促进畜禽生长发育、提高繁殖性能、增强免疫功能的作用，而且其代谢完全、几乎无残留[3～5]。李克驴等人饲喂种公牛试验结果表明，二氢吡啶可提高精子活力16.6%、顶体完整率18.7%、射精量12.9%，而精子畸形率下降37.20%[4]。陈菊芳等报道，在兔颗粒饲料中添加0.025%二氯吡啶能明显提高公兔精液品质和母兔的秋季受胎率[5]。关中奶山羊是目前世界上最为优秀的奶山羊品种之一，具有体型结实匀称、遗传性能稳定、产奶量高、奶质优良、适应性强等特点。如何提高良种奶山羊精液品质，提高优良公畜的利用率并降低繁殖成本，对人工授精技术的推广以及奶山羊良种化进程有很大的推动作用。为此，本试验采用FSH和二氢吡啶以及二者联合使用，观察其对关中奶山羊种公羊精液品质、精子形态变化的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计

在陕西省某奶山羊场选取年龄、膘情、体重相近的成年种公羊36只，随机分为4组，每组3个重复，每个重复3只羊。对照组公羊饲喂基础日粮，试验1组在基础日粮中添加二氢吡啶（剂量为每日每头50mg，国产），试验2组采用减量注射FSH（国产），第1天40U/只，第2天20U/只，第3天10U/只，试验3组二氢吡啶和FSH同时使用，剂量与上两组相同。试验于2021年9月初进行，到10月底结束，为期2个月，此时期为奶山羊最佳配种时间。

1.2 饲养管理

试验动物入栏前使用聚维酮碘彻底消毒，试验期间，奶山羊公羊每日饲喂3次（07:00、12:00以及17:00），自由采食饮水，饲养管理按照常规进行。基础日粮参照“NY/T816-2004”配制，苜蓿干草50%、玉米30%、豆粕12.5%、麸皮5%、小苏打0.5%、预混料2%；营养水平：粗蛋白质12.64%，中性洗涤纤维25.13%，酸性洗涤纤维11.21%，粗灰分6.07%。预试期15d，正试期90d。

1.3 精液处理

将通过显微镜检查合格的精液用2mmol/LGSH的稀释剂等温稀释，放入4℃冰箱冷藏2h。第一次平衡完成后，在4℃操作台内进行第二次等温稀释，然后继续在4℃冰箱中平衡2h。平衡完成后，将精液装入0.25mL的细管中，按照特定的冷冻程序将温度从5℃降到-140℃。然后将细管浸入-196℃的液氮中以完成冷冻过程；解冻时将样品在38℃水浴中解冻35s，取样进行精子检测。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 精液品质：分别于试验前1周、试验后第1～8周，按照常规精液品质评定方法对射精量、密度、精子活力进行评定。

1.4.2 精子形态学观察：于试验后第8周，每组随机选3只羊，每只羊平均涂片3张，分别对其原精和解冻精液经姬姆萨染液染色后，置于1 600倍油镜下，每片观察300个精子，计算各种畸形比率。

1.5 数据处理

本次试验数据采用Excel2010进行分类统计，使用SPSS26.0软件进行方差分析，独立样本t检验比较组间差异显著性。试验结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 FSH、二氢吡啶对关中奶山羊射精量、密度、精子活力的影响

由表1及图1～3可见，随着试验时间的延长，四个组的公羊射精量、密度及活力都有上升的趋势（P＞0.05），试验1组、试验2组及试验3组精子密度显著高于对照组（P＜0.05），其射精量与精子活力极显著高于对照组（P＜0.01），试验2组与对照组间在第6周后精子活力差异不显著（P＞0.05）。对试验的指标分析表明，试验中使用FSH和二氢吡啶以及二者联合使用，均能提高关中奶山羊的射精量、密度及活力，但是在日粮添加二氢吡啶以及二者联合使用，对关中奶山羊的射精量、密度及活力提升效果更加明显，其效果更好。

表1 FSH、二氢吡啶对关中奶山羊公羊射精量、密度、精子活力的影响

图1 不同试验期精子活力的变化趋势

图2 不同试验期射精量的变化趋势

图3 不同试验期精液密度的变化趋势

2.2 FSH、二氢吡啶对关中奶山羊精子形态的影响

由表2可见，试验1、2、3组原精中头部畸形率、变形或缺损率、膨大率、屈折率、尾部膨大、曲折率、双尾率显著低于对照组（P＜0.05），其头过大或过小率、顶体缺损率、断头率、断尾率与对照组间差异不显著（P＞0.05）；解冻精液与原精则表现为一致的变化规律（r=0.998）。对精子形态方面的试验指标分析表明，试验中使用FSH和二氢吡啶以及二者联合使用对降低原精的头部畸形率、变形或缺损率、膨大率等形态指标的影响效果明显，但对原精的过大或过小率、顶体缺损率、断头率、断尾率没有明显效果，而且解冻后的精液在形态方面的影响效果与原精的影响效果一致。

表2 FSH、二氢吡啶对关中奶山羊精子形态的影响 单位：%

3 讨论与结论

二氢吡啶的化学全名为2，6-二甲基-3，5-二乙脂基-1，4-二氢吡啶，是一种抗氧化维生素稳定剂及家畜促生长剂。其具有能抑制体内生物膜的氧化，提高生物膜中6-磷酸葡萄糖酶的活性，稳定组织细胞的作用[6～8]。有报道指出，二氢吡啶与NADPH有关的复合氧化酶系及微粒体酶有关。二氢吡啶进入动物机体内的抗氧化作用可能是通过隔断微粒体电子输送NADPH酶的活性抑制脂类化合物的过氧化过程，清除所形成的自由基[9,10]。邹晓庭等[7]报道，二氢吡啶能显著提高血清SOD活性，SOD是机体内超氧自由基的主要清除剂，可抑制脂类化合物的过氧化过程。邹晓庭等[7]、武现军等[8]都证实二氢吡啶可显著提高血清甲状腺激素（T3）水平，T3对机体的正常生长发育以及维持正常生殖有重要的作用，可促进器官、组织的分化，并对生长激素有“允许作用”。二氢吡啶还可提高下丘脑、腺垂体中cAMP的含量，促进体内多种蛋白质的合成，从而促进畜禽的生长发育[7,8]。李克驴饲喂种公牛试验结果表明，二氢吡啶可提高精子活力16.6%、顶体完整率18.7%、射精量12.9%，而精子畸形率下降37.20%[4]。陈菊芳等报道，在兔颗粒饲料中添加0.025%二氢吡啶能明显提高公兔精液品质和母兔的秋季受胎率。在绵羊日粮中添加0.01%的二氢吡啶，公羊采精量提高13.75%、精子密度提高8.53%，精子总数提高39.6%[5]。

FSH是垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种激素，成分为糖蛋白，主要作用为促进卵泡成熟。促卵泡激素可促进卵泡颗粒层细胞增生分化，并促进整个卵巢长大[9]。而其作用于睾丸曲细精管则可促进精子形成。在本试验中关中奶山羊公羊使用FSH与二氢吡啶对提高原精精子活力和射精量效果极显著（P＜0.01），试验1组、试验2组及试验3组精子密度显著高于对照组（P＜0.05），这与李克驴等、陈菊芳等用二氢吡啶饲喂公畜的试验结果相一致。单纯使用FSH对关中奶山羊公羊精液品质与对照组间在第6周后精子活力差异不显著（P＞0.05）。使用FSH、二氢吡啶或二者联合使用均可显著提高关中奶山羊精液品质，极显著提高鲜精与冻精活力，降低精子畸形率。