DC-CIK 细胞免疫联合化疗对结肠癌CME 术后患者的肿瘤标志物和淋巴细胞免疫的影响

吴丹妮

结肠癌是较常见的胃肠道恶性肿瘤,发病率有逐年升高趋势,以腹胀、水肿、贫血、消瘦、低热、排便习惯改变、肠梗阻等为主要临床表现［1］。其中,结肠癌主要以手术切除为治疗手段,早期手术可获得长期生存,但结肠癌往往早期临床症状不典型,当出现明显临床症状确诊时已为晚期、进展期,多伴转移,其疗效及预后较差［2］。近年来,相关研究指出,在常规静脉化疗基础上加入DC-CIK 细胞免疫治疗,是一种针对肿瘤的过继免疫治疗手段,可以强化机体的免疫功能,杀伤肿瘤细胞,阻碍术后发生转移,对生活质量改善和生存时间延长有所裨益［3］。本研究旨在探讨结肠癌患者行CME 术后应用DC-CIK 细胞免疫联合化疗对肿瘤标志物和淋巴细胞免疫的影响,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2018 年6 月～2020 年6 月收治的100 例结肠癌行CME 术后的患者,根据治疗方案不同分为研究组(42 例)和对照组(58 例)。研究组中男22 例,女20 例；年龄42～65 岁,平均年龄(53.28±6.34) 岁；TNM 分 期［4］：T1～T2期 5 例,T3期24 例,T4期 13 例；分化类型：低分化18 例,中分化16 例,高分化8 例；病理分期：Ⅱ期28 例,Ⅲ期14 例。对照组中男30 例,女28 例；年龄43～65 岁,平均年龄(53.34±6.40) 岁；TNM 分 期：T1～T2期 7 例,T3期33 例,T4期 18 例；分化类型：低分化25 例,中分化22 例,高分化11 例；病理分期：Ⅱ期39 例,Ⅲ期19 例。两组的性别、年龄、TNM 分期、分化类型及病理分期等一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：①均经肠镜、CT、彩超等检查诊断为结肠癌；②术后病检证实为腺癌；③均无CME 手术禁忌证；④术前经影像学检查结果判断病灶位置在结肠肝曲、盲肠和升结肠；⑤均对本研究内容知情同意。排除标准：①Dukes D 期患者；②合并重要脏器功能不全者；③近期接受过激素治疗者；④已接受过化疗者；⑤同时性或异时性双癌、多发癌者；⑥近期内患有急性脑出血者。

1.3 治疗方法

1.3.1 对照组 给予常规化疗治疗,第1～14 天给予口服卡培他滨1 g/m2,2 次/d；给予奥沙利铂130 mg/m2静脉滴注,第1 天静脉滴注2 h,此方案用药2 周停1 周；化疗后给予贝伐单抗5 mg/kg,静脉滴注30～90 min,首次输注90 min 以上,2 周1 次。视患者病情变化,化疗4～6 个周期。

1.3.2 研究组 在对照组基础上加用DC-CIK 细胞免疫治疗,化疗前1～2 d 采集患者外周静脉血50～100 ml,在实验室通过泰尔茂比司特Spectra Optia 血细胞分离机分离、培养DC/CIK 细胞,第3 天开始化疗,培养细胞第13 天,经内毒素、细菌真菌检测阴性后,经无菌生理盐水洗涤3 次,树突状细胞(DC)和同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)按照1∶1 比例,混入200 ml 含2%白蛋白的生理盐水中,在第14～16 天维持3 d 静脉回输至患者体内,回输时间为90 min/次,1 次/d,持续治疗2 个周期。

1.4 观察指标

1.4.1 肿瘤标志物 治疗前后抽取患者空腹外周静脉血3 ml,采用酶联免疫吸附试验法对肿瘤标志物(CEA、CA242、CA199、HIF-1α)进行测定。

1.4.2 淋巴细胞免疫指标 治疗前后抽取患者空腹外周静脉血3 ml,采用流式细胞仪对外周血T 细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)进行检测。

1.5 统计学方法 采用SPSS21.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示,采用t 检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后血清中肿瘤标志物水平比较 治疗前,两组血清中CA199、CA242、CEA、HIF-1α 水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后,研究组血清中CA199、CA242、CEA、HIF-1α 水平均显著低于本组治疗前,对照组血清中CEA 水平显著低于本组治疗前,CA199、CA242、HIF-1α 水平显著高于本组治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05)；且研究组治疗后血清中CA199、CA242、CEA、HIF-1α 水平均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组治疗前后血清中肿瘤标志物水平比较()

表1 两组治疗前后血清中肿瘤标志物水平比较()

注：与本组治疗前比较,aP＜0.05；与对照组治疗后比较,bP＜0.05

2.2 两组治疗前后淋巴细胞免疫指标比较 治疗前,两 组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后,研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于本组治疗前,CD8+显著低于本组治疗前,对照组CD3+显著低于本组治疗前,CD8+显著高于本组治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05)；对照组治疗后CD4+、CD4+/CD8+与本组治疗前比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；研究组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于对照组,CD8+显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组治疗前后淋巴细胞免疫指标比较()

表2 两组治疗前后淋巴细胞免疫指标比较()

注：与本组治疗前比较,aP＜0.05；与对照组治疗后比较,bP＜0.05

3 讨论

中晚期结肠癌的治疗难度大,对化疗不敏感,术后容易复发转移,不能有效保证患者生活质量和生存期［5］。DC-CIK 细胞免疫治疗是近几年肿瘤治疗的研究热点,可与传统手术、化疗等治疗手段联合治疗,可采集和体外培养人体自身免疫细胞并使其数量和靶向性杀伤力提升,再按比例回输至患者体内,对肿瘤免疫机制进行调节,明显提升机体的免疫功能,起到抗肿瘤的作用,有效杀灭血液和组织中的癌细胞,并对手术造成的机体免疫损伤进行恢复［6］。

肿瘤标志物在一定程度上可反映肿瘤的恶性程度和进展情况。近年来相关研究指出［7］,肿瘤标志物CA199、CA242、CEA 与消化道相关恶性肿瘤的发生进展密切相关。而HIF-1α 是近年来新发现的一个肿瘤标志物,与结肠癌的发生及发展有密切关系［8］。本研究显示,治疗后,研究组血清中CA199、CA242、CEA、HIF-1α 水平均显著低于本组治疗前,对照组血清中CEA 水平显著低于本组治疗前,CA199、CA242、HIF-1α 水平显著高于本组治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05)；且研究组治疗后血清中CA199、CA242、CEA、HIF-1α 水平均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。提示对照组常规化疗后虽一定程度抑制肿瘤细胞增殖,但对肿瘤细胞的杀伤力和抑制病情进展方面效果并不理想,而研究组DC-CIK细胞免疫疗法的效果相对优势明显,考虑由于DC 细胞是具有特异性抗原的调控初始免疫反应的白细胞群落,CIK 细胞则具有较强的抗肿瘤活性,二者皆有较强的杀伤肿瘤细胞能力,通过自体回输后,可促进细胞免疫增殖,迅速增强机体免疫能力,大大提高机体免疫应答反应,增强对肿瘤细胞的杀伤能力,有效地抑制肿瘤细胞生长和清除肿瘤细胞,缓解患者术后病情进展和预防转移,延长其生存期［9］。

T 淋巴细胞标志物(CD3+、CD4+、CD8+)、B 淋巴细胞标记物(CD19+)和NKT 细胞标志物(CD3+CD56+)均与肿瘤免疫有密切关系［10］,T 淋巴细胞亚群的表达是影响结肠癌预后的独立因素,与肿瘤分期、局部浸润和生存期有明显的相关性［11］。本研究显示,治疗后,研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于本组治疗前,CD8+显著低于本组治疗前,对照组CD3+显著低于本组治疗前,CD8+显著高于本组治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05)；对照组治疗后CD4+、CD4+/CD8+与本组治疗前比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；研究组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于对照组,CD8+显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。提示对照组常规化疗后患者的自身免疫力有所下降,而研究组采取DC-CIK 免疫疗法后,明显增强了患者的免疫效应细胞的细胞毒效应,持续释放出细胞毒性物质,促肿瘤细胞凋亡,还可分泌多种细胞因子,产生免疫效应,明显提高化疗期间患者的免疫功能［12］。

综上所述,DC-CIK 细胞免疫联合化疗用于结肠癌CME 术后患者,可改善淋巴细胞免疫应答,使血清肿瘤标志物水平下降。