肉羊首次、二次输卵管冲胚效果分析
2022-08-24陈童玉山江
陈童 玉山江
(新疆畜牧科学院畜牧研究所 830011)
萨福克肉羊是目前世界上著名的优良肉用品种,具有体格大、体质强壮、性成熟早、繁殖率高、产肉性能好、生长快、适应性强及杂交效果好等特点,是良好的杂交父本。但良种萨福克公羊数量有限,仅靠其自然繁殖无法满足本地羊杂交改良需要。因此,为了提高供体羊利用率,发挥优良品种生产性能,追求更高的经济效益,在经过第一次超排处理后,间隔一定时间对母羊再次进行超排处理。本试验对萨福克肉羊进行第一次和第二次超排处理,胚胎移植技术进行研究,以降低良种繁殖、养殖成本,提高经济效益。
1 材料和方法
1.1 供体羊选择
选择身体健康、膘情中上等、无遗传和繁殖疾病、健康状况良好的年龄在2~5 周岁的黑头萨福克母羊,在超排前两个月加强饲养管理,并进行必要的防疫、检疫和驱虫工作。
1.2 受体羊选择
本地土种羊均为经产母羊,生殖系统正常,空胎,体重在45kg 以上。
1.3 药物选择
促卵泡激素(FSH),浙江省宁波市激素制品厂生产,冻干粉末,安瓿包装,规格100IU/安瓿,4℃冰箱保存,用前用10mL 生理盐水稀释。促黄体素(LH),浙江省宁波市激素制品厂生产,冻干粉末,安瓿包装,规格每安瓿200IU/,4℃冰箱保存,用前用2mL 生理盐水稀释。氯前列烯醇(PGF2a),浙江省宁波市激素制品厂生产,规格为每支0.2mg/2mL。CIDR 和孕酮海绵阴道栓,进口。
2 方法
2.1 供受体母羊的管理
供、受体母羊均经2~3 个情期观察,发情正常,并进行编号,实行分群饲养管理。
2.2 供受体母羊的分组
供体羊采用第二情期超排和埋栓超排两套方案。受体母羊均埋入孕酮栓,供受体母羊相互对应,按照1:6 进行数量分配(即1 只供体,配6 只受体)。
2.3 供体羊超排
2.3.1 第二情期超排
自然发情供体羊从发情后的第12~13 天开始用FSH 进行超排,以递减剂量连续注射3d,共6 次,每次间隔12h,FSH 总剂量为180IU/只。当FSH 注射到第5 和第6 针时分别注射1次PGF2a,0.lmg/只,促其发情。
2.3.2 埋栓处理
没有自然发情的供体进行埋栓处理,埋栓后第9 天用FSH进行超排处理,以递减剂量连续注射3d,共6 次,每次间隔12h,FSH 总剂量为180IU/只。当FSH 注射第5 针时撤栓,同时注射1 次PGF2a,0.lmg/只,撤栓后用生理盐水冲洗阴道,注射第6 针FSH 时再注射1 次PG,0.lmg/只。
2.4 供体羊的发情及配种
供体羊采取公羊试情法进行发情鉴定。发情同时肌肉注射LH,120IU/只。发情后12h、24h 分别进行两次配种,配种均以公羊本交的方式进行。
2.5 胚胎的回收及鉴定
供体羊从第一次配种的时间开始计算,65~72h 后采用输卵管采胚法回收胚胎,在术前24h 开始禁饲[1]。刮毛、清洗消毒完全后打开腹腔,牵拉出子宫和卵巢,对黄体进行计数,将冲胚管一端由输卵管伞部喇叭口插入约2cm 左右深处(打活结或用手指捏紧固定),另一侧接集卵皿。用注射器吸取37℃地冲卵液5mL,在子宫角靠近输卵管的部位,将针头朝输卵管方向扎入,一只手的手指在针头后方捏紧子宫角,另一只手推注射器,冲卵液由宫管结合部流入输卵管,经输卵管流入集卵皿。回收的胚胎根据形态特征分为A,B,C,D 4 个等级[2],A,B级胚胎作为可用胚,用于鲜胚移植。
2.6 受体羊移植
受体羊卵巢必须有正常黄体存在,无黄体或黄体过小的受体不用于移植。且受体羊与供体羊发情同步差不能超过12h。移植位置与胚胎回收位置相对应[3]。
3 结果与分析
百分数之间的比较采用卡方检验。平均数之间的比较采用T 检验。
3.1 首次超排与二次超排各项指标比较
由表1 可知,首次超排和二次超排处理的供体羊平均黄体数和胚胎可用率差异不显著(p>0.05);但二者胚胎回收率差异显著(p<0.05),说明超排处理对首次超排和二次超排的超排效果没有影响,但由于第二次超排的供体羊存在输卵管伞或输卵管粘连的情况,可能会造成回收率降低。
表1 首次超排与二次超排对超排效果的影响
3.2 第二情期超排处理各项指标比较
由表2 可知,首次超排和二次超排处理后的胚胎回收率分别为93.1%和80.5%,两者差异显著(p<0.05)。二者可用率分别为89.0%和88.4%,差异不显著(p>0.05)。利用第二情期超排处理没有造成二者黄体数的明显差异。
表2 第二情期超排处理对超排效果的影响
3.3 埋栓超排处理各项指标比较
由表3 可知,首次超排和二次超排处理的供体羊胚胎回收率分别为84.4%和76.3%,两者差异显著(p<0.05)。二者可用率分别为86.9%和88.9%,差异不显著(p>0.05)。埋栓超排处理没有对二者黄体数造成显著差异。
表3 埋栓超排处理对超排效果的影响
4 讨论
(1)重复超排使优质供体羊的利用率大幅增加,但不可避免的粘连情况使回收率明显降低,粘连严重者只能淘汰。
(2)输卵管法回收胚胎对母羊造成的损伤较大,极易造成粘连,这可能因为输卵管是生殖系统中比较纤细的一段,手术中需将整个输卵管连同卵巢拉出腹腔,术中易造成卵巢、输卵管等组织损伤。
(3)在冲胚过程中,总结出手术冲胚时手术处周围羊毛要刮净,严格消毒,以防产生炎症;冲胚时手术动作要轻、要细致,防止输卵管、输卵管伞及其他部位出血,造成粘连、堵塞;手术时用生理盐水加入青霉素和链霉素冲洗伤口和血液,冲胚结束后用普鲁卡因油剂青霉素涂抹子宫、卵巢及输卵管防止发生粘连。只要手术规范,一般不至于发生粘连,可反复使用,节约成本。