宫颈细胞DNA倍体定量分析联合液基薄层细胞学检查在宫颈癌早期筛查中的应用价值
2022-08-10周艳陈晓西
周艳，陈晓西
上海市长宁区妇幼保健院妇产科，上海 200050
宫颈癌是目前较为常见的妇科恶性肿瘤，对女性的生命健康造成严重威胁。近年来宫颈癌的发病率明显提高，且呈年轻化趋势。宫颈癌病情发展是渐变式的连续过程，由宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）→浸润癌逐步进展，早期宫颈癌无显著的临床症状，患者确诊时病情已进一步发展。因此，加强早期宫颈癌的筛查是预防宫颈癌进展的有效手段[1-2]。在妇科疾病的临床筛查中，宫颈液基细胞学的应用范围与频率均有所提升，尤其是在宫颈癌癌前病变筛查中，效果较为显著。液基薄层细胞学检查（thin-prep cytology test，TCT）是筛查宫颈癌的主要技术之一，但对于不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞等需在DNA水平上进一步分析确定[3-4]。本研究探讨TCT联合宫颈细胞DNA倍体定量分析在宫颈癌早期筛查中的应用价值，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2020年1月至2021年11月于上海市长宁区妇幼保健院接受早期宫颈癌筛查患者的病历资料。纳入标准：①无症状或存在宫颈病变临床表现；②未合并其他器官严重病变；③意识清楚；④具备完整的诊疗资料。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②合并急危重症；③无法耐受相关检查；④既往有宫颈手术史。依据纳入和排除标准，本研究共纳入100例患者，年龄25～55岁，平均（32.25±4.25）岁。本研究经医院伦理委员会审批通过，所有患者均知情同意并签署知情同意书。
1.2 检查方法
1.2.1 标本收集 按标准要求刷取并收集患者宫颈口以及宫颈管部位脱落上皮细胞，立即将其放入固定液，重复采集2次，制作细胞薄片，共2份，分别进行宫颈细胞DNA倍体定量分析和TCT。
1.2.2 宫颈细胞DNA倍体定量分析 选取制作完成的细胞薄片，应用全自动图像分析系统进行定量分析。将DNA指数＞2.50的细胞判定为病变细胞。正常受试者：细胞薄片内以正常细胞为主，未观察到病变细胞，或者疑似病变细胞及增生细胞比例＜5%；可疑受试者：观察到1～2个病变细胞，或者疑似病变细胞及增生细胞比例为5%～10%；阳性患者：观察到≥3个病变细胞，或者疑似病变细胞及增生细胞比例＞10%。正常和可疑受试者均判定为宫颈细胞DNA倍体定量分析结果阴性。
1.2.3 TCT 选取制作完成的宫颈细胞涂片并进行阅片，诊断结果包括无上皮内病变或恶性病变（negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM）、意义不明的非典型鳞状细胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS）、低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）、高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）、鳞状细胞癌以及腺癌。ASC-US及以上病变为阳性结果。
1.2.4 阴道镜活检及病理检查 所有患者均接受病理检查，结果分为阴性（正常、宫颈炎性病变、CINⅠ级）、阳性（CINⅡ级、CINⅢ级、宫颈癌）。
1.3 观察指标
对比宫颈细胞DNA倍体定量分析、TCT及病理检查结果。分析宫颈细胞DNA倍体定量分析、TCT单独及联合检查对早期宫颈癌的诊断价值。宫颈细胞DNA倍体定量分析联合TCT诊断时，两项结果均为阳性则判定为阳性。
1.4 统计学分析
采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 早期宫颈癌筛查结果
宫颈细胞DNA倍体定量分析的阳性率为30%（30/100），TCT的阳性率为32%（32/100），差异无统计学意义（P＞0.05）。
2.2 宫颈细胞DNA倍体定量分析、TCT单独及联合检查对早期宫颈癌的诊断价值
宫颈细胞DNA倍体定量分析诊断早期宫颈癌的灵敏度为75.00%（12/16），特异度为78.57%（66/84）；TCT诊断早期宫颈癌的灵敏度为56.25%（9/16），特异度为72.62%（61/84）；两种方式联合诊断早期宫颈癌的灵敏度为93.75%（15/16），特异度为88.10%（74/84）。（表1～表3）
表1 宫颈细胞DNA倍体定量分析诊断早期宫颈癌与病理结果的对照
表2 TCT诊断早期宫颈癌与病理结果的对照
表3 宫颈细胞DNA倍体定量分析联合TCT诊断早期宫颈癌与病理结果的对照
3 讨论
早期宫颈癌缺乏特异性表现，且大众缺乏准确认知，导致诊断难度较高，确诊时病情发展迅速，错过了最佳治疗时机[5-6]。以往宫颈癌早期筛查多数选择宫颈液基细胞学检查，此技术可在基层开展，对宫颈癌进行大规模防控筛查。但长时间应用后发现，宫颈液基细胞学检查中细胞丢失的可能性较高，且制片技术要求严格，因此其灵敏度并不理想[7-8]。宫颈细胞DNA倍体定量分析逐渐应用于宫颈癌的筛查，且效果较为理想，此种检查方式是通过对细胞核内的DNA含量或染色体倍数进行检测，评估细胞的整体生长状态。细胞在增殖、生长的过程中均会出现DNA含量及结构的变化，因此可通过适合的技术评估细胞变化，若是出现DNA含量异常，则可明确机体组织出现病变[9]。因此，对细胞核内的DNA含量进行检测有助于了解机体代谢状态，并将其作为判定肿瘤的指标。目前宫颈癌早期筛查中，部分患者接受单一DNA含量分析，然而其效果并不显著，需要联合液基细胞学检查，两种筛查方式优势互补，必要时还需进行阴道镜检查，最终获得更加准确的结果，为患者后续诊疗提供依据[3,10]。
TCT是通过液基薄层细胞检测系统对采集处理后的宫颈细胞进行诊断、分类，从而掌握患者病情的一种检查方式，其有效提高了宫颈异常细胞的检出率。TCT的操作较为简单，不会造成较大创伤，相比于传统检查方式，无论是标本采集接受度，还是基层大面积筛查工作，均具备一定优势，但也存在一定的不足，包括细胞易丢失、标本制片难度高以及工作量大等[11]。研究发现，TCT诊断高级别宫颈病变的灵敏度较低，细胞学检查基于细胞形态学，其结果受临床医师经验水平的影响，缺乏客观判断标准，存在较大的误诊可能性[12]。宫颈细胞DNA倍体定量分析需要通过计算机辅助进行自动化阅片，操作更加简便、速度，也可避免TCT检查的大量鉴别工作，在宫颈癌早期筛查中具有较高的应用价值。研究指出，正常状态下人体细胞为二倍体，其细胞核内DNA倍体含量较为稳定，而病变组织增殖和生长后会导致细胞核内DNA含量明显增加，因此对机体细胞核内DNA含量进行检测，可以对细胞性质进行辨别，并确定是否有恶性增殖出现[13-14]。有学者认为，在宫颈癌发展过程中，病变组织DNA含量增加，异常染色体出现时间早于TCT细胞形态学的变化时间，但应用单一检查在宫颈癌的早期诊断中价值有限[15]。本研究结果显示，宫颈细胞DNA倍体定量分析的阳性率为30%，TCT的阳性率为32%。宫颈细胞DNA倍体定量分析诊断早期宫颈癌的灵敏度为75.00%，特异度为78.57%；TCT诊断早期宫颈癌的灵敏度为56.25%，特异度为72.62%；两种方式联合诊断早期宫颈癌的灵敏度为93.75%，特异度为88.10%。表明宫颈细胞DNA倍体定量分析及TCT联合可发挥互补作用，有效提高早期宫颈癌的检出率。相对于传统检测，TCT在取材、制作方面均具有一定改进，从而加强了宫颈癌、癌前病变的诊断准确率，但受不同阅片医师的专业和经验等因素影响，导致TCT结果可重复性较低，且存在假阳性的可能[16]。细胞DNA倍体定量分析系统可弥补TCT检查的不足，两者联合筛查早期宫颈癌具有较高的应用价值。关于早期宫颈癌的筛查，细胞DNA倍体定量分析的准确度高于TCT检查，这是因为细胞核DNA含量能够反映肿瘤细胞的增殖能力，可通过检测细胞核DNA含量对宫颈癌进行早期筛查[17-18]。
综上所述，宫颈细胞DNA倍体定量分析联合TCT诊断宫颈癌具有较高的灵敏度和特异度，可为宫颈癌的诊疗提供依据。
