硬尖神香草与宽唇神香草挥发油的GC-MS分析

贾春燕，帕尔哈提·艾别提，孙佳楠，马若婷，张海英,

（1. 新疆医科大学附属中医医院，新疆 乌鲁木齐 830000；2. 塔城市自然资源局，新疆 塔城 834700；3. 新疆医科大学 第四临床医学院，新疆 乌鲁木齐 830000；4. 新疆中药炮制研究重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830000）

神香草全球约15种，分布于亚洲中部、西亚至南欧及北非，最早作为一种香料植物，添加于食物中或制成精油，在欧洲广泛使用[1]。中国有硬尖神香草 （Hyssopus cuspidatusBoriss.）和宽唇神香草（Hyssopus latilabiatusC. Y. Wu et H. W. Li）两个种，《中国植物志》[2]、《中华本草-维吾尔药卷》[3]、《维吾尔药志》[4]、中华人民共和国卫生部药品标准（维吾尔药分册）等收载的均为硬尖神香草。在印度、伊朗和中国新疆地区，神香草为民间传统医学习用药材，其中硬尖神香草全草入药，维吾尔名为“祖帕奇尼”，功能主治为化痰、止咳、祛风寒、杀菌[4]。现代药理研究表明，神香草提取物具有祛痰、止咳、平喘、解痉、抑制血糖升高、抗衰老、抑菌、抗血小板等作用[5-8]。本课题前期研究发现新疆仅在阿勒泰、塔城地区有野生神香草，且宽唇神香草蕴藏量比硬尖神香草更大。硬尖神香草主要生长在砾石质山坡上和岩石缝中，宽唇神香草生长于荒芜土地、平原及河滩地上。对比生长环境和繁殖条件，可知宽唇神香草生长地域广泛，易于大量人工培育及采集。目前文献中可查到有关神香草的报道，均以硬尖神香草为主，宽唇神香草的化学成分、药理作用均不清楚。本实验通过挥发油的气相色谱-质谱（GC-MS）分析，进行硬尖神香草与宽唇神香草的比较研究，为宽唇神香草药用价值的研究提供实验依据。

1 仪器及试药

1.1 仪器

安捷伦5977A MSD-7890B气质联用仪（美国安捷伦公司）。

1.2 试药

硬尖神香草（采自布尔津县），宽唇神香草（采自吉木乃县），经新疆医科大学附属中医医院李永和主任中药师鉴定为正品。乙醚，正己烷，氯化钠，无水硫酸钠均为分析纯；高纯氦气（纯度：99.999 %）。

2 方法与结果

2.1 GC与MS条件

2.1.1 GC条件 色谱柱为PE-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）毛细管柱；程序升温：50 ℃，保持3 min，3 ℃/min升至200 ℃，5 ℃/min升至280 ℃，保持30 min； 进样口温度：290 ℃；进样量：1.0 μl；进样方式：分流进样，分流比为5:1；载气：氦气，载气流速为1.0 ml/min；

2.1.2 MS条件 离子源温度为230 ℃；传输线温度：200 ℃；扫描范围：35～600 amu；功率：70 ev；电离方式：电轰击电离（EI）；光电倍增：270 V。

2.2 样品处理

取硬尖神香草与宽唇神香草的全草100 g，加水1000 ml浸泡0.5 h，水蒸气蒸馏6 h，收集蒸馏液，用氯化钠饱和，乙醚萃取，乙醚层用无水硫酸钠干燥，低温回收乙醚，得到具有芳香气味的棕黄色挥发油，密封保存，挥发油得率0.6 %。

2.3 样品测定

准确称取神香草挥发油样品0.20 g，用混合溶剂[甲醇-二氯甲烷（1:4）]溶解并定容至10 ml，0.45 μm滤膜过滤，按2.1项下GC与MS条件进样检测。图1为硬尖神香草挥发油总离子流色谱图，图2为宽唇神香草挥发油总离子流色谱图，根据总离子流色谱图，经检索Wiley质谱数据库并结合质谱裂解规律进行解析，结果硬尖神香草挥发油鉴定出48种化合成分（见表1），其中含量较高的是松香芹酮（26.73 %）、β-蒎烯（22.13 %）、反式-3-蒎烷酮（21.15 %）；宽唇神香草挥发油鉴定出45种化学成分（见表2），其中含量较高的是D-柠檬烯（29.14 %）、里哪醇（18.04 %）、3-甲基-4-亚甲基双环[3.2.1]辛-2-烯（20.54 %）。

图1 硬尖神香草挥发油总离子流色谱图

图2 宽唇神香草挥发油总离子流色谱图

表1 硬尖神香草挥发油各化学成分含量

表2 宽唇神香草挥发油各化学成分含量

2.4 方法学考察

2.4.1 精密度 按2.2项下方法处理硬尖神香草与宽唇神香草样品，并按2.1项下条件进行分析，1 d内重复测定6次。分别选取其中的12个含量相对较高的化合物的峰面积计算日内精密度。经计算，所有分析物的日内精密度RSD在 0.43 %～3.2 % 之间，符合测定要求。

2.4.2 重复性 按2.2项下方法分别平行处理6份硬尖神香草与宽唇神香草样品，并按2.1项下条件进样分析，测定其中12个含量相对较高的化合物的峰面积，计算RSD在0.30 %～3.9 %之间，说明该方法重复性良好。

2.4.3 稳定性 按2.2项下方法处理硬尖神香草与宽唇神香草样品，并按2.1项下条件分别于0，6，12，18，24 h进样，测定并记录12个含量相对较高的化合物的峰面积，计算RSD在1.65 %～3.47 %之间，说明硬尖神香草与宽唇神香草的挥发油成分在24 h内稳定。

3 讨论

GC-MS联用技术在中药挥发油成分的研究中应用广泛，《中华人民共和国药典》（2020年版）收载多种药材挥发油GC-MS分析方法，经文献检索，尚未发现有关宽唇神香草挥发油成分的报道。本实验用GC-MS法对硬尖神香草、宽唇神香草挥发油成分进行研究，对神香草化学成分的系统研究具有一定意义。

对比硬尖神香草与宽唇神香草挥发油成分GC-MS分析结果，发现其主要化学成分差别较大，硬尖神香草挥发油主要成分是β-蒎烯、松香芹酮、反式-3-蒎烷酮；宽唇神香草挥发油主要成分是D-柠檬烯、里哪醇、3-甲基-4-亚甲基双环[3. 2. 1]辛-2-烯。

硬尖神香草挥发油和宽唇神香草挥发油有17种成分是相同的：3-侧柏烯、β-蒎烯、2, 3-去氢-1,8-桉叶素、β-月桂烯、D-柠檬烯、反式-β-罗勒烯、β-罗勒烯、γ-萜品烯、里哪醇、1-松香芹醇、松香芹酮、4-萜烯醇、桃金娘烯醇、D-香芹酮、喇叭茶醇、匙桉醇、喇叭茶脑，但各成分含量均不相同，其中β-蒎烯、松香芹酮在硬尖神香草含量较高，D-柠檬烯、里哪醇在宽唇神香草中含量较高，其余成分含量基本相近。

硬尖神香草挥发油成分文献报道较多，帕丽达·阿不力孜[9]检测到硬尖神香挥发油的主要成分是D-大叶香根烯、B-大叶香根烯、反式-石竹烯、斯巴醇；符继红等[10]检测到硬尖神香草挥发油的主要成分是γ-榄香烯、α-蒎烯；刘力等[11]检测欧神香草挥发油化学成分主要为β-蒎烯、异松茨酮、松茨酮；对比文献和本研究中硬尖神香草挥发油化学成分，相同成分较少，出现差异的原因可能是神香草药材的采集地方不同、生长环境不同等，还需做进一步的研究。

神香草水提取物和神香草挥发油除了对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用外，还可抑制大肠杆菌和白色念珠菌的增殖，神香草挥发油比水提物的抗菌效果更为显著[12]。此外，神香草挥发油还可抑制化脓链球菌和埃希菌活性[13]。神香草挥发油具有显著的抗炎、止咳、祛痰和镇痛作用[14-15]，可舒张离体血管平滑肌，且作用为非内皮依赖性[16]。神香草挥发油中的活性成分包括里哪醇、α-蒎烯和γ-榄香烯等。

综上，硬尖神香草、宽唇神香草挥发油成分差别较大，宽唇神香草挥发油含量高，化学成分种类丰富，含抗菌、抗炎、抗氧化、解痉成分，但具体药用价值如何，还需进一步深入研究。