卢氏县猪伪狂犬病血清学流行调查与综合防控

贾 明，肖成卢＊

（卢氏县动物卫生监督所，河南 卢氏 472200）

猪伪狂犬病（PR）是一种由伪狂犬病毒引起的猪急性流行病，临床表现为母猪繁殖障碍，仔猪发烧、腹泻和共济失调，育肥猪呼吸困难和种公猪生殖障碍。猪是猪伪狂犬病毒的天然宿主，发病猪、隐性感染猪和康复猪是重要的传染源。由于该病发病率和死亡率很高（仔猪病死率可达100%），又缺乏有效治疗药物控制，传播速度快，严重危害养猪业，被世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类动物疫病，我国列为二类动物传染病。因此，养猪场需要加强科学监测，掌握流行现状，开展该病的综合防治和净化。

为了解PRV在卢氏县养猪场分布和流行现状及野毒感染情况，研究采用PRV gE-ELISA、gB-ELISA 抗体检测方法对来自12家中小规模养猪场的483份猪血清进行了抗体血清学检测，以期为猪伪狂犬病的科学免疫、综合防控和净化提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 待检血清

来自卢氏县不同乡镇的12 家中小规模养猪场，所有猪场均进行了PRVgE 缺失疫苗免疫，每头猪前腔静脉采血5 ml，静置30 min后，3 000 r/min离心10 min收集血清，放入EP管中，-20℃保存备检，共483份。

1.2 试验试剂

猪伪狂犬病病毒gE 蛋白、gB 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒，购自武汉科前生物制品有限公司。

1.3 检测方法

按照说明书操作：用样品稀释液按1∶40稀释待检血清、阳性血清和阴性血清，各取100 μl加入抗原包被板，振匀，37℃孵育45 min；弃去抗原包被孔中的液体，每孔加入洗涤液200 μl，静置5 min后去掉洗涤液，吸水纸上拍干，反复5次；每孔加100μl酶标记物，37℃下孵育30 min，然后用洗涤液洗涤5次；每孔先加1滴底物液A，再加1滴底物液B，混匀，室温18～20℃下，避光显色15min；每孔加1 滴终止液，混匀，10 min内测定在酶标仪上测各孔OD630 nm值。当阴性对照孔平均OD630 nm 值与阳性对照平均OD630 nm 值之差≥0.3 时，判断试验成立。S=样品孔OD630 nm值，N=阴性对照孔平均OD630 nm值。若S/N比值＞0.4，样品判为PRV抗体阴性；若S/N比值≤0.4但＞0.35，样品判为可疑，该样品重测，如结果再次相同，判为PRV抗体阳性；若S/N比值≤0.35，样品PRV抗体阳性。

2 结果

2.1 不同乡镇PRV血清学检测结果

见表1。对卢氏县8个乡镇的483份猪血清进行PRV gE、gB抗体监测结果发现，gE 抗体阳性率为13.46%，gB抗体阳性率为93.55%。潘河乡的PRVgE 抗体阳性率最高，为18.64%，五里川镇最低，为10.34%。官道口镇的gB 抗体阳性率最高，为95.52%，杜关镇的最低，为90.00%。

表1 不同乡镇PRV血清学检测结果

2.2 不同生长阶段猪的PRV血清学检测结果

见表2。此次试验从生猪不同生长阶段抽取血清进行PRV gE和gB抗体检测，结果显示，在483份血清中，gE抗体阳性率介于5.88%～15.38%，平均为10.56%；gB抗体阳性率介于82.35%～94.56%，平均为92.33%。

表2 不同生长阶段猪的PRV血清学检测结果

3 讨论

目前，PR 的预防和控制主要依靠疫苗免疫。由于猪伪狂犬基因缺失疫苗具有免疫抗体持续作用时间长、效价保持较高水平、起效较快和生物安全性强等优势，被广泛应用于养猪场。采用PRV gE 基因抗体检测试剂盒能够准确检测PRV 野毒抗体，将疫苗免疫株与野毒感染株进行区分，从而可以判断猪群PRV野毒感染情况。

试验中，从卢氏县8 个不同乡镇PRV 抗体检测结果看，各乡镇均有猪群gE 抗体阳性率出现，介于10.34%～18.64，相差不大，表明养猪场在使用了基因缺失苗免疫后，起到了明显效果。各乡镇检测结果不同，分析原因与免疫程序、猪机体状况和养殖管理等因素有关。尽管抽检猪场均进行了gE 基因缺失苗免疫注射，但是检测结果显示，PR在各乡镇均有感染流行。因此，虽然疫苗接种起到有效防控该病发生的作用，但是不能根本排除感染潜在风险，因为带毒猪可以持续排毒，严重危险健康猪群，应引起重视，加强监测和防控。

对不同生长阶段猪的PRV血清学检测，种公猪、种母猪、仔猪、育肥猪和后备母猪的gB抗体阳性率最低为种公猪的82.35%，均高于农业农村部规定的70%。但是所有猪场均未达到100%，表明猪场内存在感染PRV 的猪群。其原因可能与猪的个体差异、疫苗的质量以及猪群中存在猪瘟、猪繁殖和呼吸障碍综合征、猪副嗜血杆菌病等免疫抑制性疾病等因素有关。

结合监测结果，卢氏县猪伪狂犬病的净化和综合防控要做好以下几个环节。

一是合理制定免疫接种程序。仔猪在出生后3 d内采用滴鼻法或喷雾法注入基因缺失疫苗0.5头份，在30 d时采用肌注法免疫gE 基因缺失疫苗1 头份，而后在70 d 时再进行肌肉注射gE基因缺失疫苗1头份。后备母猪于配种前15 d接种基因缺失疫苗，繁殖母猪在产前20 d或在配种后75 d进行基因缺失疫苗的免疫接种。

二是严格做好种猪引种检疫，坚持自繁自养生产模式，若确需引种，引种前对猪伪狂犬病进行各项病原学检测，检测结果为阴性的种猪方可引种。

三是强化饲养管理，定期防疫检测，淘汰阳性猪，对检测结果阳性猪和发病猪，及早隔离进行治疗。同时，对其他阴性猪群采用紧急免疫接种。

四是加强养殖场内消毒灭源工作，尤其是加强养殖场内的灭鼠工作。