山东省采集脐带血及对应母血人类嗜T淋巴细胞病毒筛查情况分析

雒 猛，邵 维，李艳婷，陈富强，王 忠△，刘金玲1,，楚中华

1.山东省脐带血造血干细胞库，山东济南 250102；2.山东省齐鲁干细胞工程有限公司，山东济南 250102;3.山东省血液中心，山东济南 250014；4.山东大学齐鲁医院输血科，山东济南 250012

人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)是20世纪80年代初发现的第一个人类反转录病毒，主要包括HTLV-Ⅰ型和HTLV-Ⅱ型。HTLV-Ⅰ型在加勒比海地区、南美东北部、日本西南部及非洲的某些地区流行。HTLV-Ⅱ型在美国黑人、印第安人及欧洲等地的静脉吸毒者中流行，我国是一个HTLV低流行国家，有研究显示在福建、广东、广西和浙江等沿海地区HTLV流行率较高[1-2]。HTLV是成人T淋巴细胞白血病/淋巴瘤(ATL)的病原体，也可引起HTLV-Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性下肢轻瘫的慢性炎症性疾病[3-5]。HTLV主要通过血液传播、性传播和母婴传播[6-7]。2015年原国家卫生和计划生育委员会办公厅下发了《关于血站做好人类嗜T淋巴细胞病毒监测的通知》，目前我国对HTLV的筛查及分析研究主要关注于在采供血机构的献血者中血清抗体筛查和母婴垂直传播的母乳喂养传播情况[8-15]。针对母婴垂直传播的胎盘传播方式的报道甚少，本研究通过检测储存脐带血的产妇静脉血及有反应性母血对应的脐带血HTLV抗体，分析其结果，为HTLV的母婴传播方式积累资料。

1 材料与方法

1.1标本来源 2020年8月5日至2020年9月1日于山东省脐带血造血干细胞库采集的脐带血及对应的母血标本12 803份。

1.2仪器与试剂 全自动加样仪(瑞士，Hamilton Micro lab star)，全自动酶联免疫分析仪(瑞士，Hamilton Micro lab Fame 24/20)。HTLV抗体检测试剂盒A[酶联免疫吸附试验(ELISA)，北京万泰中联科技股份有限公司]，HTLV抗体检测试剂盒B[ELISA，艾康生物技术(杭州)有限公司]，试剂均合格且在有效期内使用。

1.3方法 所有操作均严格按照试剂盒说明书要求进行。依据说明书的要求设置临界值，当检测孔的吸光度值≥临界值时为HTLV抗体有反应性，当检测孔的吸光度值<临界值时，为HTLV抗体无反应性。采用试剂A检测母血有反应性时，采用试剂A和B同时对母血与对应的脐带血进行双孔复查，复查的4孔只要有1孔为反应性，则检测结果为有反应性。复查有反应性的母血与对应的脐带血标本送至国家卫生健康委临床检验中心使用核酸检测(NAT)法和蛋白印迹(WB)法进一步确认。

2 结 果

12 803份母血标本，经ELISA初筛5份有反应性，母血ELISA初筛有反应性率为0.039%(5/12 803)；初筛有反应性的5份母血对应的脐带血，经ELISA筛查3份有反应性，母血ELISA初筛有反应性对应脐带血筛查有反应性率为60%；经确认试验，ELISA初筛有反应性的5份母血标本，母血确认阳性1份，母血不确定1份，对应的脐带血确认阳性1份，母血ELISA初筛有反应性确认阳性率为20%；所有母血标本中，确认阳性率为0.007 8%(1/12 803)，见表1。

表1 5份HTLV抗体结果情况

3 讨 论

ELISA具有灵敏度、特异度高，准确性和重复性好，操作简单且易于自动化操作等优点，已成为国内采供血机构HTLV抗体筛查的首选方法。不同厂家的检测试剂因包被的单克隆抗体、方法学、生产工艺、质量等因素的不同，试剂间检测结果存在一定的差异[7]。本研究发现在复检2号母血标本和5号脐带血标本时，两种试剂出现有反应性和无反应性两种相反的结果。NAT和WB确认阳性率远远低于ELISA初筛阳性率[8-14]。推测原因为存在与试剂相关的假阳性或者存在一些非特异性抗原的交叉反应引起的假阳性。而产妇作为特殊的人群，其体内的激素等因素与普通的献血者存在一定的差异，产妇的血液对ELISA检测结果假阳性或假阴性的影响，有待进一步研究。

关于HTLV的感染情况，国内很多学者均有报道。近10年来福建省宁德市HTLV初筛阳性率为0.589%(61/10 352)，确认阳性率为0.338%(35/10 352)，福建省南平市HTLV初筛阳性率高达0.149%(46/30 878),确认阳性率为0.016%(5/30 878)，广东省深圳市HTLV初筛阳性率为0.198%(2/1 008)，广东省广州市HTLV初筛阳性率为0.105%(21/20 056)，广东省广州市的确认阳性率为0.015%(3/20 056)[1]。山东地区献血者HTLV ELISA初筛阳性率为0.053%(31/58 395)，NAT阳性率为0.003%(2/58 395)，WB确认阳性率为0[8]。青岛地区献血者HTLV ELISA初筛阳性率为0.027%(11/40 341)，经确认均为阴性[9]。北京地区献血人群中 HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体初筛阳性率为 0.019%(26/137 833)，确认阳性率为 0.001 5%(2/137 833)[10]。天津地区HTLV ELISA初筛阳性率为0.048%(8/16 791)，经确认全部为阴性[11]。长春地区献血者HTLV ELISA初筛阳性率为0.038%(25/65 821)，确认全部为阴性[12]。石家庄地区献血者HTLV ELISA初筛阳性率为0.061%(25/41 000)，确认阳性1份[13]。以上报道可以推测北方地区献血者HTLV ELISA初筛阳性率处于较低的水平，介于0.01%～0.07%，但这些报道均为对无偿献血者的筛查。即使在我国HTLV流行率高的福建、广东、广西等地区，关于HTLV的筛查也基本侧重于采供血机构，而对普通人群、高危人群、疾病患者、幼儿群体或产妇群体等HTLV的流行情况报道较少。本研究发现，山东省采集脐带血对应母血标本的HTLV抗体ELISA初筛有反应性率为0.039%，母血确认阳性率为0.007 8%，提示除献血人群外，孕产妇也存在HTLV感染的可能性。

HTLV-Ⅰ型通过被感染的细胞进行传播，传播途径主要包括性传播、血液传播和母婴传播[14-16]。本研究发现，5份ELISA初筛阳性的母血标本中，HTLV确认阳性的母血其对应的脐带血筛查和确认均为阳性，可以看出HTLV确实可以穿过胎盘屏障进行母婴垂直传播，携带HTLV的育龄女性，如何避免HTLV通过胎盘传给婴儿是值得探讨的问题。

HTLV-Ⅰ型通过母乳喂养的传播率为10%～25%[14]。母乳喂养传播HTLV-Ⅰ的概率受母乳喂养时间、母乳病毒的含量等因素的影响[15]。含有HTLV病毒的乳液，经巴氏消毒或冻融后，病毒含量会降低[16]。由于没有相关的疫苗，也没有预防母婴传播的抗反转录病毒的方法，因此防止母婴传播的有效策略仅为避免母乳喂养或减少母乳喂养时间(前提是能够提供安全可及的替代喂养方式)[15]。目前HTLV的筛查还未列入医院的常规检测项目，对脐带血进行HTLV抗体筛查，可以合理地指导产妇进行母乳喂养，降低HTLV通过哺乳而传给婴儿的风险，防止婴儿感染HTLV。

由于HTLV感染淋巴细胞不存在于血浆和红细胞中，血站可以对每份血液进行白细胞滤除来降低HTLV经输血传播的风险，而脐带血库储存的脐带血干细胞主要来源于白细胞，这种滤除白细胞的方式显然对脐带血库不适用，如何避免或降低脐带血HTLV感染是值得研究的课题。