LP-PLA2在初诊断2型糖尿病微血管病变患者中的水平变化及相关性研究

葛 飞，杨淑芳，刘恩琳，杨明月，李湘怡，范苇苇

（1.南通大学第五附属医院（泰州市人民医院）；2.大连医科大学研究生培养基地（泰州市人民医院），江苏 泰州 225300）

糖尿病并发症严重降低糖尿病患者的生活质量，并受到广泛关注。临床上常见的糖尿病微血管病变见于糖尿病性肾脏病，糖尿病性视网膜病变。随着糖尿病发病率的升高，医学检测技术的提高等原因，糖尿病性微血管病变的发病率也呈上升趋势，早期的糖尿病微血管病变通过积极的干预治疗可以逆转患者的病情至愈合，但晚期的糖尿病微血管病变常常面临着治疗效果差，病情进行性发展至终末期肾病，失明等结局，故临床上针对糖尿病微血管病变的诊治原则是早发现，早治疗，所以积极地探索早期糖尿病微血管病变中特异性血清标志物具有重要临床意义。脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein-associated phospholipase A2，LP-PLA2）是磷脂酶超家族中的亚型之一，又称血小板活化因子乙酰水解酶，由血管内膜中的巨噬细胞、T细胞和肥大细胞分泌。动脉粥样硬化斑块中LP-PLA2表达上调，可水解氧化脂酶，生成脂类促炎性物质，进一步激活多种炎细胞和还原-氧化敏感的炎性反应，进而导致粥样硬化斑块形成。本研究通过检测LP-PLA2在初诊断2型糖尿病性微血管病变患者中的水平变化，进一步探讨其差异表达及相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取泰州市人民医院内分泌科2020年1月至2021年1月住院或门诊初次诊断的糖尿病患者156例（糖尿病组），按照有无糖尿病性微血管病变分为非糖尿病性微血管病变组（A组），糖尿病性微血管病变组（B组），选取14例健康体检者做对照为正常组（C组）；三组间一般资料比较，年龄、性别、BMI、血压等差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：根据1999年世界卫生组织糖尿病标准诊断2型糖尿病；初次诊断糖尿病肾病及糖尿病视网膜病变患者；糖尿病肾脏病变（DKD）诊断标准：DKD的临床诊断依据至少具备以下1条：（1）可肯定高血糖与CKD的因果关系或高血糖为糖尿病肾脏病变的起因或排除了非糖尿病肾脏。（2）存在病理学诊断支持：对有肾穿刺病理检查者，例如有糖尿病特征的肾脏损害的病理学依据，糖尿病肾病诊断可确立。（3）不同时间测定2～3次尿微量白蛋白/肌酐（ACR）异常及GFR下降（临床分期参照2012年KDIGO指南）；糖尿病性视网膜病变诊断标准：免散瞳眼底镜检查提示存在微血管瘤、出血、软性渗出、硬性渗出及视网膜新生血管等。排除标准：严重的心脏、肺及肝脏疾病的，其他原发性肾脏疾病；一个月前有感染史；患有肿瘤，妊娠期患者；伴有原发性非糖尿病性肾脏疾病及视网膜病变患者；伴冠心病或严重的大血管狭窄病变患者。

1.2 方法LP-PLA2检测方法：应用双抗体夹心免疫层析法。上转发光免疫分析仪：（1）将检测卡、稀释液及待检测样本平衡至10℃～30℃。（2）拆开检测卡的铝箔袋包装，将检测卡放置在平台上。（3）在检测卡上待检测样本编号。（4）取样本100μl，加入到150μl样本稀释液中，充分混匀，取混合物100μl，加入加样孔。（5）10℃～30℃放置15分钟。（6）在仪器中输入该批检测卡参数，对仪器内置的曲线进行设置，测量完成后仪器会将浓度值自动将显示在屏幕。

1.3 统计学处理使用SPSS 20.0统计学软件进行比较和分析，计量资料用（xˉ±s）表示，三组比较用方差分析，计数资料用率（%）表示，比较用x2卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者一般资料如年龄、性别、BMI、腰围等无统计学意义（P＞0.05），三组患者实验室检查：糖尿病组和正常组相比脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）有统计学意义（P＜0.05）；三组间胱抑素C、脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）、尿ACR、HDL相比有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 Logistic回归分析结果以是否患有糖尿病微血管病变为自变量，进行Logistic回归分析，结果发现胱抑素C、脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）、病程、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与是否患有糖尿病性微血管病变相关。其中胱抑素C、脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）、病程为糖尿病微血管病变发生的危险因素，高密度脂蛋白胆固醇为保护因素。见表2。

2.3 脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）对早期糖尿病微血管病变的评估价值分析。ROC曲线分析结果显示脂蛋白相关磷脂酶A2（LP-PLA2）对早期糖尿病微血管病变的评估价值良好。见图1。

图1 ROC曲线图

3 讨论

众多国内外众多研究表明，在冠状动脉硬化，心脑血管相关疾病，糖尿病及糖尿病大血管病变的患者中均可发现LP-PLA2水平的变化，高水平LP-PLA可作为冠状动脉硬化性心脏病发生的预测因子，LP-PLA2也可作为糖尿病大血管病变的独立炎症指标[1-3]，LP-PLA2在大血管及糖尿病大血管病变中的检测作用已逐渐得到肯定，但目前对于LP-PLA2与2型糖尿病性微血管病相关的研究较少。

本研究中发现糖尿病组和正常组相比LPPLA2水平变化有统计学意义（P＜0.05），正常对照组、非糖尿病微血管病变组、糖尿病微血管病变组LP-PLA2水平依次升高，提示LP-PLA2在2型糖尿病性微血管病的发生、进展中发挥作用，随着微血管病变的加重，其血清表达显著升高。国外也有研究报道可见糖尿病视网膜病变与LPPLA2的相关研究[4]，提示糖尿病视网膜病变患者中LP-PLA2不同程度升高，使用抗LP-PLA2活性的药物可缓解视网膜黄斑病变。本课题组前期的相关研究已提示LP-PLA2水平升高与高血糖及糖尿病肾病的发生相关，LP-PLA2的检测对2型糖尿病及糖尿病肾病（DN）的病情评估有一定程度辅助价值[5]，国内张佳思等[6]研究发现血LP-PLA2水平与DN患者肾脏损害程度密切相关；比传统肾脏功能指标可以更早反映DN的出现。提示LPPLA2在2型糖尿病性微血管病中伴有重要角色，但具体机制目前仍有待研究。有研究提示动脉粥样硬化是一种全身性变化，全身不同级别的动脉、各部位的器官、组织的血管都在危险因素的影响下形成动脉粥样硬化斑块，包括视网膜动脉、肾动脉等[7,8]。徐玉善等[8]研究显示糖尿病性微血管的并发症和大血管的动脉斑块形成很有可能作用机制是相同的。LP糖尿病患者有高水平的氧化自由基，自由基激活了氧化应激系统，增加了脂蛋白的氧化，使ox-LDL增加，而LP-PLA2作为血管特异性炎性酶能对ox-LDL产生水解作用，即增加了LP-PLA2的底物，释放出多种炎性介质如溶卵磷脂、游离氧化脂肪酸等，促进动脉粥样硬化作用，进一步活化粒细胞，增加了LP-PLA2的数量和活性，加剧炎性反应，进而损伤内皮细胞[9,10]。溶血卵磷脂和氧化型非酯化脂肪酸是更强的炎症因子，诱导的黏附因子、细胞因子、白细胞介素1及肿瘤坏死因子等炎症细胞因子，调控细胞的功能，破坏内皮细胞，使其通透性增加[11,12]。

本研究中Logistic回归分析发现高密度脂蛋白对糖尿病微血管病变有保护作用。LP-PLA2与血脂密切相关。循环血中有80%的LP-PLA2和低密度脂蛋白（LDL-C）相结合，约20%则与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL）相结合。Fentoglu O[13]等研究也有类似结果，循环中LP-PLA2活性与胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平呈明显正相关，其中与低密度脂蛋白含量关联性最强，和高密度脂蛋白胆固醇水平侧呈负关联性。课题组前期的研究[14]发现LDL-C是影响血NGAL水平的独立危险因素，而血NGAL水平与糖尿病肾脏疾病的发生相关，提示脂质代谢紊乱在糖尿病微血管病变高度关联，因此，关注糖尿病微血管病变患者的血脂水平是必要的。

综上所述，血浆LP-PLA2水平与糖尿病微血管病变相关，提示LP-PLA2对糖尿病性微血管病有一定诊断价值。但LP-PLA2在2型糖尿病微血管病变中的作用机制有必要更深入的研究，明确具体关联，将可能为糖尿病性微血管病变提供预测指标及治疗新靶点。