快速紫外光谱法对阿司匹林有效成分含量的测定*

郭新颖，陈 峰，叶青华，顾 俊

（南通市疾病预防控制中心，江苏 南通 226007）

阿司匹林（Aspirin,ASP），是一种常见的解热镇痛药物。阿司匹林的有效成分是乙酰水杨酸（Acetyl salicylic acid,ASA,化学式C9H8O4），制药上最早用水杨酸（C7H6O3）与乙酸酐（C4H6O3）合成乙酰水杨酸（乙酰化的水杨酸），故而乙酰水杨酸是水杨酸的衍生物。久置于空气的阿司匹林会受潮生成刺激毒性物水杨酸（Salicylic acid,SA），不仅影响药效，还会危害健康。目前，有关阿司匹林含量的测定方法主要集中在高效液相色谱法[1-3]和液相色谱串联质谱法[4]等，以上方法虽精密度高但操作繁琐且仪器昂贵，难以在一般基层单位推广应用。因此，开发一种造价低廉、仪器简便、测定快速的针对阿司匹林片中乙酰水杨酸含量的测定方法对于基层检验机构来说极其重要。本法是利用紫外-可见分光光度法，结合一种简单样品前处理方法，实现了阿司匹林中乙酰水杨酸含量的快速定量测定。经验证，本法具有操作简便、分析快速、试剂便宜、方法稳定等特点，适用于单一及批量阿司匹林片剂中乙酰水杨酸含量的快速定量测定。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

阿司匹林标准品（JL190811001，20mg，江莱生物）；无水乙醇（AR国药集团化学试剂有限公司）；阿司匹林（100mg·片-1拜耳医药保健有限公司）。

TU-1950型紫外可见分光光度计（北京普析仪器有限公司）。

1.2 样品处理

将阿司匹林片研磨过筛，准确称取粉末0.05g于容量瓶中，用无水乙醇定容至50mL，溶解混匀后用滤纸过滤，移取4mL过滤液于容量瓶中，用无水乙醇定容至50mL（以阿司匹林含量计，相当于质量浓度80μg·mL-1），放置待测，现用现配。

1.3 标准溶液配制

准确称取0.01g阿司匹林标准品（精确到0.0001g），加入无水乙醇定容至10mL，配制成1.0mg·mL-1的标准母液。分别稀释不同倍数得到质量浓度分别为5.0，10.0，15.0，20.0，30.0，40.0，50.0，60.0，80.0，100.0μg·mL-1的标准使用液。

1.4 样品测定

采用光谱扫描法确定最佳吸收波长，固定276nm处的紫外检测波长测定标准系列溶液的吸光度，得到乙酰水杨酸的标准曲线。同样方法测定待测样品的吸光度，代入标准曲线求得样品中乙酰水杨酸的含量。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的测定

将浓度为60.0μg·mL-1的乙酰水杨酸标准溶液在紫外波长200～400nm范围内进行扫描，发现阿司匹林在选择276nm波长处有一最大吸收峰，见图1。

图1 乙酰水杨酸的紫外吸收图谱Fig.1 UV absorption spectrum of acetylsalicylic acid

由图1可知，此时溶液吸光度A值为0.418，故试验选择276nm为阿司匹林的测定波长。

2.2 样品溶剂的选择

由于乙酰水杨酸是弱酸类化合物，其水解易受溶液的酸碱性影响，且水解程度碱性大于酸性；同时考虑到乙酰水杨酸在不同溶剂中的溶解性和样品溶剂的毒性，实际测定时选用无水乙醇这一常用、中性、低毒溶剂作为样品溶剂进行试验考察。结果表明，5.0～100.0μg·mL-1范围内的一系列不同浓度的乙酰水杨酸标准溶液呈现不同的吸光度值，且线性良好，可以满足实际测试要求。故综合考虑，本试验选择无水乙醇作为样品处理和标准溶液稀释溶剂。

2.3 检测时间的选择

试验选择无水乙醇作为溶剂，考察乙酰水杨酸标准品在该溶剂中的稳定性试验。结果发现，某一固定浓度的乙酰水杨酸-无水乙醇溶液体系的吸光度在较短时间内波动不大，并未发生明显变化；过夜放置的该溶液体系在304nm处出现一弱吸收，提示阿司匹林溶液在乙醇溶液中发生一定程度的水解作用生成了水杨酸。故综合考虑，在实际样品测定时，阿司匹林溶液不宜长时间放置，以短时间4℃冷藏保存且现用现配为宜。

2.4 线性方程和线性范围

在276nm波长处测定一系列浓度范围的乙酰水杨酸标准溶液的吸光度，以浓度（x）和吸光度（y）作线性回归方程，绘制乙酰水杨酸在不同浓度时对应的标准工作曲线。结果表明，乙酰水杨酸在5.0～100.0μg·mL-1的浓度范围内呈现良好的线性关系，线性方程y=0.0076x-0.0372，r=0.9998。

2.5 精密度和回收率

为验证试验方法的精密度，按上述方法对基体样品进行了3个不同浓度加标量的精密度和回收率试验，经过6次处理和测量，计算得到不同浓度加标的相对标准偏差（RSD）。同样的方法对基体样品进行3个不同加标浓度的回收率试验，以验证方法的准确性。加标样品按照本法进行处理和测定，相对标准偏差和回收率结果见表1。

表1 精密度和回收率试验结果Tab.1 Precision and recovery test results

由表1可知，低、中、高3个加标量对应的样品回收率分别为97.15%、99.90%和98.39%，回收率范围在97.15%～99.90%之间，平均回收率为98.48%。不同加标量对应的相对标准偏差分别为4.87%、1.16%和2.71%，重复性良好。试验结果表明，本法精密度和准确度均可满足试验检测要求，结果可靠。

2.6 实际样品的测定

将某一批次的阿司匹林片按照上述前处理方法配制成质量浓度为80μg·mL-1的样品待测液。依照本法进行阿司匹林中乙酰水杨酸含量的测定（n=6），得到阿司匹林样品中乙酰水杨酸的检测浓度范围为78.84～79.50μg·mL-1，折合百分含量（%）范围为98.55%～99.38%，平均百分含量为98.86%，相当于每片片剂含有有效成分98.86mg。测定结果见表2。

表2 实际样品测定结果（n=6）Tab.2 Determination results of actual samples（n=6）

由表2可知，经计算得到此时相对标准偏差RSD为0.33%，测定结果令人满意。

3 结论

本文建立了一种紫外光谱法结合简单前处理方法对阿司匹林有效成分——乙酰水杨酸含量进行快速定量测定的分析方法。试验通过确定测试体系的最佳吸收波长，对不同溶剂试剂的选择和测定时间的影响进行分析，绘制以浓度和吸光度为横纵坐标的标准曲线，同时进行方法的精密度和回收率试验，验证了紫外分光光度法快速定量测定阿司匹林中乙酰水杨酸含量的可行性，结果可靠、令人满意。该法操作简便，试剂廉价易得，准确度高，适用于单一和批量阿司匹林中乙酰水杨酸含量的快速定量测定，提供了一种控制阿司匹林质量及快速测定其有效含量的方法。