3540 例女性泌尿生殖道标本支原体检测及耐药性分析

刘前，余玥

（西南医科大学附属中医院检验科，四川 泸州 646000）

0 引言

支原体是一群不具有细胞壁，能在无生命培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物[1]，并且具有高度多形性。与人类生殖道感染有关的是解脲脲原体（U.urealyticum）和人型支原体（M.hominis）。两者均属于机会致病微生物,并且广泛定植于育龄期女性生殖道,可通过垂直传播造成胎儿感染。解脲脲原体与人型支原体能引起男性急、慢性非淋病奈瑟菌尿道炎、前列腺炎、附睾炎，引起女性非淋病奈瑟菌尿道炎、阴道炎、盆腔炎及宫颈炎。还可引起不孕不育、早产、流产和新生儿感染[2-3]。近年来，解脲脲原体和人型支原体感染检出率升高，对抗菌药物耐药率也不断增加，已引起大家广泛关注和重视。本研究对2021 年我院全年妇产科门诊患者及住院患者生殖道标本，支原体双相培养结果及抗菌药物耐药性进行回顾性分析，为临床用药提供实验室依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源

收集我院2021 年1 月至2021 年12 月妇产科门诊患者及住院患者生殖道分泌物支原体双相培养标本共3540 例。

1.1.2 试剂采用众爱生河北生物有限公司生产的解脲支原体和人型支原体选择分离固体培养试剂盒以及培养、鉴定、药敏试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 标本采集外阴消毒后，先用窥阴器暴露阴道，用无菌棉签擦除宫颈外分泌物，再用无菌阴道拭子取宫颈口1-1.5cm 处分泌物，取样后尽快送检。

1.2.2 固体培养选择分离固体培养基放在室温下预温5-10min，将标本接种在固体选择培养基表面，并在每个组套内加一片CO2发生片，盖上密封，置36℃±1℃培养箱中，24-48 小时观察结果。

1.2.3 液体培养试剂盒复温至室温，从未接种样本的培养基中取100μL培养基液加入药敏板阴性孔。将采集的标本拭子插入培养基液体中，充分洗涤，在瓶壁上挤干拭子，各取100μL 已接种后的培养基液体加入到除阴性孔外各孔中。每孔加石蜡油1-2 滴，36℃±1℃培养24-48 小时观察结果。

1.2.4 结果判读固体培养：经培养后，在显微镜下可见棕褐色海胆样菌落，为解脲脲原体。油煎蛋样菌落，为人型支原体。液体培养：(+)孔为阳性，Uu 鉴定孔为阳性(培养24 小时，培养基由黄变红，清亮无混浊)，表示Uu 计数(ccu ≥104)有临床意义。(+)孔为阳性，Mh 鉴定孔为阳性(培养48 小时，培养基由黄变红，清亮无混浊)，表示Mh 计数(ccu ≥104)有临床意义。药敏试验：若高浓度孔阴性(-)，低浓度孔阴性(-)，表示对该药物敏感(S)；若高浓度孔阴性(-)，低浓度孔阳性(+)，表示对该药物中度敏感(I)；若高浓度孔阳性(+)，低浓度孔阳性(+)，表示对该药耐药。

1.2.5 数据分析

采用SPSS 20.0 软件分析数据，计数资料以率表示，采用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原体分布及分离率

2021 年1 月2021 年12 月，我院妇产科门诊及住院患者共送检测3540 份支原体双相培养，检测出泌尿道支原体1495 例。阳性率为42.0%。其中检测到解脲脲原体（Uu）1333 例，占89.5%（1333/1495），分离率为37.6%（1333/3540）。解脲脲原体和人型支原体混合感染115 例，占7.7%（115/1495），分离率为3.2%（115/3540）。人型支原体47 例，占3.1%（47/1495），分离率为1.3%（47/3540）。1495例支原体感染类型分布见表1。

表1 1495 例支原体感染类型分布(n,%)

2.2 支原体感染耐药性分析

从支原体药敏结果分析可以看出，单一解脲脲原体（Uu）感染, 对美满霉素、强力霉素、克拉霉素敏感性高，分别为98.1%、97.2%、95.1%。对环丙沙星、壮观霉素、诺氟沙星耐药率高，分别为92.6%、90.5%、90.1%。单一人型支原体（Mh）感染，对强力霉素、美满霉素、交沙霉素敏感性高，分别为97.9%、97.9%、87.2%。对诺氟沙星不敏感，耐药率为100%，对环丙沙星、氧氟沙星耐药率为95.7%，对罗红霉素亦有很高耐药率，为91.5%。两种支原体（Uu+Mh）混合感染，对美满霉素、强力霉素敏感率高，分别为98.3%、96.5%。同样对诺氟沙星不敏感，耐药率为100%，对其他喹诺酮类环丙沙星、氧氟沙星耐药率分别为98.3%、97.4%。对壮观霉素、罗红霉素、克拉霉素耐药率为92.2%、91.3%、90.4%。1495 例支原体感染对常见12 种抗生素敏感性试验结果见表2。

表2 1495 例支原体感染药物敏感性试验[n(%)]

3 讨论

解脲脲原体和人型支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，是引起人泌尿生殖系统感染重要病原菌之一。主要通过性接触传播和母婴传播，通常引起非淋病菌性尿道炎、男性前列腺炎或附睾炎以及女性阴道炎、盆腔炎、卵管炎、宫颈炎和肾盂肾炎等，亦可引起不孕不育、胎儿流产等[4]。解脲脲原体和人型支原体也是一类机会病原体，当免疫力正常时，可正常寄居于人体腔道的黏膜上和女性生殖道，而不引起任何症状[5]，人感染后可成无症状携带者或临床症状不明显。当机体免疫力低下或粘膜受损时可发展为致病菌[6]。所以支原体感染容易被忽略，造成病原菌的隐匿传播。因此，对有症状者或症状不明显患者应考虑生殖道支原体检测，以防漏诊。当部分患者支原体培养阳性，但并无明显感染症状，可能为正常人群携带者[7]。因此，临床医生应根据患者临床表现进行判断，并合理运用抗生素干预，避免过度治疗。近年来，支原体感染率逐年升高，加上抗生素不合理运用，治疗不规范等因素,支原体耐药情况日益严重,在临床上受到越来越多的关注。

本研究通过回顾性分析我院2020 年1 月到2020年12 月全年妇产科门诊及住院患者解脲脲原体和人型支原体检测。3540 例标本，支原体检出率为42.1%。其中解脲脲原体(Uu)在支原体中检出率为89.5%，解脲脲原体和人型支原体混合感染在支原体中检出率为7.4%，人型支原体在支原体中检出率为3.1%。与宋秀军[8]等人报道一致。解脲脲原体检出率高于解脲脲原体和人型支原体混合感染，高于人型支原体。解脲脲原体检出率较高,可能原因，是解脲脲原体能够分解尿素而产氨，其降解产物可以提高阴道内环境的PH 值，促使自身和其他病原菌的生长[9]。同时，大部分患者感染后，症状不明显或无症状。因此，解脲脲原体感染易反复，给治疗带来一定困难。

从数据分析可看出，单一解脲脲原体，对美满霉素、强力霉素、克拉霉素敏感性高（＞97%）。人型支原体，对强力霉素、美满霉素、交沙霉素敏感性高（＞97%）。解脲脲原体和人型支原体混合感染对美满霉素、强力霉素敏感率高（＞96%）。由此可见，各类型支原体感染均对美满霉素，强力霉素敏感率高。且各型之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。所以强力霉素和美满霉素可作为临床支原体感染药物经验性治疗首选药物[10]。各类型支原体感染对喹诺酮类耐药率均高（＞90%），并且人型支原体和混合感染者对诺氟沙星均不敏感，耐药率为100%，临床应避免使用喹诺酮类药物[11]。支原体对喹诺酮类药物耐药的主要机制是ParC 氨基酸序列改变[12]。此外，大环内酯类药物克拉霉素对解脲脲原体敏感性高，亦可选该药物治疗解脲脲原体引起的感染。

综上所述，2021 年全年我院妇产科门诊和住院患者生殖道支原体检测，以单一解脲脲原体（Uu）感染为主，混合感染（Uu+Mh）次之，单一人型支原体（Mh）感染较少。从药敏试验结果分析可看出，各类型支原体均对四环类药物美满霉素、强力霉素敏感率高，可作为临床经验性用药首选。喹诺酮类药物敏感率低，临床应避免使用该类药物。为了避免耐药菌的产生，临床应根据支原体培养结果及药敏试验，并结合患者临床症状，正确选择抗生素，合理规范用药，避免过度治疗。