电喷雾-离子迁移谱法快速筛查降压类中成药及保健食品中29种非法添加的化学药

薛高旭， 曹 玲， 孙 晶， 冯有龙，李佳晨， 柳雨影， 姜 玮

(1.南京中医药大学药学院，江苏南京 210023；2.江苏省食品药品监督检验研究院，江苏南京 210019；3.泰州市药品检验院，江苏泰州 225300)

高血压已成为我国目前最常见的心血管疾病之一[1]。由于担心长期服用降压类化学药不良反应较多，很多高血压患者服用降压类中成药及保健食品。而一些商家为了追求商业利益，向这些降压类中成药及保健食品中非法添加化学药，如果患者在不知情的情况下长期服用，或与其它降压药同服,可能造成血压骤然下降，并发严重的不良反应，甚至危及生命[2]。因此，有必要对降压类中成药及保健食品中非法添加的化学药进行监测。

降压类中成药及保健食品中非法添加化学药的检测方法主要有高效液相色谱法[3]、薄层色谱-显微拉曼光谱联用技术[4]、高效液相色谱-质谱联用技术[5]等。离子迁移谱(IMS)具有操作简便、分析时间短、灵敏度高等优点。目前，电喷雾-离子迁移谱(ESI-IMS)技术已应用于抗风湿[6]、改善睡眠[7]、减肥[8]、降糖[9]、止咳平喘[10]等各类中成药和保健食品中非法添加化学药的检测。本文利用ESI-IMS技术，建立了降压类中成药及保健食品中29种化学药的快速筛查方法。该方法简便、快速、灵敏度高，为行政监管提供了可靠的技术支撑。

1 实验部分

1.1 仪器及试剂

GA2100型高效离子迁移谱仪(美国，Excellims公司)；AG -1620型空气发生器(北京科普生分析科技有限公司)；XP6型电子天平(瑞士，Mettler Toledo公司)；UA22MFD超声清洗仪(德国，Wiggens公司)。

20批降压类中成药及保健食品均为市售。

1.2 实验方法

1.2.1 对照品溶液的配制称取各对照品5.0 mg，分别置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并定容，配制成各含200 μg·mL-1的对照品储备液。分别精密吸取0.1、0.5、1 mL对照品储备液于10 mL容量瓶中，用含0.5%乙酸(V/V)的80%甲醇稀释至刻度，作为正离子对照品溶液；用含0.5%氨水(V/V)的80%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为负离子对照品溶液。

1.2.2 校正溶液的配制称取色氨酸和柠檬酸各5.0 mg，分别置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并稀释至刻度，配制成各含200 μg·mL-1的校正溶液。

1.2.3 样品前处理称取样品(茶剂、片剂、颗粒剂研磨混匀后取其粉末，胶囊取内容物)约0.25 g，分别置于25 mL容量瓶中，加80%甲醇约20 mL，超声提取10 min，冷后稀释至刻度，用0.45 μm微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品储备溶液。用含0.5%乙酸的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例进行稀释，所得的溶液作为正离子供试品溶液；用含0.5%氨水的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例进行稀释，所得的溶液作为负离子供试品溶液。

1.3 离子迁移谱工作条件

电喷雾离子源：正离子模式(ESI+)源电压为2.2 kV，负离子模式(ESI-)源电压为1.8 kV；迁移管电压为8 kV，进气口温度为180 ℃，迁移管温度为180 ℃；离子栅门电压为50 V，门电压脉冲宽度为85 μs。迁移气流速为1.2 L·min-1，排出气流速为0.8 L·min-1，进样速度为1.2 μL·min-1。

2 结果与讨论

2.1 实验条件的优化

2.1.1 提取溶剂的选择实验比较了各目标物在不同比例甲醇溶液(60%、70%、80%、90%)中的响应情况。结果显示，80%甲醇溶液中各目标物质的响应较好，基线较平整，因此选择80%甲醇溶液作为提取溶剂；同时pH亦会影响目标化合物的响应，最终优化时向正离子和负离子样品溶液中分别加入了0.5%乙酸和0.5%氨水。

2.1.2 ESI-IMS检测模式的选择考察了29种对照品在正、负离子工作模式下的响应信号，发现氢氯噻嗪等7种化学药在负离子模式下有较高响应，而普萘洛尔等22种化学药适合在正离子模式下检测。

2.1.3 ESI-IMS检测条件的选择在1.6～2.6 kV范围内，考察源电压对测定结果的影响。源电压的改变通常会影响目标物的响应强度，但对迁移时间基本没有影响。正离子模式下，普萘洛尔等22种化学药源电压为2.2 kV 时的响应均较好；负离子模式下，氢氯噻嗪等7种化学药在源电压为1.8 kV时的响应较好。实验还发现，迁移管电压改变时不仅影响目标物迁移时间，同时影响响应强度。综合考虑，选择迁移管电压为8.0 kV。

2.1.4 迁移时间与约化迁移率为了消除温度、气压等外界因素的影响，采用迁移时间和约化迁移率K0对各对照品进行定性。

(1)

其中，L为迁移管的长度(cm)；td为迁移时间(s)；U为迁移管电压(V)；P为气压(inHg)；T为迁移管温度(K)。

在上述条件下，仪器校正后分别取正离子和负离子对照品溶液，注入离子迁移谱仪中进行分析，各物质IMS谱图见图1。29种目标物的迁移时间为8.3～19.2 ms，K0在0.76～1.58 cm2·V-1·s-1范围。

图1 29种对照品溶液的IMS图谱(A～C:正离子模式;D:负离子模式)Fig.1 IMS spectrograms of 29 standard solutions(A-C:Positive mode;D:Negative mode)

2.2 专属性考察

溶剂空白测定结果如图2所示，在各目标物出峰的位置均无干扰峰出现，表明方法专属性良好。

图2 溶剂空白的IMS图谱(A:正离子模式;B:负离子模式)Fig.2 IMS spectrograms of blank solvent(A:Positive mode;B:Negative mode)

2.3 基质效应与检测限考察

2.4 方法重现性的考察

3个月内，每个月随机选取5 d，对各物质的对照品溶液进行离子迁移谱分析。结果表明，29种化学药在3个月内任意5 d的迁移时间的相对标准偏差(RSD)均在0.5%以内，重现性良好。

2.5 样品的测定与谱库的建立

对市场中抽查的20批降压类中成药及保健食品进行ESI-IMS分析，在负离子模式下有2批样品检测到非法添加化学药，其中一批(胶囊2)除了溶剂峰外，在12.384 ms检测到非法添加化学药，与氢氯噻嗪迁移时间相比，相对误差为0.01%；一批(软胶囊1)除了溶剂峰外，在8.432 ms检测到非法添加化学药，与苯磺酸氨氯地平迁移时间相比，相对误差为0.03%。离子迁移谱图见图3。采用实验室已建立的液-质联用方法测定上述样品，测定结果与ESI-IMS一致。

图3 胶囊2和软胶囊1的IMS图谱(A:胶囊2;B:软胶囊1)Fig.3 IMS spectrograms of capsule 2 and soft capsule 1(A:capsule 2;B:soft capsule 1)

3 结论

本文建立了降压类中成药及保健食品中29种非法添加化学药的ESI-IMS检测方法，该方法简单快速、灵敏度高，与化学试剂盒快筛结果相比，测定更具通用性，结果更具稳定性。利用所建立的方法对20批市售样品进行筛查，其中一批检出氨氯地平，1批检出氢氯噻嗪。因此，ESI-IMS可用于现场的快速筛查，可大大降低检测成本，提高筛查效率，为进一步规范市场环境提供技术保障。