生殖道支原体感染与男性不育患者精液质量的关联性分析

董思启 僧雪雁 刘 洋 樊青珂 吕 璇

（郑州市妇幼保健院生殖遗传科，河南 郑州，450000）

男性不育发病机制复杂，临床尚未对致病原因做出全面阐述，但男性不育普遍受吸烟、遗传、感染等因素影响，其中生殖道支原体感染为男性不育主要发病因素之一。不育不仅会为男女双方带来极大的社会和心理压力，并会影响男女双方感情，甚至导致家庭破裂。生殖道支原体感染会在病原菌侵袭影响下，累及睾丸、附睾等器官，诱发附睾内精子成熟异常，增加精子畸形率，并易诱发生精障碍，导致不育。如何有效予以干预措施，在临床引起较高关注，深入探讨生殖道支原体感染对男性不育的影响，利于指导临床诊疗。本研究回顾性分析郑州市妇幼保健院收治的284 例生殖道支原体感染男性不育患者和同期284 例无生殖道支原体感染男性不育患者、同期284 例健康体检男性的临床资料信息，探讨生殖道支原体感染和男性不育精液质量的关联性，旨在为临床干预提供科学依据。详情如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2019 年4 月～2020 年12 月郑州市妇幼保健院收治的568 例男性不育患者临床资料信息，按照是否发生生殖道支原体感染分为感染组与未感染组，每组284例，并将同期在郑州市妇幼保健院进行健康体检的284 例男性组成健康对照组。感染组患者年龄23～37 岁，平均年龄（28.64±2.31）岁；不育时间2～4 年，平均不育时间（3.01±0.23）年。未感染组患者年龄22～38 岁，平均年龄（29.01±2.45）岁；不育时间2～5 年，平均不育时间（3.05±0.26）年。健康对照组患者年龄21～39 岁，平均年龄（27.91±2.16）岁。三组研究对象一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经郑州市妇幼保健院医学伦理委员会审批通过，所有研究对象均知情并签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①感染组和未感染组不育男性患者均符合《男性不育症中西医结合诊疗指南（试行版）》中男性不育诊断标准，感染组患者均符合《生殖道支原体感染诊治专家共识》中生殖道支原体感染诊断标准；②感染组和未感染组患者均正常性生活1 年、无避孕措施且不育；③女方妇科检查、排卵检测等正常；④近6 个月内未应用过治疗不育的相关药物；无生殖毒性物质接触史；⑤无家族遗传史；⑥感染组患者均经病原学检查确诊为生殖道支原体感染；⑦健康体检者无生殖道支原体感染或不育疾病。

排除标准：①存在无精子症者；②合并其他生殖道疾病或其他感染者；③其他慢性疾病所致不育者；④先天性腺发育不良者；⑤存在附睾结核者；⑥输精管异常者；⑦病历资料缺失者。

1.3 方法

1.3.1 标本采集

采集精液标本前，禁欲3～7 d，嘱患者排尿，后清洗阴茎，常规消毒清洁处理，以手淫法采集精液，将精液置于干燥无菌杯，37 ℃恒温保存，在完全液化后进行检测。

1.3.2 支原体培养

使用支原体培养试剂盒（生产企业：珠海迪尔生物功能有限公司），将100 μL 精液标本接种于无菌培养基中，将培养基放置在CO培养箱中，37 ℃恒温环境下培养24 ～36 h，培养基无变色即判定为阴性，培养基变红色即判定为阳性。

1.3.3 精液质量检查

对比感染组和未感染组液化时间、精液量、精子存活率、精子畸形率。将精液置于37 ℃温水内，观察液化时间，采用伊红-Y 染色法，将伊红溶液和精液进行混合，混合充分后置于载玻片中，存活精子无变色，死亡精子染色呈红色状态，以此判定精子存活率；并常规测定精液量、精子畸形率、精子形态正常率。

1.3.4 精子运动参数测定

对比感染组和未感染组前向运动率、VCL、VAP、VSL。使用计算机辅助精子分析系统，严格按照仪器操作步骤，检测前向运动率、曲线速度（VCL）、平均路径（VAP）、直线速度（VSL）精子运动情况。

1.3.5 耐药性检测

使用支原体分离培养药敏试剂盒（生产企业：珠海迪尔生物功能有限公司）进行药敏试验，统计支原体对常见抗菌药物耐药性。

1.4 观察指标

①比较感染组、未感染组和健康对照组精液质量指标，包括液化时间、精液量、精子存活率、精子畸形率、精子形态正常率；②比较感染组、未感染组和健康对照组精子运动参数指标，包括前向运动率、VCL、VAP、VSL；③相关性分析，分析液化时间、精液量、精子存活率、精子畸形率、精子形态正常率、前向运动率、VCL、VAP、VSL 和生殖道支原体感染的相关性；④分析支原体对临床常用抗菌药物的耐药性。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 三组患者精液质量比较

感染组、未感染组、健康对照组精液质量指标比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）；感染组和未感染组液化时间较健康对照组长，精液量较健康对照组少，精子存活率、精子形态正常率较健康对照组低，精子畸形率较健康对照组高，差异具有统计学意义（P＜0.05），且感染组各精液质量指标劣于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 三组患者精子运动参数比较

感染组、未感染组、健康对照组精子运动参数指标比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。感染组和未感染组前向运动率、VCL、VAP、VSL 参数较健康对照组低，差异具有统计学意义（P＜0.05），且感染组前向运动率、VCL、VAP、VSL 参数较未感染组低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 相关性分析

Pearson 分析结果显示，液化时间、精子畸形率和生殖道支原体感染呈正相关，精液量、精子存活率、精子形态正常率、前向运动率、VCL、VAP、VSL 和生殖道支原体感染呈负相关，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.4 耐药性分析

支原体对环丙沙星耐药率高达94.72%，对交沙霉素、强力霉素耐药率均为0.00%。见表4。

3 讨论

据相关数据统计，我国不育症夫妇患病率为13%～16%，男性不育在全部不育中占比40%～50%，生殖道支原体感染在男性不育发病原因中占比5%～42%，并逐年增长。明确生殖道支原体感染和男性不育患者精液质量的关联性，利于针对性进行治疗，改善不育症状，提高预后效果。

支原体属于介于病毒、细菌二者之间无细胞壁原核微生物，主要在生殖道中寄生，会诱发生殖道炎症，生殖道支原体感染会产生精子抗体，且支原体原生质膜也会对精子产生损害，影响精子健康发育，诱发男性不育。本研究结果显示，感染组液化时间较对照组长，差异有统计学意义（P＜0.05），与谢辉霞等研究结果一致。且研究数据显示，感染组和未感染组精液量较健康对照组少，精子存活率、精子形态正常率、前向运动率、VCL、VAP、VSL 参数较健康对照组低，精子畸形率较健康对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05），且感染组各精液质量指标、精子运动参数指标劣于未感染组，差异有统计学意义（P＜0.05）。进一步证实生殖道支原体感染是男性不育患者精液质量和精子运动情况的影响因素。分析原因在于，支原体感染后会黏附于生精细胞上，使生精细胞脱落，诱导其凋亡，干扰精子成熟；且生殖道支原体感染后精子头尾部位会存在颗粒物质吸附，且物质大小存在差异，会诱发结构异常、排列紊乱等情况，增加精子畸形率，降低精液质量。同时，生殖道支原体感染后，支原体会融入精子细胞，抑制精子活力，破坏精子细胞膜结构和功能，使精子胞浆内钙离子流失，降低精子运动速度，影响精子运动能力。

经进一步研究，Pearson 分析结果显示，液化时间、精子畸形率和生殖道支原体感染呈正相关，精液量、精子存活率、精子形态正常率、前向运动率、VCL、VAP、VSL 和生殖道支原体感染呈负相关，差异有统计学意义（P＜0.05），提示合并生殖道支原体感染患者精液液化时间越长，精子畸形率越高，VSL 参数越低，精子质量和精子运动参数越差。充分证实生殖道支原体感染和男性不育患者精液质量的关联。

在男性不育患者中，支原体感染会导致精液内酸性磷酸酶含量改变，且支原体会对精子产生吸附作用，导致其卷曲畸形，影响精子活动能力；支原体感染会损害精子膜，进而影响其功能和精液质量；在感染刺激影响下，睾丸组织无法正常生成精子、并会影响精子发育，导致精液质量降低。药敏试验结果显示，支原体对环丙沙星耐药率高达94.72%，对交沙霉素、强力霉素耐药率均为0.00%。表明在治疗支原体感染男性不育患者中，可将交沙霉素、强力霉素作为首选抗菌药物。但本研究尚未探讨生殖道支原体感染时间长短对精液质量的影响，关于感染时间和精液质量之间的关联性，有待日后进行深入研究。

综上所述，生殖道支原体感染和男性不育患者精液质量、精子运动参数具有明显相关性，临床应及时进行精液检测和常规细菌培养，结合男性不育患者有无感染等情况，进行针对性干预，以及时控制感染，降低对精液质量和精子运动参数的影响。