2018~2020年江南大学附属医院血流感染病原菌分布及耐药率分析

朱岚　　申卫红　　刘敏

[摘要] 目的 探討2018～2020年江南大学附属医院细菌室血培养检出的阳性菌株的分布及其相关药敏的数据，为医院科室挑选抗微生物用药提供理论数据。方法  收集2018～2020年江南大学附属医院收治的住院患者血培养阳性菌株，采用仪器法或手工法进行药敏试验，从而得出2018～2020年血培养分离出临床病原菌的分布情况及耐药性。结果  3年间检验科微生物室共分离出血培养病原菌1816株，其中革兰阴性杆菌1058株，占58.26%，革兰阳性球菌682株，占37.56%，真菌76株，占4.18%。其中前几位主要为肺炎克雷伯菌（461株，25.38%）、凝固酶阴性葡球菌（301株，16.58%）、大肠埃希菌（335株，18.44%）、金黄色葡萄球菌（205株，11.29%）和肠球菌属（118株，6.48%）。药物敏感试验发现：革兰阴性杆菌对哌拉西林、头孢唑啉以及氨苄西林的耐药率高于其他抗菌药物;G-细菌对阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯类敏感度较高。另外，革兰阳性球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的耐药率分别为40.63%和65.32%。革兰阳性球菌对大部分青霉素相关药物、环丙沙星、四环素等抗菌药物的耐药性逐渐上升，对万古霉素、利奈唑胺均敏感。结论  2018～2020年江南大学附属医院住院患者血培养阳性细菌大部分为G-细菌，其中肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌这三种细菌的耐药率逐渐上升。因此，临床细菌室和必须定期监测阳性细菌的耐药率，从而为临床合理用药提供理论依据。

[关键词] 血培养;血流感染;耐药性;抗菌药物;病原菌

[中图分类号] R446.5          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2022）16-0120-04

Analysis on the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing blood stream infections in Affiliated Hospital of Jiangnan University from 2018 to 2020

ZHU Lan   SHEN Weihong   LIU Min

Department of Laboratory Medicine， Affiliated Hospital of Jiangnan University， Wuxi 214041， China

[Abstract] Objective  To investigate the composition and drug resistance distribution of pathogenic strains isolated from blood cultures in the clinical microbiology laboratory of the Affiliated Hospital of Jiangnan University from 2018 to 2020， so as to provide references for rational selection of anti-infective drugs in clinical practice. Methods The blood culture positive strains of inpatients in the Affiliated Hospital of Jiangnan University from January 2018 to December 2020 were collected. The antimicrobial susceptibility testing was carried out by French bioMérieux fully automated drug susceptibility instrument method or disk diffusion method （K-B method）， and the distribution and drug resistance of clinical pathogenic bacteria isolated from blood cultures from January 2018 to December 2020 were retrospectively analyzed. Results In the three years， a total of 1816 strains of pathogenic bacteria were isolated from blood cultures in the microbiology laboratory of the Department of Laboratory Medicine， including 1058 strains of gram-negative bacilli， accounting for 58.26%， 682 strains of gram-positive cocci， accounting for 37.56%， and 76 strains of fungi， accounting for 4.18%. The top pathogenic bacteria were Klebsiella pneumoniae （461 strains， 25.38%）， coagulase-negative staphylococcus （301 strains， 16.58%）， Escherichia coli （335 strains， 18.44%）， Staphylococcus aureus （205 strains， 11.29%） and Enterococcus （118 strains， 6.48%）. Drug susceptibility testing showed that the drug resistance rate of gram-negative bacilli to piperacillin， cefazolin and ampicillin was higher than that to other antibiotics. Gram-negative bacilli were highly sensitive to aminoglycosides including amikacin， polymyxin B and carbapenems. In addition， we found that for gram-positive cocci， the drug resistance rates of methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） and methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci （MRCNS） in clinic were 40.63% and 65.32% respectively. The resistance rate of gram-positive cocci to most penicillins， ciprofloxacin， tetracycline and other related drugs showed an upward trend， and no gram-positive cocci resistant to vancomycin and linezolid were found. Conclusion From January 2018 to December 2020， the pathogens causing blood stream infections in inpatients in the Affiliated Hospital of Jiangnan University were mainly gram-negative bacilli， and the drug resistance rates of Klebsiella pneumoniae， Escherichia coli and Acinetobacter baumannii showed an upward trend year by year. Therefore， the microbiology laboratory and the infection department in the hospital shall regularly monitor the drug resistance of various pathogenic bacteria for clinical rational drug use.

[Key words] Blood culture; Blood stream infection; Drug resistance; Antibiotics; Pathogenic bacteria

近年来，临床上不同部位多次血培养阳性，诊断为血液感染的病例不断增加。它由不同致病细菌侵入人体血液而导致的疾病，血流感染病死率高，给人们的生活带来严重的危害。因而，临床上如何减少血液感染的发生，给医务工作者带来很大的挑战。各家医院由于许多抗感染药物的广泛使用，使得越来越多的病原微生物耐药性逐年上升，给临床用药带来极大的挑战。各种超级耐药的细菌层出不穷，使患者的生命健康得到很大威胁[1，2]。江南大学附属医院临床细菌室重点通过血培养检查，即时开展血流感染致病菌的监测，从而大致明确各种致病菌的种类以及对抗生素的耐药性等，给临床医生在用药方面提供理论数据，减少各种“超级细菌”的出现，增加用药的准确性及有效性。通过与医院感染科共同协作，临床微生物室通过血培养常规监测，从而为降低血流感染的发病率提供实验数据，减少医院感染的发生率，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

采集2018～2020年江南大学附属医院各科室送检的血培养样本，包括需氧和厌氧血培养，并从其中筛选出致病菌菌株。按临床微生物实验室血培养操作规范[1]中列出的菌株诊断标准，所得菌株为病原菌。3年间微生物室共分离出血培养病原菌1816株，其中革兰阴性杆菌1058株（58.26%），革兰阳性球菌682株（37.56%），真菌76株（4.18%）。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定及药物敏感度试验  采用法国生物梅里埃公司生产的全自动质谱分析仪鉴定分离出的病原菌，药物敏感试验采用机器法或手工药敏法进行测定。操作步骤见仪器厂家操作说明以及《全国临床检验操作规程第3版》[3]补充操作。相关质控菌株分别为：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌以及大肠埃希菌，以上菌株均来自国家卫生健康委员会下发的室间比对菌株。药敏试验的判读与解释参照2017年美国临床和实验室标准化协会（American Society for clinical and laboratory standardization，CLSI）推荐的标准及方法进行操作[4]。

1.2.2 病原菌种分布  收集2018～2020年江南大学附属医院各病区送检的血培养标本，共分离出病原菌1816株，分析其分布。

1.2.3 分析血培养分离的革兰阴性杆菌对部分药物的耐药率  通过对梅里埃VITEK 2 Compact仪器法及纸片扩散法（K-B）的药敏结果进行统计，分析常见革兰阴性杆菌对部分药物的敏感度。

1.2.4 分析血培养分离的革兰阳性球菌对部分药物的耐药率  通过对通过法国生物梅里埃公司生产的手工真菌药敏试剂盒结果梅里埃VITEK 2 Compact仪器法及纸片扩散法（K-B）的药敏结果进行统计，分析G+球菌对药物的耐药性。

1.2.5 分析血培养分离的常见真菌对部分药物的耐药率  通过对通过法国生物梅里埃公司生产的手工真菌药敏试剂盒结果进行统计，分析常见真菌对部分药物的敏感度。

1.3 统计学方法

使用WHONET 5.6研究血流感染病原菌对相关药物的敏感度，导出数据从而得出相关的数据进行耐药性分析，指导临床合理用药。

2 结果

2.1 病原菌种分布

统计2018～2020年本院各科室送来的血培养样本，阳性致病菌株共1816株，其中G-杆菌共1058例，占58.26%，G+球菌共682例，占37.56%，真菌76株，占4.18%。见表1。

2.2 血培养分离的革兰阴性杆菌对部分药物的耐药率

通过梅里埃VITEK 2 Compact仪器法及纸片扩散法（K-B）的药敏结果显示，分离出的常见革兰阴性杆菌对一代头孢类药物如头孢唑啉以及替卡西林的药物敏感度仅10.0%左右，而临床分离的铜绿假单胞菌对大部分青霉素的药物的敏感度也仅有10.0%左右，因而要引起临床医生格外重視;非发酵革兰阴性杆菌对氨基糖苷类药物如阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯类敏感度较高;而对对亚胺培南、头孢替坦、头孢他啶及氨苄西林/舒巴坦的敏感度是逐年下降的，也属于院内感染的重要致病菌。见表2。

2.3 血培养分离的常见革兰阳性球菌对部分药物的耐药率

通过梅里埃VITEK 2 Compact机器法及纸片扩散法（K-B）的药敏结果表明：革兰阳性球菌中MRSA的耐药率为40.63%。各种葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺敏感度均为100%;革兰阳性球菌对克林霉素以及红霉素的敏感度<34%;凝固酶阴性葡萄球菌对四环素、氨基糖苷类以及氟奎诺酮类药物的敏感度高于金黄色葡萄球菌。见表3～4。

2.4 常见真菌对部分药物的耐药率

2018 ～2020年微生物室血培养标本鉴定出的真菌主要为白色念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌，通过法国生物梅里埃公司生产的手工真菌药敏试剂盒结果显示，主要对伊曲康唑、5-氟胞嘧啶、两性霉素B的耐药率较低，耐药率<4.4%;对氟康唑等药物的耐药率较高，耐药率>28%。见表5。

3 讨论

临床血流所引起的感染，相关临床症状为：骤发寒战、高热、皮疹、肝脾肿大等常见临床表现。血流感染病死率高，给人们的生活带来严重的危害，需要引起临床医务工作者的重视[5]。本研究统计2018～2020年江南大学附属医院各科室送来的血培养样本，阳性致病菌株共1816株，其中G-杆菌共1058例，占58.26%，G+球菌共682例，占37.56%，真菌76株，占4.18%。数据与同一时段中国耐药监测网的血培养数据大致相当[6，7]。

本研究结果显示，常见革兰阴性杆菌对一代头孢类药物如头孢唑啉以及替卡西林的药物敏感度仅有10.0%左右，而临床分离的铜绿假单胞菌对大部分青霉素的药物的敏感度也仅有10.0%左右，这要引起临床医生格外重视;非发酵革兰阴性杆菌普遍对多黏菌素B、氨基糖苷类药物如阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯类敏感度较高;但临床发现鲍曼不动杆菌对亚胺培南、头孢他啶、及氨苄西林/舒巴坦的敏感度也是逐渐下降的;但对多黏菌素B以及米诺环素则是非常敏感的，因此临床在治疗由肠杆科细胞感染的疾病里，必须选合适的药物进行治疗，从而提高药物敏感度[8～10]。非发酵菌如鲍曼不动杆菌只能选择如替加环素、多黏菌素B等昂贵且副作用很大的药物，这对患者的负担非常重[9～12]。

另外，这三年间的药敏结果分析显示，葡萄球菌对万古霉素和利奈唑胺的敏感度均为100%，而对苯唑西林以及青霉素等耐药率>73%，临床应避免使用这些药物;金黄色葡萄球菌对四环素、左氧氟沙星以及庆大霉素的敏感度越来越低，这需引起临床重视。未检测出对利奈唑胺、万古霉素耐药的肠球菌[13～16]。

综上所述，通过对2018～2020年江南大学附属医院各病区送检的血培养标本的研究发现，许多病原菌对各种药物的耐药率呈不高程度的上升，这给临床医生合理用药带来很大挑战，必须综合分析药敏报告，结合病史进行联合用药，从而达到减少细菌耐药的目的。

[参考文献]

[1]   临床微生物实验室血培养操作规范 临床微生物实验室血培养操作规范[S].中华人民共和国卫生行业标准WS/T 503-2017，2017.

[2]   Ursula T，Kevin O，Aleks E，et al. The global preclinical antibacterial pipeline[J].Nat Rev Microbiol，2020，18（5）：275-285.

[3]   叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：744-745.

[4]   Clinical and Laboratory Standards Institute （CLSI）. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].2020：M100.

[5]   陳云波，嵇金如，应超群，等.2014至2015年全国血流感染细菌耐药监测报告[J].中华临床感染病杂志，2019， 12（1）：24.

[6]   胡付品，郭燕，朱德妹，等.2016年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2017，17（5）：481-491.

[7]   胡付品，郭燕，朱德妹，等.2017年CHINET中国细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2018，18（3）：241-251.

[8]   Seok HN，Dong CM，Hee YK，et al. Molecular characteristics of extended-spectrum β-lactamase/AmpC-producing Salmonella enterica serovar Virchow isolated from food-producing animals during 2010—2017 in South Korea[J].Int J Food Microbiol，2020，24（2）：322.

[9]   Zhang JM，Liu J，Wang K，et al. Observations of bacterial biofilmon ureteral stent andstudies on the distribution of pathogenic bacteria and drug resistance[J].Urol Int，2018， 13：1-7.

[10]  Lee CR，Lee JH，Park M，et al. Biology of Acinetobacter baumannii： Pathogenesis，antibiotic resistance mechanisms，and prospective treatment options[J].Front Cell Infect Microbiol，2017，7：55.

[11]  廖平明.金黄色葡萄球菌分布及耐药性分析[J].检验医学与临床，2017，14（A01）：65-67.

[12]  徐慧，徐岷，刘彩林，等.2014—2019年郑州大学第一附属医院血培养分离病原菌临床布及耐药性分析[J].现代检验医学杂志，2021，36（1）：136-140.

[13]  Kang CM，Chen XJ，Chih CC，et al. Rapid identification of bloodstream bacterial and fungal pathogens and their antibiotic resistance determinants from positively flagged blood cultures using the BioFire FilmArray blood culture identification panel[J].J Microbiol Immunol Infect，2020， 53（6）：882-891.

[14]  Chen SZ，Lin KN，Xiao M，et al. Distribution and drug resistance of pathogens of blood stream infection in patients with hematological malignancies after chemotherapy[J].Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi，2017，38（11）：951-955.

[15]  Mao SL，Ge Z，Zhao H，et al. Analysis on distribution and drug resistance of pathogen caused community-onset bloodstream infection[J].Zhonghua Wei Zhong Bing Ji Jiu Yi Xue，2019，31（1）：67-72.

[16]  钱璞，申卫红，朱岚，等.2017—2019年江南大学附属医院病原菌的分布及耐药性分析[J].现代药物与临床，2020，7：1478-1483

（收稿日期：2021-11-01）