循环肿瘤细胞、BRCA1检测在卵巢癌复发转移预测中的价值

史芳瑜，郝鹏飞，马磊，贺利民，徐全晓

卵巢癌是指卵巢上的恶性肿瘤，大部分都为卵巢原发性癌症，是妇科疾病中最为常见的恶性肿瘤之一[1]。卵巢癌由于其早期症状不明显，并且筛查手段效果不佳，所有往往发现时已经是晚期，此时采取治疗疗效甚微[2]。目前，临床上治疗卵巢癌大多都采用化疗的方式，虽然患者在此时间内症状能够得到缓解，但还是有很大的复发转移可能性，一旦复发或者转移，其癌症致死率将大大提高[3]。如何提高其对卵巢癌复方转移的预测能力成为当今医学界研究的热点。既往研究[4-5]显示，通过对大量的卵巢癌患者的血液采样对比分析得知，循环肿瘤细胞(CTC)和BRCA1的水平变化在不同卵巢癌症状中差异明显。CTC具有全面、丰富的肿瘤信息，可通过检测其水平的变化及时有效地预测卵巢癌的复发转移；而癌症患者BRCA1的低表达则会影响化疗药物的敏感性，使患者在长期化疗时疗效降低，增大卵巢癌复发转移的可能。本文主要研究CTC、BRCA1检测在卵巢癌复发转移预测中的价值，旨在为预测卵巢癌的复发转移提供借鉴。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月—2021年1月本院进行药物化疗的120例卵巢癌患者，年龄30～72(50.70±7.55)岁；体重质量指数(BMI)：16.02～28.98(22.72±2.48) kg/m2；肿瘤分期：1～2期30例、3期54例、4期36例。纳入标准：(1)符合卵巢癌诊断标准[6]；经我院医学伦理委员会通过，患者及家属了解并知情同意；(2)凝血功能正常；(3)基础资料完整。排除标准：(1)合并其他恶性肿瘤患者；(2)心肝肾等脏器严重功能障碍者。根据术后1年CT显像检测卵巢癌病灶复发或转移情况将其分为复发转移组48例和未复发转移组72例；复发转移组年龄30～71(50.69±7.54)岁；BMI：16.02～28.69(22.81±2.62) kg/m2；肿瘤分期：1～2期10例、3期24例、4期14例。未复发转移组年龄31～72(50.71±7.56)岁；BMI：16.62～28.98(22.62±2.33) kg/m2；肿瘤分期：1～2期20例、3期30例、4期22例。2组患者年龄、BMI、肿瘤分期等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 检测方法 分别于化疗前后，采集患者外周空腹静脉血，采用流式细胞术检测CTC；采用免疫组织化学—链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测BRCA1的表达水平，试剂盒检测方法严格按照说明书进行，阅片方式采用双盲法，BRCA1以肿瘤细胞出现棕黄色颗粒为阳性。联合检测方法采用并联检测法，即采用CTC或BRCA1其中任意一种方法检测结果为阳性或低表达即表明卵巢癌复发转移。

1.3 观察指标 (1)CTC阳性判定标准：荧光显微镜下CTC呈圆形或椭圆形，长径大于10 um,细胞核对于探针信号点≥3个为阳性，反之则为阴性。(2)BRCA1表达评估标准：400倍视野下观察阳性细胞染色强度并且计算阳性细胞百分比，按照染色强度评分和阳性细胞百分数计分总和来判断，总分0～1分为(-)，～3分为弱阳性(+)，～5分为中阳性(++)，6分为强阳性(+++)。以-、±和+为低表达,++、+++为高表达。

2 结果

2.1 2组患者CTC阳性率与BRCA1表达水平比较 复发转移组患者CTC阳性率明显高于未复发转移组患者，BRCA1低表达率明显高于未复发转移组患者(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者CTC阳性率与BRCA1表达水平比较

2.2 CTC阳性率与BRCA1表达水平对卵巢癌患者复发转移的评估价值 ROC曲线显示，CTC阳性检测率预测卵巢癌患者复发转移的AUC为0.762(95%Cl=0.672～0.852，P<0.001)；BRCA1表达水平预测卵巢癌患者复发转移的AUC为0.717(95%Cl=0.622～0.812，P<0.001)；联合检测的AUC为0.786(95%Cl=0.070～0.873，P<0.001)。见表2，图1。

表2 CTC阳性率与BRCA1表达对卵巢癌复发转移的评估价值

图1 CTC阳性率与BRCA1表达预测对卵巢癌患者复发转移的ROC分析

3 讨论

卵巢癌发病率占第三位，但其致死率却位于首位，由于疾病前期症状不明显，发现时已然发展成为晚期，给治疗带来巨大难度[7]。目前常用铂类加紫杉醇进行化疗治疗，短时间内症状可以得到化解，但其后续复发和转移的可能性依然存在，一旦复发或转移，其致死率将大大提高[8]。因此，科学预测卵巢癌复发转移的情况对于患者的生命安全至关重要。

本研究结果显示，复发转移组患者CTC阳性率和BRCA1低表达率明显高于未复发转移组患者。出现上述原因可能是因为CTC具备完整肿瘤信息，当CTC阳性率高时，即可表明卵巢癌复发转移的可能性越大，鹿欣等[9]研究结果表明，CTC阳性率高低可作为预测卵巢癌复发转移的标准之一，本文研究与其一致，提示临床医师可通过检测CTC阳性率来预测卵巢癌复发转移情况。既往研究[10-11]显示，BRCA1低表达的患者对造成DNA损伤相关药物的敏感性降低，而化疗相关药物主要作用机制是破坏癌变细胞的DNA，使其不能完成分裂增殖，对药物的敏感度降低从而使药物的持续作用减弱，癌症复发转移的几率变大。王根生等[12]研究结果显示，BRCA1的低表达能够降低对铂类化疗敏感性，从而增大癌症的复发转移的可能性。本研究结果与其一致，提示临床医师可通过检测CTC阳性率及BRCA1的表达来预测卵巢癌患者的复发转移情况。本研究经过ROC分析显示，通过CTC阳性率和BRCA1表达以及联合检测预测卵巢癌复发转移的AUC分别为0.762、0.717、0.786，表明CTC阳性率、BRCA1检测以及联合检测均可用于临床预测卵巢癌复发转移的指标[13]，但联合检测与单一检测差异不明显，再结合取样、检查费用等实际因素，因此在临床预测卵巢癌复发转移情况优先选择CTC阳性检查来预测卵巢癌复发转移[14-15]。

综上所述，CTC阳性检查、BRCA1检测以及二者的联合检测均可用于临床预测卵巢癌复发转移，但联合检测与单一检测差异不明显，临床上可优先选取CTC检查预测卵巢癌复发转移。