过敏性哮喘急性发作患者血清淀粉样蛋白A的表达与影响因素分析

崔晏文，王丽慧，杜春仙，高亚东

1. 武汉大学中南医院过敏反应科（武汉 430071）

2. 武汉大学中南医院呼吸与危重症医学科（武汉 430071）

支气管哮喘（简称哮喘）是一种常见的气道慢性炎症性疾病[1]。过敏性哮喘是最常见的哮喘表型，典型的发病机制为Ⅱ型炎症反应，是由Th2淋巴细胞（type 2 helper T lymphocytes）和固有淋巴样细胞2组（intrinsic lymphoid cells in group 2，ILC2）介导的气道炎症，并产生IL-4、IL-5和IL-13等Ⅱ型细胞因子促进过敏原特异性IgE合成、嗜酸性粒细胞（eosinophils，EOS）浸润、黏液高分泌和气道重塑等病理生理过程。临床上以血液或痰液中EOS、血清中总的和过敏原特异性免疫球蛋白E（sIgE）及呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，FeNO）水平的升高作为Ⅱ型炎症反应的生物标志物[2]。

血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA）是一种主要由肝脏分泌的急性期反应蛋白，目前已知的主要功能为针对感染、创伤和各类刺激的原始宿主防御反应。研究发现，哮喘患者血清SAA浓度显著高于正常对照组，是哮喘患病的预测因素[3-5]，而且SAA水平越高，哮喘的控制情况和肺功能水平越差[6]。模式识别受体对过敏原的感知失调对遗传易感个体中过敏性气道疾病的发生至关重要，气道黏液中可检测到一系列可溶性模式识别受体[7]， SAA是其中之一，它可以识别并结合屋尘螨抗原组分，激活SAA受体，驱动上皮细胞分泌IL-33，诱导Ⅱ型免疫反应的发生[8]。上述研究说明SAA在哮喘发病机制中发挥作用，但具体机制有待研究。本研究比较了急性发作期过敏性哮喘和非过敏性哮喘患者SAA水平差异，以及SAA与Ⅱ型炎症生物标志物之间的相关性，探索SAA作为过敏性哮喘生物标志物的可能性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

本研究回顾性收集了2018年1月至2019年12月武汉大学中南医院呼吸与危重症医学科因哮喘急性发作住院的患者信息，根据其过敏原特异性IgE检测结果分为过敏性哮喘与非过敏性哮喘两组。研究对象纳入标准：①符合我国2020年版《支气管哮喘防治指南》[1]诊断标准的18岁以上哮喘患者；②具备过敏原sIgE检测结果。排除标准：①合并慢性阻塞性肺病；②合并肿瘤；③合并自身免疫性疾病；④病毒血清学抗体检测阳性；⑤合并心力衰竭。本研究已通过武汉大学中南医院伦理委员会批准（临研伦2022043K）。

1.2 资料收集

通过HIS系统收集研究对象相关资料，包括一般资料（性别、年龄、身高、体重）、家族史、吸烟史、食物过敏史、药物过敏史，以及相关检验结果，如总IgE、FeNO、血EOS计数与嗜酸性粒细胞百分比（percentage of eosinophils in peripheral blood，EOS%）、血清过敏原sIgE水平等级等。过敏原sIgE的水平分级参照《中国过敏性哮喘诊治指南》[9]：＜0.35 kU/L为阴性，≥0.35 kU/L为阳性；依据sIgE水平分为Ⅰ～Ⅵ级，Ⅰ级为 0.35～0.70 kU/L，Ⅱ 级为 0.70～3.50 kU/L，Ⅲ级为3.50～17.50 kU/L，Ⅳ级为17.50～50.00 kU/L，Ⅴ级为50.00～100.00 kU/L，Ⅵ级为＞100.00 kU/L。

1.3 统计学分析

使用Graphpad Prism 9及SPSS 23.0软件进行统计分析。正态分布的计量资料以均数和标准差表示，非正态分布的计量资料以中位数及四分位数表示，根据方差齐性检验情况使用非配对t检验或Mann-Whitney检验。使用卡方检验比较各组间的率或构成比，等级资料相关性使用Spearman相关分析，定量资料相关性使用Pearson相关分析。危险因素分析使用多因素Logistic回归分析，P＜0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

共纳入急性发作期哮喘患者127例，平均年龄（50.5±16.6）岁。其中，过敏性哮喘患者57例，非过敏性哮喘患者70例，过敏性哮喘患者平均年龄显著小于非过敏性患者。性别、哮喘病程、体重指数、吸烟史、药物过敏史、疾病严重程度、白细胞计数及中性粒细胞百分比等指标在过敏性与非过敏性哮喘患者之间差异无统计学意义（表1）。

表1 127例哮喘患者基线资料Table 1. Baseline data of 127 asthma patients

分析发现，4月和10月为哮喘急性发作患者入院高峰期，且以10月更加明显。过敏性哮喘患者入院时间分布也呈现上述特征，但非过敏性哮喘患者4月份入院人数略有增加，10月份入院高峰则未出现（图1），提示过敏性哮喘患者的急性发作是导致10月入院患者短期急剧增加的主要原因。

图1 过敏性及非过敏性哮喘患者急性发作入院时间分布Figure 1. Monthly distribution of hospitalized asthma patients with acute exacerbation

2.2 过敏性哮喘与非过敏性哮喘患者Ⅱ型炎症指标对比

本研究根据过敏原sIgE检测结果将127例哮喘患者分为过敏性和非过敏性哮喘两组。过敏性哮喘患者总IgE水平中位数为406.0（194.8，683.5）kU/L，显著高于非过敏性哮喘患者的40.2（23.3，116.3）kU/L（P＜0.001）。过敏性哮喘患者EOS%为（5.69±2.40）%，显著高于非过敏性哮喘患者的（4.07±4.60）%（P＜0.05）。过敏性哮喘患者FeNO为（53.00±29.86）ppb，显著高于非过敏性哮喘患者的（34.63±28.03）ppb（P＜0.01）（图2）。表明过敏性和非过敏性哮喘患者表型特征差异明显，可用于进一步分析SAA在不同表型哮喘急性发作患者间的差异。

图2 过敏性与非过敏性哮喘患者Ⅱ型炎症标志物对比Figure 2. Biomarkers of type II inflammation in asthma and non-asthma patients

2.3 SAA在不同表型及不同过敏原致敏程度哮喘患者间的表达差异

过敏性哮喘患者SAA水平显著高于非过敏性哮喘组，分别为（26.8±27.4）mg/L、（9.1±5.8）mg/L（P＜0.05）。根据过敏原sIgE检测结果，将过敏性哮喘患者分为单一致敏组（仅对一种气传过敏原致敏）、多重致敏组（对两种及以上气传过敏原致敏），两组SAA水平差异无统计学意义。根据血清中尘螨sIgE水平等级进一步将过敏性哮喘患者分为Ⅰ～Ⅲ级与Ⅳ～Ⅵ级致敏组。Ⅰ～Ⅲ级致敏组患者SAA水平为（14.8±19.8）mg/L，显著低于Ⅳ～Ⅵ级致敏组患者（57.1±37.1）mg/L（P＜0.05），详见图3。

图3 SAA在不同表型及不同过敏原致敏程度哮喘患者间的表达Figure 3. SAA levels in asthma patients with different phenotypes and grades of allergen sensitization

分析SAA水平与过敏性哮喘表型标志物和过敏原致敏之间的相关性，结果显示SAA水平与尘螨sIgE水平等级呈正相关关系（r=0.398，P=0.044），而与总IgE、EOS%及FeNO之间无显著相关性（图4），提示气传过敏原致敏程度可能是影响过敏性哮喘SAA水平的因素。

图4 SAA与EOS%、FeNO、总IgE及尘螨sIgE等级之间的相关性分析Figure 4. Correlation analysis between SAA and EOS%, FeNO, total IgE and grades of house dust mite-specific IgE

2.4 过敏性哮喘患者急性发作的严重程度对SAA表达的影响

在过敏性哮喘患者中，重-危重度急性发作者SAA水平为（55.0±16.4）mg/L，显著高于轻-中度急性发作者（13.8±13.0）mg/L（P＜0.001），而在非过敏性哮喘患者中，不同严重程度的急性发作患者之间SAA水平差异无统计学意义（图5）。

图5 过敏性哮喘与非过敏性哮喘患者的急性发作严重程度对SAA的影响Figure 5. Effect of exacerbation severity on SAA in allergic and non-allergic asthma patients

2.5 过敏性哮喘的影响因素分析

在校正年龄和性别等因素后，Logistics回归分析结果显示，SAA[OR=1.138，95%CI（1.071，1.208）]及总IgE[OR=1.015，95%CI（1.009，1.021）]是过敏性哮喘的预测因素（表2）。

表2 SAA、总IgE、EOS%、FeNO与过敏性哮喘之间的多因素回归分析Table 2. Regression analysis of allergic asthma with SAA, total IgE, EOS% and FeNO

3 讨论

哮喘是一种常见的慢性气道炎症疾病，具有异质性。过敏性哮喘是主要表型，占成人哮喘的50%以上，在儿童哮喘中可达70%[9]。过敏性哮喘在过敏原诱发后或上呼吸道感染后易出现急性发作或原有症状加重，具有明显的季节性。本研究对哮喘患者急性发作的入院时间进行统计，发现过敏性哮喘患者急性发作高峰分别为4月和10月，与武汉市气传花粉的飘散高峰期基本一致[10]，但也可能是这两个月份气温波动较大，容易并发呼吸道感染所致。而非过敏性哮喘在4月份有小幅增加，其余月份因急性发作住院情况无明显波动，不受季节影响。

本研究中过敏性哮喘患者的平均年龄为（45.9±16.1）岁，显著小于非过敏性哮喘患者（54.2±16.2）岁，可能与过敏性哮喘发病年龄较低有关。既往研究显示，年龄对SAA水平无显著影响，据此推测本研究中过敏性与非过敏性哮喘患者SAA水平差异受年龄影响较小。

过敏性哮喘作为一种典型的Ⅱ型炎症反应，其炎症反应不仅发生在气道，还可以引起全身反应，例如血液中EOS%、总IgE、FeNO及其他Ⅱ型炎症因子等在过敏性哮喘患者中均有一定程度升高，可作为过敏性哮喘的生物标志物[12-13]。本研究中血清总IgE、EOS%及FeNO在过敏性哮喘患者中也显著升高，与既往研究一致。有研究认为气道分泌物中的SAA水平与哮喘患病率之间存在正相关关系[3-5]，提示SAA作为一种可溶性模式识别受体，可能在气道局部发挥作用。但气道局部的SAA检测存在技术困难，无法常规开展，因此，探讨血清中的SAA在哮喘患者体内的表达更有临床可行性。本研究显示，过敏性哮喘患者SAA水平显著高于非过敏性哮喘者，过敏原sIgEⅣ～Ⅵ级哮喘患者SAA水平明显较过敏原Ⅰ～Ⅲ级者高，且SAA与过敏原sIgE等级之间呈正相关，提示SAA可能是过敏性哮喘的重要生物标志物。Logistic回归分析也证实，SAA是过敏性哮喘的预测因素（OR=1.138，P＜0.001）。

现有研究表明SAA是一种可溶性模式识别受体，通过固有免疫机制，驱动上皮细胞分泌IL-33，诱导Ⅱ型免疫反应的发生，参与过敏性哮喘的发生[8]。本研究还显示，过敏原致敏程度高的患者SAA表达水平也高，提示SAA可能具有促进过敏原致敏的作用。此外，SAA在细菌、病毒感染时也会显著升高。

本研究是基于病例资料的回顾性研究，存在一定局限性。主要包括难以严格控制两组患者的基线资料导致的混杂偏倚，可能会放大阳性结果，影响结论的真实性。此外，患者入组时产生的选择偏倚及回顾病史时产生的回忆性偏倚，均有可能影响结果的真实性。因此，后期可以设计相关的前瞻性研究以进一步验证SAA与过敏性哮喘之间的相关性。

综上，过敏性哮喘患者的SAA水平更高，且与过敏原特异性IgE水平之间具有相关性，可作为一种潜在的过敏性哮喘的生物标志物。