健脾润肠颗粒制备工艺及其对脾虚便秘的作用研究

2022-06-21张琬迎麦钊源刘清玮

人参研究 2022年3期

张琬迎，麦钊源，刘晖，刘清玮

（吉林农业科技学院中药学院·吉林吉林·132101）

脾虚便秘是指脾胃虚弱，水谷精微吸收功能不足，精微物质不能运到全身各处，从而导致气虚，影响大肠的推动作用，从而导致便秘。健脾润肠组方来源于《医学衷中参西录》，此方以山药、枸杞、黄芪、鸡内金、生麦芽、玄参、天花粉、天冬、白芍、桂枝、生姜、大枣为组成。久服无弊，临床常用剂型为汤剂。但汤剂的疗效受原料的质量、煎煮条件、炮制技术等多方面因素影响，并且汤剂不易携带、口感不佳，本研究此方改良成中药颗粒剂，制作方法简单，成本低廉，携带方便，以提高人们服药的便利，发扬古方[1]。

1 材料与方法

1.1 实验动物

小鼠（吉林农业科技学院）。

1.2 仪器

FYS02 10、80、100目标准检验筛（安平县沃东丝网制品有限公司）；CP114型电子天平(奥豪斯仪器（上海）有限公司)；DHG-9140A型恒温鼓风干燥箱（常州诺基仪器有限公司）；DL-T222A型电磁炉（中山市金杞电器科技有限公司）；12#55mm小鼠灌胃针（上海玻利鸽工贸有限公司）；水浴锅；中药粉碎机。

1.3 药品及试剂

淮山药（河北祁新中药颗粒饮片有限公司）；枸杞等10味中药（均购自河北金草药业有限公司）；生理盐水；纯净水；淀粉；糊精；蔗糖；无水乙醇。

1.4 健脾润肠颗粒剂的制备

1.4.1 制备工艺

选料→处理→提取→浓缩→制粒→干燥→整粒→包装。

1.4.2 前处理

按健脾润肠汤处方称取药材，用12倍水浸泡煎煮2次（2 h/次）进行提取，纱布滤过，合并提取液[2-3]。提取液经蒸发浓缩成稠浸膏后，置于60℃烘箱中干燥至数值不再变化，粉碎备用。

计算提取物的提取得率=浸膏质量/药材总质量×100%[4]

1.4.3 综合评分

综合评分的目的是为了综合利用三个指标，根据评分的高低来确定颗粒剂质量的好坏，采用以下评分计算公式[2]：

综合评分标准为：吸湿率值/最大吸湿率值×50+成型率值/最大成型率值×25+溶化率值/最大溶化率值×25

以颗粒的吸湿率、成型率和溶化率作为评价指标综合评分优选出最佳比例、最佳体积分数和最适温度。

1.4.3.1 成型率测定

取健脾润肠颗粒分别过一号筛（10目）和五号筛（80目），以能过一号筛且不能过五号筛的颗粒为合格颗粒，以合格颗粒量除以总颗粒量即为成型率[4]。

1.4.3.2 吸湿率的测定

称1g健脾润肠颗粒置恒重的称量瓶中，放入烘箱干燥至恒重后精密称重，最后置于干燥器中，48 h后取出称重，计算吸湿率

吸湿率(%)=(吸湿后重量-吸湿前重量）/吸湿前重量×100%[5]

1.4.3.3 溶化率的测定

取干燥至恒定重量的5ml离心管数支，放入精密称定的健脾润肠颗粒0.25g。精密称取热水5ml，振摇5分钟。放入离心机中3000转离心15 min，除去上清液，取残渣在80℃下烘干至恒定质量后精密称定，计算颗粒溶化率。

1.5 单因素试验

通过文献研究和预实验，选定糊精为辅料[6]，并初步设定浸膏粉与糊精比例为（1：0.5、1：1、1：1.5、1：2、1：2.5），润湿剂的用量为（乙醇浓度75%、80%、85%、90%、95%），烘干温度为（50℃、55℃、60℃、65℃、70℃）。

1.6 正交实验

根据单因素实验的结果进行正交优化实验，选择原辅料比(A)、乙醇浓度(B)、烘干温度(C)为考察因素，以颗粒的吸湿率、成型率和溶化率作为评价指标综合评分，进行L9(33)正交实验，确定健脾润肠颗粒制备的最佳工艺。

1.7 健脾润肠颗粒的药剂学检查

1.7.1 外观

颗粒干燥，均匀，棕黄色，色泽一致，无吸潮、结块、潮解等现象。

1.7.2 粒度

根据《中华人民共和国药典》2020年版附录IXE双筛分法操作，取健脾润肠颗粒5袋，秤定质量，分别过1号筛、5号筛，5袋不能通过1号筛与能通过5号筛的总和未超过供试量的15%，符合《中华人民共和国药典》颗粒剂项下的要求。

1.7.3 水分

按照0832水分测定法测定，取健脾润肠颗粒2g平铺于干燥至重量不再变化的称量瓶中，厚度不超过0.5cm，精密称定，放入烘箱中，5h后对其进行精密恒定，再在烘箱中放置1h称定，两次重量相差少于5mg，计算水分。要求低于8%。

1.7.4 溶化性

按照溶化性测定法操作，取健脾润肠颗粒10 g，加热水200 mL，搅拌5分钟，观察颗粒的溶化状况，可溶性颗粒应全部溶化或轻微浑浊，但不能有异物。

1.8 健脾润肠颗粒的药理试验

1.8.1 脾虚便秘小鼠试验模型的制备

1.8.1.1 小鼠分组

将40只体重在20±2g的小白鼠随机分成4组，第1组为空白组，第2组为模型对照组，第3组为汤剂组，第4组为颗粒剂组。适应性喂养2天后开始造模。

1.8.1.2 建造脾虚便秘模型

挑选40只体重在18～22g的小白鼠，性别不影响，雌雄均可，10只作为空白对照组，剩下的30只小鼠根据查找文献使其饮食失节从而导致脾虚，中医认为的脾虚气血不足使肠道推进无力致便秘，按每天0.5 mL/只喂饲小鼠纯精炼猪油2次，猪油的纯度为100%，连续8d，期间饲喂正常[7]。

1.8.2 给药剂量

根据试验结果计算出汤剂和颗粒剂的比例，一份汤剂大概可以做出符合质量标准的颗粒7.7g。根据人与动物给药换算出小鼠剂量。

按照单位体重的剂量来算，小鼠的等效剂量相当于人的9.1倍。

即一只小鼠一天的服用量约为0.84g

1.8.3 颗粒剂的冲泡与喂药

颗粒剂与汤剂均每天灌喂两次为1/4（0.21g）其余3/4当水放在鼠笼中，模拟“当水饮用”。空白组和模型对照组每天分别灌喂两次同等的清水。鼠笼中同样放入清水供小鼠饮用。

1.8.4 小鼠排便量评价

根据原方记载服用五天即可。小鼠喂药5天，中途每天两次记录小鼠排便量（g）。

1.9 数据处理

采用SPSS 19.0数据统计软件对有关实验数据做相应的数据处理和分析。

2 结果

2.1 单因素试验结果与分析

2.1.1 原辅料比对综合评分的影响

如表2-1所示，随着原辅料比的增加，综合评分呈现先上涨后下降的趋势，在原辅料为1：1处，综合评分达到最高（91.23分），综合评分在1：1～1：1.5处开始降低可能是因为辅料过多对颗粒成型率造成影响。此外，在原辅料比为1：1的时候，综合评分最高，健脾润肠颗粒外观效果最好。

表2 -1 原辅料比综合评分表

2.1.2 乙醇浓度对综合评分的影响

如表2-2所示，乙醇浓度在75%～85%之间，随着乙醇体积分数的上升，综合评分也逐渐上涨，当乙醇浓度达到85%的时候，综合评分达到最高（89.67分），之后逐渐下降，可能是因为乙醇浓度过高，水分太少，从而导致成型率太低。

表2 -2 乙醇浓度综合评分表

2.1.3 烘干温度对综合评分的影响

如表2-3所示，随着温度的上升，综合评分呈现先上升后下降趋势，当温度达到55℃的时候，综合评分达到最高（86.58分），之后逐渐下降。结果显示，在温度为55℃的时候，综合评分最高，产品总体效果最好。

表2 -3 温度综合评分表

2.2 健脾润肠颗粒制备工艺参数的优化

依据单因素结果，设定正交实验因素水平表，见表2-4。

表2 -4正交实验因素水平表

表2 -5 L9(33)正交实验结果与极差分析

由表2-5中的R值可以看出，3个因素对健脾润肠颗粒制备的产品综合评分的大小顺序依次为A＞C＞B，即原辅料比＞烘干温度＞乙醇浓度。根据K值得知原辅料比A2＞A1＞A3，乙醇浓度B2＞B3＞B1，烘干温度

C2＞C1＞C3。

由表2-5可以看出最佳组合为A2B2C2。即原辅料比1：1.5，乙醇浓度90%，烘干温度55℃。此条件下做出来的颗粒颜色均匀，软硬适中，容易成型，溶化性好。颗粒药香浓郁，无黏连。

表2 -6小鼠排便量（g）

2.3 颗粒剂的质量检查

2.3.1 外观

本颗粒剂外观干燥、颜色均匀，呈黄棕色，颗粒之间疏松干燥，符合要求[9]。

2.3.2 粒度

不能通过一号筛和能通过五号筛的总和为9.14%。符合《中华人民共和国药典》对颗粒剂粒度的要求。

2.3.3 水分

健脾润肠颗粒的水分为5.11%。符合药典要求。

2.3.4 溶化性

按照方法中检查本颗粒，全部溶化仅轻微浑浊，溶液呈微黄棕色。符合要求。

经过各项检查得知本健脾润肠颗粒各项理化检验均符合《中华人民共和国药典》要求。

2.4 药理试验结果与分析

如表所示，空白组小鼠排便正常，基本上每天24h排便趋于稳定状态，大概平均在2.8g左右，颗颗分明，表面不光滑。模型对照组小鼠粪便干结含水量低，排便次数少。汤剂试验组小鼠第一天排便与模型对照组相差无几，粪便含水量少，但是经过逐渐给药，小鼠饮食正常，到第4天大概达到空白对照的水平，颜色次数相对持平，持续给药使小鼠排便次数增多，粪便较软。颗粒剂试验组小鼠排便次数少，粪便干结。根据服药时间增加，小鼠排便次数逐渐增加，饮食也恢复正常。

相对来说，汤剂给药治疗了小鼠的脾虚便秘，颗粒剂治疗效果不如汤剂治疗效果好，但是颗粒剂与模型对照相比又有大大地提高与改善。颗粒剂试验组也与空白组相差不多。