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黑木耳牡耳1号母种培养基适宜碳氮源筛选

2022-06-17王延锋王金贺潘春磊刘姿彤盛春鸽于海洋董雪梅

食用菌 2022年2期
关键词:氮源碳源黑木耳

史 磊 王延锋 王金贺 潘春磊 刘姿彤 盛春鸽 张 鹏 于海洋 赵 静 董雪梅

(黑龙江省农业科学院牡丹江分院,黑龙江牡丹江 157000)

黑木耳属担子菌纲,木耳目,木耳科,是我国栽培最早的食用菌之一[1]。碳、氮是食用菌生长发育过程中最重要的营养,碳是真菌的碳素营养来源,氮是食用菌合成蛋白质和核酸的必要元素[2]。目前国内已有报道碳氮对双孢蘑菇、平菇、香菇、草菇、猴头菌等菌丝生长和子实体产量产生影响,但在黑木耳方面相关研究报道较少。因此,笔者研究了5种碳源、4种氮源及培养基碳氮比对黑木耳菌丝生长的影响,从而筛选出黑木耳菌丝生长的最佳碳源、氮源、碳氮比,为生产者选择优良的母种培养基及制定高产栽培技术提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

黑木耳(牡耳1号),由黑龙江省农业科学院牡丹江分院提供。

1.2 供试培养基

基础培养基1为葡萄糖20 g,蛋白胨4 g,磷酸二氢钾3 g,硫酸镁1.5 g,复合VB21片,琼脂15 g,马铃薯200 g,水1 000 mL,pH自然。基础培养基2为葡萄糖20 g,磷酸二氢钾3 g,硫酸镁1.5 g,复合VB21片,马铃薯200 g,水1 000 mL,pH自然。

1.3 试验方法

1.3.1 碳源试验

以基础培养基1中20 g葡萄糖的含碳量为基准,用相当含碳量的果糖、蔗糖、麦芽糖和可溶性淀粉代替供试培养基1中的葡萄糖,配制培养基培养菌丝。采用单因素试验设计,每个处理6个重复。测定5种培养基中黑木耳菌丝的生长速度,测定结果取平均值,并进行差异显著性分析[3]。

1.3.2 氮源试验

以基础培养基1中4 g蛋白胨的含氮量为基准,分别用硫酸铵、尿素和豆粉替换基础培养基1中的蛋白胨,配制培养基培养菌丝。单因素试验设计,每个处理6个重复。观察记录黑木耳菌丝生长情况,测定菌丝生长速度,测定结果取平均值,并进行差异显著性分析。

1.3.3 碳氮比试验

在基础培养基2中,添加不同量蛋白胨(蛋白胨含碳量忽略不计)配成不同碳氮比的培养基。单因素试验设计,每个处理6个重复。观察不同碳氮比培养基对黑木耳菌丝生长影响,测定菌丝生长速度,测定结果取均值,并进行差异显著性分析。

1.4 菌丝生长速度测定方法

以上试验均按常规方法灭菌,制平皿,冷却后在无菌环境下接种一块直径为8 mm的活化牡耳1号菌丝块,放置25℃恒温培养箱培养,以菌丝体在培养皿中菌落直径作为菌丝生长量指标,计算菌丝平均生长速度。

2 结果与分析

2.1 供试碳源对黑木耳(牡耳1号)菌丝生长的影响

图1 供试碳源培养基上黑木耳(牡耳1号)菌落形态(前期萌发)

由表1可知,果糖培养基中菌丝平均长速与蔗糖、淀粉培养基中的生长速度差异显著,与葡萄糖、麦芽糖培养基中菌丝长速差异不显著。5种碳源培养基中菌丝生长速度在0.01水平上均差异不显著。供试碳源培养基中菌丝平均生长速度快慢顺序为果糖>麦芽糖>葡萄糖>蔗糖>淀粉,其中以果糖或葡萄糖为碳源时,菌落完整、菌丝洁白、浓密、健壮,菌丝生长良好。因此,黑木耳牡耳1号菌丝生长的最佳碳源是果糖,其次为葡萄糖。

表1 供试碳源培养基上黑木耳(牡耳1号)菌丝生长情况

2.2 供试氮源对黑木耳(牡耳1号)菌丝生长的影响

从表2可以看出,供试氮源培养基中菌丝平均长速依次为蛋白胨>豆粉>硫酸铵>尿素,蛋白胨培养基中菌丝生长速度最快,与其他几种氮源培养基中菌丝生长速度差异极显著。以蛋白胨为氮源的菌丝长势最佳,菌落完整,菌丝洁白,浓密,以尿素为氮源的菌丝长势虽然浓密,但是生长速度极为缓慢。因此,黑木耳(牡耳1号)菌丝生长的最佳氮源是蛋白胨。

表2 供试氮源培养基上黑木耳(牡耳1)号菌丝生长情况

2.3 培养基碳氮比对黑木耳(牡耳1号)菌丝生长的影响

从表3可以看出,黑木耳(牡耳1号)菌丝在试验碳氮比的培养基中均可生长,碳氮比为10∶1、20∶1时,菌丝浓密,长势良好,但长速较为缓慢;碳氮比为80∶1、90∶1时,菌丝生长速度快,且菌落完整,菌丝洁白、浓密(图2)。

表3 培养基碳氮比对黑木耳(牡耳1号)菌丝生长影响

图2 不同碳氮比培养基中黑木耳(牡耳1号)菌落形态

3 小结

试验结果表明,以果糖为碳源的培养基中黑木耳(牡耳1号)菌丝生长最佳,其次是以葡萄糖为碳源的培养基,以麦芽糖为碳源的培养基中尽管菌丝生长速度快,但菌丝长势与以淀粉为碳源的培养基一样,菌落表现不完整,稀疏。因此,黑木耳(牡耳1号)菌丝生长最佳碳源为果糖,其次为葡萄糖。

以蛋白胨为氮源的培养基中黑木耳(牡耳1号)菌丝生长最佳,菌落完整,菌丝洁白、浓密、健壮,且生长速度明显快于其他几种供试氮源。因此,黑木耳(牡耳1号)菌丝生长的最佳碳源是蛋白胨。

在试验碳氮比培养基上,黑木耳(牡耳1号)菌丝均能正常生长,为10∶1、20∶1、30∶1时菌丝浓密,但菌丝长速缓慢,为80∶1、90∶1时菌丝生长速度最快,菌落完整,菌丝洁白。因此,培养基最适碳氮比为80∶1、90∶1。

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