人乳头瘤病毒感染宫颈病变患者细胞因子水平的变化及其临床意义

郭春香，孙淑华

[鄂尔多斯市中心医院（康巴什部）妇产科，内蒙古 鄂尔多斯 017010]

人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈癌病变的主要原因，其存在多种亚型，根据其致病程度可分为低危型和高危型。而引发宫颈病变的主要是高危型HPV，其通过与宿主正常宫颈细胞DNA整合，调控基因转录，继而导致宫颈细胞发生恶性增殖，在宫颈病变及其进展中发挥重要的作用[1]。HPV感染会影响机体免疫功能，其中高危型HPV感染与辅助性T细胞17（Th17） / 调节性T细胞（Treg）所介导的免疫应答紊乱密切相关，在宫颈癌疾病的进展中发挥了关键作用；Th17细胞分泌的白细胞介素-23（IL-23）能够激活炎性通路，促使机体产生炎症反应，并促进宫颈癌细胞的侵袭和转移，使宫颈癌进一步发展、恶化[2]。IL-2是主要由1型辅助性T细胞（Th1）细胞分泌的可调节免疫功能的细胞因子，其水平越低，提示患者机体免疫功能下降，可降低HPV感染宫颈病变患者抗病毒能力和抵抗力，宫颈病变随之恶化；IL-10是由2型辅助性T细胞（Th2）细胞分泌的能够抑制抗肿瘤免疫应答的细胞因子，可增加癌细胞发生免疫逃逸的风险，同时可抑制Th1细胞分泌IL-2，进一步抑制机体免疫功能。研究显示，HPV感染患者机体Th1/Th2失衡，Th2细胞功能增强，而Th1细胞功能低下，参与机体宫颈炎性病变与宫颈癌的发生与发展[3-4]。本研究旨在分析HPV感染宫颈病变患者细胞因子水平的变化及其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2018年1月至2021年11月鄂尔多斯市中心医院（康巴什部）收治的150例HPV感染宫颈病变患者的临床资料，根据病变类型分为慢性宫颈炎（chroniccervicitis, CCS）组（26例）、宫颈癌（cervical cancer, CC）组（46例）、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasias, CIN）组（78例）。CCS组患者年龄23～63岁，平均（42.99±8.94）岁；饮酒史5例，吸烟史11例，糖尿病史7例，高血压史10例。CC组患者年龄23～63岁，平均（42.98±8.86）岁；饮酒史11例，吸烟史14例，糖尿病史13例，高血压史16例。CIN组患者年龄22～63岁，平均（42.98±8.24）岁；饮酒史19例，吸烟史24例，糖尿病史20例，高血压史21例。CCS组、CC组、CIN组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），组间可比。纳入标准：符合《妇产科学（第3版）》[5]中的相关诊断标准者；无子宫切除手术史者；近3个月内未进行过相关治疗者；未合并其他妇科疾病等。排除标准：妊娠期女性；伴有自身免疫性、血液系统疾病者；伴有肝、胃等恶性肿瘤疾病者等。本研究经院内医学伦理委员会批准。

1.2 分组方法 根据《妇产科学（第3版）》[5]中的CIN分级标准将CIN组患者分为CIN Ⅰ组（25例，细胞异型性轻，排列不整齐，但仍保持极性，异型细胞局限于上皮层下1/3），CIN Ⅱ组（27例，细胞异型性明显，排列较紊乱，异型细胞占据上皮层下1/3至2/3），CIN Ⅲ组（26例，重度不典型增生异型细胞超过全层的2/3，难以与原位癌区别）。根据临床特征对CC组患者进行分组，通过CT腹部检查观察是否发生淋巴结转移；通过宫颈活检病理检测观察是否发生脉管浸润，其中淋巴结转移情况：有淋巴结转移27例，无淋巴结转移19例；脉管浸润情况：有脉管浸润24例，无脉管浸润22例。

1.3 检测方法 患者入院后，采取空腹静脉血4 mL，取2 mL采用流式细胞仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号：BriCyte E6）检测外周血Th17细胞水平，取剩余2 mL空腹静脉血，离心（3 000 r/min，10 min）分离血清，采用全自动生化分析仪（江苏英诺华医疗技术有限公司，型号：DF-403）检测血清 IL-2、IL-10、IL-23 水平。

1.4 观察指标 ①比较CCS组、CC组、CIN组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平。②比较CIN组不同分级患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平。③比较CC组患者不同临床特征（有/无淋巴结转移、有/无脉管浸润）患者外周血Th17细胞表达及血清 IL-2、IL-10、IL-23 水平。

1.5 统计学方法 使用SPSS 21.0统计软件分析数据，计量资料以(±s)表示，两组间比较行t检验，多组间比较采用重复测量方差分析。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CCS组、CC组、CIN组患者外周血Th17细胞及血清 IL-2、IL-10、IL-23水平 CCS组、CIN 组、CC 组患者外周血Th17细胞及血清IL-10、IL-23水平均逐渐升高，血清IL-2水平均逐渐降低，CC组患者外周血Th17细胞及血清IL-10、IL-23水平高于CCS组、CIN组，且CIN组高于CCS组；CC组患者血清IL-2水平低于CCS组、CIN组，且CIN组低于CCS组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表 1。

表1 CCS组、CC组、CIN组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

表1 CCS组、CC组、CIN组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

注：与CCS组比，*P＜0.05；与CIN组比，#P＜0.05。Th17：辅助性T细胞17；IL-2：白细胞介素-2；IL-10：白细胞介素-10；IL-23：白细胞介素-23。CCS：慢性宫颈炎；CIN：宫颈上皮内瘤变；CC：宫颈癌。

组别 例数 Th17细胞(%) IL-2(pg/mL) IL-10(pg/mL) IL-23(pg/mL)CCS 组 26 0.87±0.14 53.54±5.34 22.53±5.34 23.15±6.56 CIN 组 78 2.12±0.65* 38.56±1.87* 75.32±10.21* 65.56±8.43*CC 组 46 3.23±0.86*# 18.53±0.34*# 145.25±9.53*# 101.23±16.32*#F值 105.315 1 667.751 1 574.282 409.914 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 CIN组不同分级患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23 水平 CIN Ⅰ组、CIN Ⅱ组、CIN Ⅲ组患者外周血Th17细胞及血清IL-10、IL-23水平均逐渐升高，血清IL-2水平均逐渐降低；CIN Ⅲ组患者外周血Th17细胞及血清IL-10、IL-23水平高于CIN Ⅰ组、CIN Ⅱ组，且CIN Ⅱ组高于CIN Ⅰ组；CIN Ⅲ组血清IL-2水平低于CINⅠ组、CIN Ⅱ组，且CIN Ⅱ组低于CIN Ⅰ组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 CIN组不同分级患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

表2 CIN组不同分级患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

注：与 CIN Ⅰ组比，△P＜0.05；与 CIN Ⅱ组比，▲P＜0.05。

组别 例数 Th17细胞(%) IL-2(pg/mL) IL-10(pg/mL) IL-23(pg/mL)CIN Ⅰ组 25 0.34±0.09 47.35±2.56 23.53±5.43 22.46±5.78 CIN Ⅱ组 27 3.43±1.21△ 37.37±1.86△ 80.54±11.27△ 73.42±12.53△CIN Ⅲ组 26 4.34±1.41△▲ 34.53±0.56△▲ 115.32±12.42△▲ 94.01±15.43△▲F值 95.244 338.740 520.688 238.618 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 不同临床特征CC组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平 与无脉管浸润、无淋巴结转移CC患者比，有脉管浸润、有淋巴结转移CC患者外周血Th17细胞水平及血清IL-10、IL-23水平均升高，血清IL-2水平均降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

表3 不同临床特征CC组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

表3 不同临床特征CC组患者外周血Th17细胞及血清IL-2、IL-10、IL-23水平比较(  ±s)

临床特征 例数 Th17细胞(%) IL-2(pg/mL) IL-10(pg/mL) IL-23(pg/mL)脉管浸润 有 24 3.42±0.34 17.56±0.32 183.76±8.65 128.76±14.54无22 1.12±0.17 34.54±3.65 109.65±9.11 77.43±7.43 t值 28.603 22.718 28.299 14.865 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05淋巴结转移 有 27 3.51±1.02 17.76±0.45 177.98±8.69 132.54±14.96无19 0.98±0.32 33.54±2.87 111.87±8.65 72.43±6.89 t值 11.134 28.211 25.831 17.233 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 7.351

3 讨论

当机体发生高危型HPV感染后，其首先以游离态潜伏于宫颈的基底细胞层，并于细胞层内大量增殖，HPV DNA基因组序列可整合宿主细胞基因组，增加基因组的不稳定性，从而增加宫颈细胞鳞状上皮增生的风险；且在高危型HPV持续性感染过程中，宫颈细胞组织受到HPV抗原刺激，启动包括适应性免疫、固有免疫等局部黏膜免疫反应，造成免疫抑制微环境，表现为Th17/Treg与Th1/Th2失衡，促进CIN、CC的发生。

张慧莉等[6]研究显示，高危型HPV患者存在明显的Th17/Treg细胞比例失衡，Th17细胞大量分泌白细胞介素-17（IL-17）和IL-23等因子，干扰抗原提呈细胞将HPV抗原提呈给相关的T淋巴细胞，从而促成HPV逃避机体免疫系统的攻击，导致宫颈病变逐步进展。本研究结果中，CCS组、CIN组、CC组患者外周血Th17细胞及血清IL-23水平均逐渐升高，提示Th17/Treg细胞失衡与宫颈病变过程相关，参与了CC的发生与发展。CIN及宫颈癌的发病机制通常受到机体细胞免疫应答的影响，能够表现出免疫耐受情况，在HPV感染患者抗肿瘤免疫中以Th1细胞介导的细胞免疫反应为主，典型细胞因子为IL-2，其可活化T细胞并诱导促进NK细胞增强机体抗肿瘤活性；但大多数肿瘤患者机体相关免疫因子会发生漂移，偏向Th2型细胞因子，以IL-10为代表，其可抑制巨噬细胞、NK细胞活性，通过多途径抑制抗肿瘤免疫应答，表现为免疫抑制，导致机体免疫功能低下，这也是HPV感染宫颈病变患者发生免疫逃逸的主要机制，促进患者病情进展，逐步发展为CC[7]。本研究结果显示，CCS组、CIN组、CC组患者血清IL-10水平均逐渐升高，IL-2水平均逐渐降低，提示HPV感染的宫颈病变患者发生了Th1/Th2漂移，且随着病变程度的加重，漂移越来越明显，不利于HPV的清除。

CIN为CC的癌前病变，其存在3个阶段：自然逆转、持续不变、进展为宫颈癌；机体免疫失衡后会导致患者出现自身免疫性疾病与肿瘤的发生，且随着CIN分级的增加，患者的癌变风险逐步增加[8]。本研究结果中，CIN Ⅰ组、CIN Ⅱ组、CIN Ⅲ组患者外周血Th17细胞水平及血清IL-10、IL-23水平均逐渐升高，血清IL-2水平均逐渐降低，提示CIN患者呈现出明显的Th2、Th17细胞因子高分泌现象，机体处于免疫抑制状态，且随着病情加重，上述现象越明显，最终导致CC的发生。受HPV感染的影响，患者机体Th17细胞活性增强，促使机体血管表皮生长因子的分泌，进一步促进肿瘤微血管生成，从而促进CC疾病进展，发生远处转移；同时其分泌的IL-23对Th17细胞的存活和增殖有重要意义，可间接促进CC的转移与浸润[9]；此外，CC患者中T细胞中出现Th1/Th2漂移，且明显向Th2偏离时，则会引发NK细胞中抑制性受体和杀伤性受体发生明显失衡，进而导致肿瘤进一步发展和转移，促进CC进展[10]。本研究中，与无脉管浸润、无淋巴结转移CC患者比，有脉管浸润、有淋巴结转移CC患者外周血Th17细胞水平及血清IL-10、IL-23水平均升高，血清IL-2水平均降低，提示高危型HPV感染可影响机体免疫应答，且随着CIN向宫颈癌方向进展，Thl7/Treg与Th1/Th2平衡开始偏离，继而导致宫颈癌的发展与进一步恶化。

综上，随着HPV感染宫颈病变患者病情进展，外周血Th17细胞及血清IL-10、IL-23水平逐渐升高，血清IL-2水平逐渐降低，检测其水平有助于临床HPV感染宫颈病变患者的病情评估。因此临床需针对HPV感染宫颈病变患者严密监测Th1/Th2以及Th17/Treg相关细胞因子分布情况，评估患者病情，并予以及时治疗恢复患者免疫平衡，有效抑制CIN及CC的发生，改善HPV感染宫颈病变患者的预后。