银杏中银杏内酯提取方法及其药理作用的研究进展

蔡 琳，杜 瑜，彭 鹏

（1.徐州生物工程职业技术学院，江苏 徐州 221006；2.徐州市矿山医院，江苏 徐州 221002）

银杏属于稀有物种，是目前仅存的银杏科、银杏属植物，有植物界活化石的美称，分布在我国各个地区，尤其在江苏等地。银杏的叶子和果实都是重要的药用部位，能够敛肺平喘、止带等。随着科技的发展，医药领域对银杏的开发由中医药理论逐渐转向成分研究，因此，银杏提取物成为当下研究的热点，并取得了一定成就。成都百裕制药的银杏内酯注射液，为神经系统用药，是一种祛瘀剂和通脉化瘀剂，具有活血化瘀、通经活络的特性[1-3]。以银杏叶为提取部位，提取银杏总内酯制成的用于治疗脑卒中的现代中药注射液，对于脑卒中具有积极的治疗作用。百裕制药股份有限公司银杏内酯注射液与康缘药业的银杏二萜内酯葡胺注射液相比，药品成分中包含对神经血管单元具有保护作用的白果内酯，药物作用机理存在差异。此外，已有百余种银杏提取物制剂获批。丰富的研究成果以及广泛的需求市场，迫切需要对银杏内酯提取进行深入研究。银杏内酯主要成分化学结构见图1。

图1 银杏内酯的分子结构

本文在研究中发现，我国依据资源优势，对银杏研究较多，其提取和药理是目前国内外研究的热点和重点。研究资料显示：银杏内酯提取部位主要是银杏叶，但含量较低，在1%左右，甚至更低，这主要与产地、生长环境有关。银杏内酯提取一般需要经过预处理、提取、粗分离、纯化等过程，提取过程复杂。目前，文献报道的银杏萜类内酯的提取方法主要包括柱提取法、溶剂萃取法、超临界提取法及溶剂萃取-柱提取法；药理作用主要包括对血小板活化因子（PAF）的作用、清除自由基、延缓衰老的作用、对中枢神经系统的作用。本文总结近年来银杏内酯研究结果，对于后期研究银杏内酯提取和药理作用进一步探索具有重要的参考意义[4]。

1 银杏内酯的提取方法

目前银杏内酯的提取部位主要是银杏的叶和根，提取方法有溶剂提取法以及超临界流体萃取法、柱提取法等，每种提取法都具有其优缺点。目前，银杏内酯提取技术较为成熟，但由于银杏内酯化合物结构差别较小，分离较为复杂。本文阐述银杏内酯提取方法，为后续提纯分离奠定基础。此外，银杏树生长较为缓慢，资源匮乏，无法满足目前市场庞大的需求量。解决这种矛盾主要是开发合成技术和提升提取率。本文阐述银杏内酯常用提取方法，即溶剂提取法和超临界流体萃取法，以期为银杏内酯的提取方法改进提供参考，增加资源利用率。

1.1 超临界流体萃取法

超临界流体萃取法是兼顾了液体和气体特性的提取方法，通常临界压力和温度都比较低，使用二氧化碳等惰性气体。因此，本方法具有安全、无污染、绿色等优点。这种萃取方法兼有精馏和液-液萃取的特点，操作相对简单，可控性较好，且溶剂可以循环利用，适用于大多数中药中对热敏感物质的提取分离，其主要原理是液态状的超临界流体能将有效成分从物料中提取出来，而后改变体系温度或压力，使超临界流体W气态形式逸出，达到药物成分提取的目的。目前，该方法被应用于银杏内酯的提取中，如张培超[5]对银杏内酯提取方法考查，通过影响因素实验，筛选出最佳的提取条件：萃取压力25 MPa，萃取温度45℃，提取原材料粗细程度为60目，溶剂为100%乙醇，得到了17%左右的银杏内酯B；此外，张玉祥等[6]采用正交试验对超临界流体萃取法的影响因素进行研究，主要影响因素包括压力、夹带剂、温度、提取时间，研究结果所筛选的提取方法银杏总内酯提取率7.6%，高于6%的标准。

1.2 溶剂萃取法

溶剂萃取法是针对中药成分提取最原始、最传统的提取方法，同时，也是当今国内外使用最为广泛的提取方法。该方法的重点是提取溶剂的选择，可以采用单一溶剂萃取或者多种溶剂联合使用，常用于单一溶剂提取的有水、石酸乙酯、醇类等溶剂；溶剂体系一般选用有机溶剂和水形成的混合溶液，常见的提取溶剂体系包括水－甲醇、水－乙醇、水－丙酮等。银杏内酯在溶剂萃取法提取过程中，在有机溶剂浸泡后，根据提取形式的差异，又可以分为渗漉浸渍法、煎煮法和回流提取等。李文东[7]等对提取时间、料液比、提取次数进行研究，筛选出最佳提取工艺，银杏内酯提取率达到0.7%左右；此外，有学者采用正交试验方法研究乙醇提取银杏内酯，筛选出提取方式为回流加热提取，溶剂采用70%乙醇，并通过大孔吸附树脂纯化，最终获得银杏萜类内酯含量为6%以上，符合相关标准，方法稳定可行[8-9]。

2 银杏内酯的药理作用

由于科学技术的不断发展，药学相关研究人员对银杏化学成分有了更多的了解和认识，对银杏内酯的提取和合成取得了重大发现。成分是药理作用的基础，以下是近几年对银杏叶提取物的药理作用的综述，为临床应用提供理论参考。

2.1 对血小板活化因子（PAF）的作用

银杏内酯为银杏提取物的主要成分，其中银杏内酯B 为血小板活化因子（PAF）拮抗剂，且作用最强。血小板活化因子和对应的受体（血小板活化因子受体：PAFR）结合，发挥生物学功能。银杏内酯发挥抗血小板作用的主要原理：通过竞争抑制血小板活化因子和抗体结合。有文献研究表明，银杏内酯具有抑制血小板活性、抗血小板聚集、抗炎、抗动脉粥样硬化及神经保护等作用[10]。

2.2 清除自由基，延缓衰老的作用

李亮[11]通过在H2O2诱导损伤的H9C2心肌细胞模型中加入银杏内酯B，对于损伤细胞的状态具有改善作用，缓解损伤，对抗炎症，提升细胞存活几率。学者认为，其作用的机理是银杏内酯B 提升相关酶活性，从而达到清除自由基的目的，并抑制凋亡蛋白表达，抑制炎症，降低氧化损伤。

2.3 对中枢神经系统的作用

银杏内酯对于中枢神经系统疾病具有良好的治疗作用，有研究发现，作用于大鼠缺血，通过建立相应的病灶模型，并与西药形成对照，结果显示，银杏内酯对于急性不完全性脑缺血大鼠的脑毛细血管通透性及脑含水量均有作用，可改善大鼠大脑中神经行为及动脉阻塞[12]。

3 结论

随着经济的发展和科学技术的不断更新，药学学者对银杏进行了更加深入的了解和分析。人们对银杏内酯的作用有了更加全面的认识，其在医学和食品领域的应用更加广泛，因此，需求量也逐渐增加。但从近几年的研究成果来看，银杏内酯的提取工艺有了一定的发展，但并没有取得突破性进展，其主要表现在：提取工艺缺乏规范性，甚至有的企业为了追求利益最大化，采用稀盐酸代替乙醇进行提取，给用药安全性带来一定威胁。但研究过程中也发现，即使提高产出率同样不能满足市场需求。银杏内酯属于珍惜物种，资源有限，生长缓慢，提升提取技术不能完全解决问题，因此，化学合成技术亦需要进一步优化和发展，从而提升银杏内酯的产量和纯度[13]。

银杏提取物具有较高的治疗和保健作用，能够作为保健品的添加剂。据目前报道，银杏内酯已有相应的医药产品上市，其成分还可进行健康产品的开发。随着经济的发展和人类社会的进步，人类对生命健康更加重视，而心脑血管疾病成为威胁人类生命健康的重大疾病之一，容易发病，且发病后存活率较低。因此，对于银杏内酯提取、药理、临床、合成研究刻不容缓。此外，还应该开发新剂型，提升银杏内酯生物利用度。虽然，银杏内酯的提取和药理作用都取得了一定的研究成果，并且已经广泛应用于临床，但对于其活性机制还有待深入系统研究。药理活性机制主要是权威学者推测，主观性较强。因此，后续研究除解决资源和利用度问题外，还应加快对其药理机制的研究，知其根本，挖掘更多疗效。相信不久的将来会有银杏内酯类药物大量上市，为人类生命健康保驾护航。