一种高效分离畜禽血清的方法

文│李红艳（贵州省绥阳县动物疫病预防控制中心）

蒋宗仁（贵州省绥阳县畜牧渔业站）

在长期实践中发现，畜禽血液采集后，如果畜禽血清分离期间所处的环境温度过低，畜禽血清分离数量将会很少，温度过低甚至会使红细胞破裂并湿气内容物释放入血浆，使血清发生溶血现象，也会使血液中比红细胞比重小的纤维蛋白原不能聚集，发生凝固不全，形成胶冻状样品。这些状态和现象都会影响兽医实验室诊断、检验、检测等分析结果的准确性，也会延误畜禽疫病的即时防控、处置。而相关资料显示，适宜的环境温度（25～37℃）能增加畜禽血清的自然析出。但在畜牧兽医工作中，畜禽血清分离时所处温度环境多在自然环境中，或者在装有试管架的疫苗冷藏箱内，或者在养殖场户室内，这些温度环境很可能达不到所需温度要求。而且优质畜禽血清分离的质量和数量除了温度适宜外，也需要数小时的分离时间（Δt≥1.5小时），在上述温度环境中，等待畜禽血清分离，然后再去采集其他养殖场户的畜禽血液样品或运输到接样地点极不现实，这会给畜牧兽医工作者的采样、送样、检测、监测工作带来诸多不便。

一、操作方法

1.当环境温度t≤10℃时，如果不急需分离畜禽血清，可以在畜禽血液采集前选用2～4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶（500～600毫升）放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，让箱内温度逐步升高，然后再将采集血液放入箱内。

（1）如果将2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1～1.5小时后，应重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。再重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内1.5～2小时后，疫苗冷藏箱内温度又降到25℃左右，此时再重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（2）如果将3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1.5～2小时后，应重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内的温度已降到25℃左右。再重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内2～2.5小时后，疫苗冷藏箱内温度又降到25℃左右，此时再重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（3）如果将4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶2～2.5小时后，重新换4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分离畜禽血清，如上级部门在短时间内需带走血清，或者畜牧兽医工作者在短时间内急需检测血清样品，则在畜禽血液采集前直接将4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1～1.5小时后，重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，因为适度高温能加快畜禽血清的分离，此时疫苗冷藏箱内温度基本维持在37℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥1.5小时后用移液器提取血清即可。

2.当10℃≤环境温度≤20℃时，如果不急需分离畜禽血清，可以在畜禽血液采集前将2～4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶（500～600毫升）放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，让箱内温度逐步升高，然后再采集血液放入箱内。

（1）如果将2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，则在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1.5～2小时后，应重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。在重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内2～2.5小时后，疫苗冷藏箱内温度又降到25℃左右，此时再重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（2）如果将3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，则在放入装有100℃开水的矿泉水瓶2～2.5小时后，应重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已经降到25℃左右。再重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内2～2.5小时后，疫苗冷藏箱内温度又降到25℃左右，此时再重新换3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（3）如果将4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，则在放入装有100℃开水的矿泉水瓶2.5～3小时后，应重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分离畜禽血清，在畜禽血液采集前直接用4瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1.5～2小时后，重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度基本维持在37℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥1.5小时后用移液器提取血清即可。

3.当20℃≤环境温度≤25℃时，如果不急需分离畜禽血清，可以在畜禽血液采集前将2～3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶（500～600毫升）放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，让箱内温度逐步升高，然后再采集血液放入箱内。

（1）如果将2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，则在放入装有100℃开水的矿泉水瓶2～2.5小时后，重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。再重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内1.5～2小时后，疫苗冷藏箱内温度又降到25℃左右，此时再重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（2）如果将3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，则在放入装有100℃开水的矿泉水瓶2.5～3小时后，应重新更换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，此时疫苗冷藏箱内温度已降到25℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。

（3）如果急需分离畜禽血清，在畜禽血液采集前，直接将3瓶装有100℃开水的矿泉水瓶放入带泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1～1.5小时后，重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，让疫苗冷藏箱内温度基本维持在37℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥1.5小时后用移液器提取血清即可。

4.当25℃≤环境温度≤33℃时，如果不急需分离畜禽血清，直接将血液放在只有泡沫试管架的疫苗冷藏箱内，然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥4小时后用移液器提取血清即可。如果畜禽血液在疫苗冷藏箱内静置过夜，第二天再用移液器提取，血清质量和数量更佳。如果急需分离畜禽血清，直接用2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶（500～600毫升）放入带试管架的疫苗冷藏箱内，在放入装有100℃开水的矿泉水瓶1～1.5小时后，重新换2瓶装有100℃开水的矿泉水瓶到疫苗冷藏箱内，让疫苗冷藏箱内温度维持在37℃左右。然后等畜禽血液进入疫苗冷藏箱内Δt≥1.5小时后用移液器提取血清即可。

二、注意事项

（1）装有畜禽血液的疫苗冷藏箱在运输途中应轻拿轻放，尽量避免剧烈晃动，否则会使红细胞内的化学物质释放入血浆，并引发溶血现象，降低血清质量，影响畜禽血清学试验分析结果的准确性。

（2）为避免烫坏血液、血清，装有100℃开水的矿泉水瓶应和采集的血液样品保持5厘米以上的距离。

（3）为了使析出的畜禽血清质量和数量更佳，如果不急需带走血清或用于紧急血清学检测，畜禽血液尽量放在疫苗冷藏箱内静置过夜，第二天再用移液器提取血清。

三、小结

该畜禽血清分离方法简单易行、使用灵活、能随机应变所处环境温度，为畜禽血液采样人员随时可以在不同采样地点间移动，采集更多畜禽血液样品提供方便，提高了工作效率。该方法几乎无经济成本却能产生更高质量和数量的澄清、无溶血、无异物、稍黏稠的优质畜禽血清，提高了畜禽血清析出效率，为畜禽血清学实验室诊断、检测、检验提供了更可靠的原料保证，加快了畜禽动物疫病检测、监测进程，使检测、监测结果更精准、更及时、更快速地应对和处置畜禽疫情。