嗜酸性粒细胞在肿瘤免疫微环境中的作用研究进展

王思羽，王宽松

（1.中南大学湘雅医学院，湖南 长沙 410013；2.中南大学基础医学院病理学系，湖南 长沙 410008）

近年来，对于恶性肿瘤的发生发展机制及对免疫治疗的应答反应，逐渐由独立的肿瘤组织扩展到肿瘤组织和肿瘤免疫微环境（tumor immune microenvironment，TIME）的联合作用，其中免疫和炎症因素具有关键作用，对各组分的了解和认知有助于探索新的治疗策略、开发合适的生物标志物模型、避免免疫治疗耐药[1]。针对TIME 中一些组分的预后及治疗意义已有一系列研究，如对于中晚期胃癌患者，具有更高比例CD8+CD279+淋巴细胞的TIME 对免疫治疗显示更好疗效[2]；胃癌黑色素瘤小鼠模型中，过表达IL-12 抑制CD4+T 细胞表面PD-1 的表达，起控制肿瘤生长作用[3]；前列腺癌中，M2 型巨噬细胞的浸润降低雄激素受体抑制剂治疗的疗效，造成肿瘤耐药[4]；生物信息学分析表明，TIME 中IL-33 上调IFN-γ 表达，改善多种肿瘤预后[5]。免疫治疗如免疫检查点调节剂、过继免疫细胞治疗等，其靶点、标志物和治疗效果受TIME 影响[6]。嗜酸性粒细胞（eosinophils，EOS）是白细胞的一种，成熟后核常分2～3 叶，胞质含粗大的橘红色嗜酸性颗粒，内含能分解组胺的组胺酶、灭活白三烯的芳基硫酸酯酶、破坏寄生虫的阳离子蛋白等，通常在过敏反应及寄生虫感染中起作用，也参与TIME 的组成[7]。以往针对TIME 组分和肿瘤发展、治疗的研究多关注巨噬细胞、淋巴细胞等，对EOS 的研究主要集中在EOS 与TIME 中各组分，如肿瘤细胞、血管淋巴管、免疫细胞的相互作用，以及肿瘤患者EOS 水平对预后的影响分析，而对EOS 影响疗效和预后的机制及EOS 对于治疗的意义少有相关研究。因此，本文对EOS 的生理功能、对不同肿瘤的影响、在TIME 中参与的相互作用作一综述，以提供针对TIME 中EOS 的免疫治疗思路和策略。

1 EOS的形成、特殊组分与生理学功能

1.1 EOS的发生与迁移

EOS 由骨髓中的CD34+多能干细胞分化而来，其分化、成熟受多种转录因子和细胞因子调控，其中最重要的是转录因子GATA-1 和细胞因子IL-5、IL-3 和粒细胞- 巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GMCSF）也在髓样前体干细胞向EOS 的分化中起重要调控作用[7]。成熟EOS 释放入血液，随后大多迁移到组织中，生理状态下以呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜组织为主，炎症状态下也可迁移至肺和皮肤，该过程受多种细胞因子、黏附分子和趋化因子及其他介质的调控[8]。

EOS 的渗出和迁移分为激活、血管内皮上的滚动、黏附、和向组织的趋化。选择素介导EOS黏附；IL-4 和IL-13 导致血管内皮细胞黏附分子1（vascular cell adhesion protein 1，VCAM-1） 表达增加， 随后由EOS 表达的黏附分子β1 整合素（integrins β1，VLA-4）介导，黏附到血管壁。活化的2 型辅助性T 细胞（T helper type 2，Th2） 释放IL-3、IL-5、IL-13 等细胞因子，提高嗜酸性粒细胞趋化因子、膜辅蛋白（monocyte chemotactic protein，MCP）、 T 细胞正常表达和分泌刺激因子（regulation on activation normal T-cell expressed and secreted，RANTES）的表达，这些介质参与EOS 的组织迁移。除此之外，包括肥大细胞、角质形成细胞、皮质细胞和成纤维细胞在内的多种细胞分泌一系列介质对EOS 起趋化作用，包括脂质介质，如血小板激活因子（platelet activating factor，PAF)、白三烯B4、C4、前列腺素（prostaglandin）D2、补体因子5（complement factor 5）等。目前一些相关疾病的新治疗方法是基于抑制上述过程[9]。EOS 释放的颗粒内容物，可引起组织损伤，促进炎症进展，也可导致和加重过敏反应[10]。因此，EOS 具有重要的生理学功能，是过敏反应和免疫反应等过程中极为重要的细胞。

1.2 EOS所含颗粒及可溶成分

EOS 胞内主要有两种类型的颗粒，即初级颗粒和特殊颗粒，颗粒中的大量碱性蛋白质使EOS胞质呈嗜酸性。早幼粒细胞阶段出现EOS 初级颗粒，含有Charcot-Leyden 结晶蛋白和疏水蛋白半乳糖凝集素10（galection-10），后者可能在Treg 介导的免疫调节中起作用[11]。特殊颗粒本质为特化的溶酶体，携带大量细胞毒性碱性蛋白，主要碱性蛋白（major basic protein，MBP）位于颗粒的核心，其外围基质含嗜酸性粒细胞源性神经毒素（eosinophil-derived neurotoxin，EDN）、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophil cationic protein，ECP）和嗜酸性粒细胞过氧化物酶（eosinophil peroxidase，EPX）及一系列细胞因子、趋化因子[7]。MBP 通过干扰细胞膜表面的电稳态发挥细胞毒性作用，最终导致膜通透性改变，同时MBP 也是肥大细胞脱颗粒的触发因素之一；EPX 促进过氧化物产生，介导病原体的裂解。体外实验证明，EDN 具有抗人免疫缺陷病毒活性[12]，EDN 和ECP 可剂量依赖性地降低呼吸道合胞病毒[13]和甲型流感病毒[14]的感染性。同时EDN 和ECP 会损伤脑和外周神经的轴索和髓鞘，对中枢和周围神经系统具有神经毒性[15]，ECP 还可诱导小脑颗粒细胞和星形胶质细胞凋亡[16]；EPX 促进过氧化物产生，介导病原体的裂解。这些细胞毒性蛋白在抗感染反应中对抗并杀灭病原体，造成宿主组织损伤，且具有潜在的抗瘤作用。EOS 含脂质体，合成血栓素、白三烯、前列腺素等花生四烯酸衍生物，在气道炎症和急性超敏反应中起作用[10]。EOS 还可分泌神经营养因子如神经生长因子（nerve growth factor，NGF），神经肽如P 物质，血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP），如IL-3、IL-4、IL-31，趋化因子如eotaxin、RANTES、PAF 等[9,17]，这些可溶成分介导细胞间的信号传递，并起活化和趋化作用。

2 EOS在TIME中的作用

TIME 由肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞及其分泌的基质蛋白、血管内皮细胞、免疫细胞、及一系列细胞因子、趋化因子、细胞外基质组成[18]。肿瘤细胞通过基因突变和生长信号自分泌，增强肿瘤前信号通路的表达，激活一系列信号级联反应，促进异常细胞因子分泌，从而招募免疫细胞和改变其表型、活性[19]。基质细胞、周细胞、肌成纤维细胞等与免疫细胞表现旁分泌相互作用，通过NOTCH，VEGF，TGFβ 和JAK/STAT 信号传导来塑造微环境[20]。TIME 的组成会影响肿瘤的发展与疗效，例如乳腺癌实验模型中，双酚A 通过干扰肿瘤免疫微环境中细胞和细胞因子变化，诱导乳腺癌转移[21]；卵巢癌免疫检查点抑制治疗的疗效受TIME 和肿瘤组织基因组异质性影响[22]；对于非小细胞肺癌，不同的基因突变亚型导致不同的TIME 组成特征，对其预后具有预测价值[23]。微环境中各细胞成分营养和代谢的相互干扰也会影响肿瘤发展，且针对特异度代谢途径具有治疗意义[24]。因此，肿瘤组织不是孤立的，有关肿瘤发展及治疗方法的研究应关注其所在的TIME 整体，包括各组成成分的表型、活性和相互作用。肿瘤相关组织嗜酸性粒细胞（tumor-associated tissue eosinophilia，TATE）作为TIME 的组成成分，参与塑造TIME，并与肿瘤组织具有广泛的相互作用。一方面，EOS 直接作用于肿瘤细胞，或者通过对免疫细胞、细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的调节及影响肿瘤组织血管生成，发挥间接作用；另一方面，TIME 通过对EOS 免疫表型的塑造，细胞因子及其他介质对EOS 的作用，促进EOS 的增殖存活，趋化至肿瘤相关组织，增强或削弱抗原呈递功能[25]，促进或抑制EOS 募集其他免疫细胞[26]，其具体效应因不同TIME 而异。

2.1 EOS对不同肿瘤的作用

不同来源、不同解剖位置、原发或转移性及不同疾病阶段肿瘤的循环EOS 水平不同，EOS 组织浸润情况也不一样，EOS 对肿瘤组织发挥促进或抑制的作用，其数量与肿瘤的症状及预后正相关或负相关。按肿瘤形态，可分为实体瘤和非实体瘤，后者多为淋巴造血系统恶性肿瘤[27]。

非实体瘤主要包括造血系统肿瘤，2021年世界卫生组织将其分类为前体淋巴造血系统肿瘤、成熟B 细胞肿瘤、成熟T 细胞和NK 细胞肿瘤、霍奇金淋巴瘤及组织细胞和树突状细胞肿瘤[28]。EOS在不同性质恶性肿瘤中来源不同，在干细胞性和骨髓生成性肿瘤中，EOS 来源于恶性克隆；而在淋巴肿瘤和反应性状态中，多由相关细胞因子触发增殖和聚集[29]。Verstovsek 等[30]针对标准疗法无效的高嗜酸性粒细胞综合征、慢性嗜酸性粒细胞白血病，采用CD52 抗体降低外周血EOS 绝对计数和百分比，起到一定疗效，EOS 是上述疾病的发病机制之一。Andersen 等[31]发现，以样本EOS 水平中位数0.16×109/L 为参考值，血液EOS 计数向两端偏离均与升高的造血系统恶性肿瘤病死率相关，具体表现为EOS>0.16×109/L 时与骨髓增殖性肿瘤相关，而小于0.16×109/L 与急性髓系白血病、骨髓增生异常综合征相关性更强。肥大细胞白血病（mast cell leukemia，MCL）是系统性肥大细胞增多症更具侵袭性的恶性形式，在系统性肥大细胞增多症中多伴有外周血EOS 增加，EOS 增 加MCL风险[32]。Wong 等[33]通过体外培养多发性骨髓瘤细胞系，发现EOS 通过非依赖于外泌体或增值诱导配体（a proliferation-inducing ligand，APRIL），且独立于IL-6的方式促进恶性浆细胞增殖。 霍奇金病（Hodgkin's disease，HD）中外周血EOS 上升被认为是良性预后因素[34]，但Andersen 等[35]2013年的一项研究显示，严重EOS 增多症发生霍奇金淋巴瘤风险显著增加。而淋巴结EOS 与预后相关性存在争议[36]。组织EOS 增多症仅在HD 的部分亚型中出现，在结节硬化型HD 中为不良预后的指标[37]。HD采用PD-1 抑制治疗，高EOS 水平对应更长的无进展生存期[38]。对于非霍奇金淋巴瘤，EOS 水平可作为抗CD19 嵌合抗原受体T 细胞（chimeric antigen receptor T-cells，CAR-T）免疫治疗的生物标志物，高EOS 水平预示更好疗效和预后[39]。但又有研究[40]表明，非霍奇金淋巴瘤的一种，弥漫大B 细胞淋巴瘤中，EOS 浸润程度高者预后不良（表1）。

表1 EOS在非实体瘤中上/下调情况及预后、临床价值Table 1 Upregulation/downregulation,and prognostic and clinical value of EOS in non-solid tumors

实体瘤体现为有形肿块，可触及或可通过CT扫描、X 线摄片等方式检测到。一些临床研究观察到EOS 与预后存在一定相关性，体外试验确认了EOS 对实体瘤具有促进或抑制的作用，在不同类型实体瘤中具有不同的表现。近年来一系列研究表明，口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）中TATE 与肿瘤发展及预后具有一定关联，但统计学分析得出的结论不尽相同。2002年Dorta等[41]评估分析OSCC 患者TATE 程度对预后的影响，认为强烈的TATE 增多是OSCC 预后的独立有利因素。2009年Oliveira 等[42]在 对43 例OSCC患者 研 究分析中发现，相对于早期患者较低的TATE 水平，晚期患者TATE 明显升高，但结果显示TATE 与OSCC 患者5年或10年生存率无明显关联。2012年Oliveira 等[43]对临床患者评估表明，TATE 大量浸润是OSCC 患者发生颈部淋巴结转移的显著特征，可作为临床预测因素。2015年Rakesh 等[44]研究发现，强TATE 可作为OSCC 局部区域复发的预测指标，2018年Martinelli-Kläy 等[45]对口腔上皮内瘤变和OSCC 的评估分析得出类似结论，同年Peurala 等[46]对口腔和唇鳞状细胞癌的分析则得出相反结论，认为高TATE 是有利预后的标志。2019年de Paz等[47]、2020年Siddiqui 等[48]均 提 出OSCC 中 高TATE与较低生存率有关，而Sharma 等[49]认为TATE 起抗肿瘤作用，2021年Nishikawa 等[50]认为，头颈部鳞状细胞癌中高TATE 是良好预后的生物标志物。2022年简丹妮等[51]分析头颈部鳞状细胞癌中免疫细胞浸润组成，认为高EOS 构成比与较短生存期有关，李腾艳等[52]对OSCC 患者白细胞表达趋势分析得出类似结论。截然不同的研究结果提示EOS在口腔鳞癌中作用仍不明确，导致此现象的原因可能与EOS 浸润强度评判标准不同、纳入研究的病例数目不足、是否伴有HPV 感染以及分子类型是否一致有关，EOS 对OSCC 的确切影响尚有待大样本、多分层的研究来进一步证实。Lagisetty 等[53]在食管上皮异型增生和食管腺癌进展的各阶段均观察到EOS 水平下降，认为这些免疫细胞的丢失促进了食管腺癌的进展。de Salvo 等[54]借助小鼠模型，发现IL-33 诱导下出现EOS 扩增和肿瘤组织局部浸润，并促进了IL-33 阳性M2 型巨噬细胞扩增，导致慢性胃炎的肠上皮化生，即胃癌的癌前病变。Caruso 等[55]通过观察进展期胃癌超微结构，观察到EOS 对肿瘤细胞有促进自噬的作用，且凋亡的EOS出现脱颗粒[56]，颗粒沉积在ECM 和肿瘤细胞中[57]，影响TIME 的构成与功能。EOS 在结肠癌中表现抗肿瘤作用。Harbaum 等[58]发现肿瘤周围EOS 和肿瘤组织中EOS 均与更低TNM 分期、更少的肿瘤血管生成和更高生存率相关，其中肿瘤周围EOS 为独立预后因素；Prizment 等[59]得出类似结论。EOS 对结肠癌起抑瘤作用，人胚胎干细胞诱导的EOS 可抑制HCT116 结肠癌细胞在免疫缺陷小鼠体内生长、延长小鼠中位生存时间，并对已形成的肿瘤起抑制作用，其机制可能与EOS 释放EPX、EDN、颗粒酶A 有关[60]。对于结肠癌的早期诊断，一项回顾性分析[61]表明，早期原发性结肠癌患者血EOS、淋巴细胞、中性粒细胞水平均高于健康人，且这三者相互呈正相关，提示血EOS 水平可用于结肠癌的早期筛查。在肝癌中，高TATE 可增强抗肿瘤免疫。IL-33 诱导的EOS 升高可增加NK 细胞活性，延长总生存期[62]。一项对使用索拉菲尼治疗肝细胞癌的患者的基线EOS 水平评估[63]显示，基线EOS水平是生存结局独立预后因素，低EOS 水平预示不良预后。过表达EOS 趋化因子的肝癌组织中，较高的EOS 活性对应较好预后，且EOS 的抗瘤作用与IL-5 的上升有关，对肿瘤生长的抑制作用在阻断IL-5 受体后减退[64]。胰腺癌中高循环EOS 水平亦与较好预后相关[65]，但是TATE 除了增强B 细胞功能外，却又促进组织纤维化和组织重塑，介导了癌症发展。肺癌包括肺原发癌和肺转移癌，后者以乳腺癌肺转移较为多见。非小细胞肺癌中EOS等免疫细胞的存在起延长生存期的作用[66]，在免疫检查点抑制剂治疗中高EOS 水平可作为更好的临床结局预测生物标志物[67]。肺部结节的良恶性判定有利于早期诊断肺癌，血液指标结合影像检查、病理诊断结果表明，血EOS 升高是恶性肺结节的独立危险因素[68]。血EOS 计数升高是慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）患者合并肺癌的危险因素，两者症状具有一定重叠，因此血EOS 的计数有利于肺癌的诊断和早筛[69]。对乳腺癌的组织EOS 浸润水平与癌症结局的评估发现，部分肿瘤组织出现TATE 增高，与无病生存期有关，而与总生存期无关[70]。乳腺癌组织EOS 通过血管重塑，介导细胞毒性T 淋巴细胞相关蛋白 4 （cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4，CTLA4）阻断的抗肿瘤作用，且这种作用依赖于T 淋巴细胞和干扰素的产生[71]，而循环EOS 可作为乳腺癌的预后标志物，提示更低的复发率[72]。然而，2022年一项研究[73]认为，EOS-淋巴细胞比率与预后呈负相关，EOS 产生的血管内皮生长因子促进肿瘤血管生成，而相应的淋巴细胞减少导致免疫功能下降。对于宫颈癌，TATE 与癌症进展呈正相关，而外周血EOS 水平未显示该种关系[46]。黑色素瘤中EOS 抑制肿瘤生长和肺转移[74]，较高的EOS 及ECP 的血清水平与生存期延长相关，且可作为免疫治疗良好疗效的标志物[75]。腹腔注射IL-33 的黑色素瘤模型小鼠肿瘤生长受抑制，这种效应由IL-33/ILC2/EOS 轴介导[76]。对纤维肉瘤小鼠模型的实验表明，EOS 在体内降低甲基胆蒽诱导的纤维肉瘤的发生率，在体外对其具有杀伤作用[77]。 胶质母细胞瘤 （glioblastoma multiforme，GBM）的免疫活性肿瘤和免疫惰性肿瘤主要区别在于后者具有较低EOS 浸润，呈现免疫抑制微环境，因此EOS 在GBM 的肿瘤免疫中起重要作用，与预后改善相关[78]。在甲状腺乳头状癌中也表现为抗瘤作用[79]（表2）。

2.2 EOS对TIME的影响

TIME 中的EOS 具有多效性，甚至包括相互冲突的功能，其抗肿瘤活性由不同TIME 决定，而非EOS 内在差异决定[80]，EOS 在TIME 中通过直接或间接的方式作用于癌组织。

EOS 释放颗粒物质和可溶介质直接作用于肿瘤细胞，介导细胞溶解、胞膜破坏和细胞凋亡，EOS 也参与ADCC 作用，并具有接触依赖性细胞毒性。EOS 的特殊机制如外泌体分泌、胞外陷阱释放也具有一定作用。体外实验证明EOS 对肿瘤细胞系的直接相互作用。EOS 对B 淋巴细胞具有直接的杀瘤活性，CD2 亚家族受体2B4 激活偶联后，EPX、IFN-γ、IL-4 释放损伤和溶解肿瘤细胞[81]。人外周血EOS 与结直肠癌细胞系共培养，EOS 释放的ECP、EDN 等颗粒物质被结直肠癌细胞所内化，破坏胞膜脂双层；TNF 表现剂量依赖性毒性作用，颗粒酶A（granzyme A，GmzA）促进肿瘤细胞凋亡和坏死，并增强ECP 的细胞毒性，且杀瘤活性以瘤细胞和EOS 的黏附为始动条件，整合素CD11a/CD18 参与黏附过程[60]。ICAM1/LFA1 也 是EOS 与 结直肠癌细胞黏附和发挥杀瘤活性的重要黏附分子，IL-18 可上调其表达[82]。EOS 的裂解细胞作用具有高度特异度。实验表明，来源于人胚胎干细胞（human embryonic stem cell，hESC）、人诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells，iPSC）的EOS 在体外对结直肠癌、肝癌、乳腺癌细胞体现杀瘤活性，对间充质干细胞、胚胎成纤维细胞、脐带血管和内皮细胞无明显细胞毒性，这种特异度的细胞毒作用可能是由于EOS 的细胞黏附依赖性和靶向脱颗粒[60]，即在IL-33 介导ECP、EPX、颗粒酶B 等极化至免疫突触并定向释放，从而使细胞溶解作用具有特异度[83]。除直接的杀伤作用外，嗜酸性粒细胞暴露于CSF 或GM-CSF 可激活针对胸腺瘤细胞以及肥大细胞瘤细胞的ADCC 作用[84]。

EOS 是复杂的相互作用网络的一部分，该网络涉及大量具有免疫活性和非免疫活性的细胞和组织，包括先天淋巴细胞如固有淋巴样细胞（innate lymphoid cell-2，ILC-2）、Th2 细胞、浆细胞以及肥大细胞等，EOS 与多种免疫细胞存在双向细胞因子信号的相互激活及调控。ILC-2 是EOS IL-5的主要来源，而EOS 又可以通过释放IL-4 来维持ILC-2 的活化[85]。ILC-2 一方面产生GM-CSF，驱动EOS 在肿瘤组织的募集和激活，另一方面表面表达PD-1，后者抑制ILC-2 的抗肿瘤反应，因此阻断PD-1 通过促使ILC-2 和EOS 的浸润，起到有效的抗肿瘤作用[75]。黑色素瘤模型中，IL-33/ILC2/EOS 轴抑制肿瘤生长，而肿瘤来源的乳酸降低ILC2 的功能，从而降低EOS 水平和患者生存率[76]。

TIME 中的T 细胞活化需要EOS，Arnold 等[86]发现，EOS 缺陷小鼠皮下接种结直肠癌细胞，TATE水平与肿瘤生长成反比，且这种作用由扩增的CD4+/CD8+T 细胞介导。GM-CSF 升高EOS 的干扰素调节因子（interferon regulator，IFR）-5 表达水平，进而促进肿瘤组织中T 细胞的募集，这种效应被IL-10 所拮抗，因此在GM-CSF 和IL-10 的调节下，EOS 起激活或抑制T 细胞效应，调节微环境平衡。通过局部辐射或IL-5 注射增强肿瘤组织EOS 浸润，可以改善CD8+T 细胞的募集和免疫治疗的疗效[87]。除CD4+/CD8+T 细胞外，EOS 耗竭削弱T 辅助细胞1 型（T helper type 1，Th1） 反应并增强肿瘤负荷[86]。EOS 合成Th1 型细胞因子IFN-γ、Th2 型细胞因子IL-4、IL-5、IL-10，调节Th1 型和Th2 型免疫反应[88]。EOS 参与CAR-T 免疫治疗，Jia 等[39]在小鼠模型中证明，施用CAR-T 免疫疗法的B 系非霍奇金淋巴瘤患者中，较高的基线EOS 计数对应着更好的疗效，提示EOS 提高CAR-T 抗肿瘤疗效，Lai等[89]通过构建小鼠模型证明了在实体瘤的免疫治疗中，EOS 与CAR-T 的协同作用。

EOS 介导了佐剂诱导的脾B 细胞早期活化，MHC II 交联引起的钙动员反应和抗原特异度IgM 产生[90]。对于正常B 细胞，EOS 调节其存活、增殖和Ig 分泌，且外周血EOS 水平与B 细胞数量直接相关[91]。多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM） 中恶性浆细胞生物学行为受所在的骨髓微环境高度影响，其中EOS 促进其增殖。先前小鼠实验报道表明，EOS 通过分泌IL-6 和APRIL，支持骨髓中的长寿命PC 存活[92]。而Wong 等[33]通过MM 细胞系和EOS 的体外共培养实验，认为EOS 是一种可溶性因子，而非外泌体或微粒成分，通过独立于APRIL和IL-6 的机制介导EOS 诱导的增殖，所涉及的信号通路和分子成分仍待进一步研究。

尽管肥大细胞及其介质在实验性和人类肿瘤中的作用仍然存在争议[93]，肥大细胞和EOS 之间广泛的双向作用可以影响两者的功能及肿瘤血管、淋巴管生成。活化的肥大细胞释放组胺、腺苷、类胰蛋白酶、PAF 及IL-5 作用于EOS，EOS 分泌ECP、MBP 等阳离子蛋白作用于肥大细胞，此外，两者均可分泌干细胞因子（stem cell factor，SCF）、骨桥蛋白、GM-CSF、LTC4、PGD2、神经生长因子（nerve growth factor，NGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF-A）。总之，在超敏性疾病和某些实体肿瘤及血液肿瘤中，可以发现肥大细胞和EOS 的分布和作用非常接近[94]。

常规的树突状细胞（dendritic cells，DC）及浆细胞样DC 与肿瘤的良好预后相关，EOS 起诱导DC成熟的作用，参与DC 的募集、激活和功能调节。EOS 释放MBP，增加CD80 等表面标记来诱导DC 成熟[95]。在过敏性肺部炎症的小鼠模型中，EOS 是CCL6 （CCR1 配体） 和巨噬细胞炎症蛋白-1γ（macrophage inflammatory protein-1γ，MIP-1γ）的最主要来源[96]。DC 的肺浸润及CCR1 在DC 上的高表达，与EOS 产生CCL6 和MIP-1γ 同时发生，提示两者显著相关[96]。因此，活化的肺EOS 可能是将CCR1+树突状细胞吸引到炎症部位的关键因素。

实体瘤发展伴随血管重塑和新生成，EOS 产生VEGF、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、骨桥蛋白、CXCL8、MMP、TGF-β等介质，促进血管生成[97-98]，VEGF-A、B 主要介导血管生成，VEGF-C、D 主要介导淋巴管生成。由于EOS 优先浸润于缺氧区域，因此缺氧信号优先传导至缺氧区域，保证肿瘤组织血供而维持其生长[99]。

上皮- 间充质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）与肿瘤的侵袭、耐药、转移密切相 关。EOS 产生的TGF-β 和MMP 是促进EMT 发生的主要介质，在嗜酸性粒细胞性食管炎中促进上皮下纤维化，通过过度产生细胞外基质和纤维沉积促进基质重塑[100]，这种效应在肿瘤组织中也存在。

2.3 TIME对EOS的表型塑造及功能影响

一系列研究表明，EOS 具有刺激依赖性的细胞因子释放谱和表面受体/配体表达谱，不同刺激来源的EOS 具有不同的生物学特性和功能，EOS 与TIME 之间存在广泛的相互作用。TIME 中多种细胞因子和趋化因子作用于EOS，包括胸腺基质淋巴生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3（CCL11、CCL24、CCL26）、IL-3、IL-5、IL-33、GM-CSF、TSLP 等，不同刺激造成EOS 多效性的功能。

Xie 等[25]验证了宫颈癌发展过程中EOS 增加背后机制。实体瘤的发展伴随内部缺氧，促使宫颈癌细胞释放TSLP，一方面，CCL7 分泌增加，趋化并扩增EOS，并通过提高其表面Ki-67 和降低Fas 而促进EOS 增殖存活；另一方面降低EOS 表面共刺激分子表达而削弱其抗原呈递功能，具有这种表型的EOS 促进宫颈癌细胞增殖并抑制其凋亡。

近年来一系列研究表明，IL-33 趋化的EOS 募集发挥促肿瘤和抗肿瘤的两方面作用。乳腺癌的肺转移模型中IL-33 趋化EOS 等免疫细胞趋化至肺，但具有两方面的作用。一方面，促进EOS 和CD8+T细胞在肺部产生CCL5，并促进巨噬细胞产生TNF-α从而增加ST2 受体在NK 细胞上的表达，促进NK 细胞的全身激活和局部募集，促进肿瘤排斥反应[101]；另一方面，成纤维细胞来源的IL-33 促进EOS 等免疫细胞的肺部募集，促进Th2 型免疫和肺部的炎性反应，从而促进乳腺癌的肺转移[26]。IL-33 对黑色素瘤具有两方面的作用，一方面，通过促进EOS和NK 细胞的肺部募集增强抗肿瘤免疫，另一方面，降低CD8+T 细胞杀瘤活性和增强Treg 免疫调节作用，促进黑色素瘤肺转移瘤的生长[102]。实验表明，IL-33 和PD-1 阻断剂的联合使用增强ILC-2 和EOS 的脾和肺部浸润而起抗肿瘤效应[75]。

IL-3、IL-5、IL-33 均为EOS 激活剂，但所介导的EOS 活化结果有一定差异。2019年Angulo 等[102]实验表明，相比于IL-3、IL-5，IL-33 活化的EOS 趋化性相对较低，而EOS 黏附性及CD18、CD16b、CD66b 等表面标志物的表达与前者相当。

3 小 结

综上所述，EOS 是TIME 中重要的效应细胞和调节细胞，一系列研究表明EOS 在不同类型TIME中具有促肿瘤和抗肿瘤的双重作用。但是，在同一类肿瘤中，EOS 在外周血中的升高或降低及组织浸润情况并非是确定的，这与样本量和实验设计有一定关系，如目前共培养实验选用的EOS 来自氧供丰富、pH 中性的外周血，而TIME 中EOS 多处于缺氧、酸性和代谢产物积累的环境中，不同环境对EOS 表型的塑造可能是导致实验结果不一致的原因。除此之外，近年国内外研究多集中在EOS水平的诊断价值、预后价值，而EOS 促肿瘤或抗肿瘤表型的确切机制和相关信号通路尚不明确。在研究形式上多为回顾性分析或追踪评估，而组织实验、动物模型、临床试验较少。有关EOS 在TIME 中的作用机制尚待进一步的探讨，明确相关的机制有助于相关治疗策略的提出和药物的研发，具有重要的临床意义。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。