高效液相色谱法测定悬浮种衣剂40%溴酰·噻虫嗪

2022-05-31高青环路朝阳李俊玲袁竹青盛治喻

河南化工 2022年4期

高青环，路朝阳，李俊玲，袁竹青，盛治喻，祝捷

(河南省化工研究所有限责任公司，河南郑州 450052)

溴氰虫酰胺又称氰虫酰胺，是一种新型的邻氨基苯甲酰胺类杀虫剂，通过激活靶标害虫的鱼尼丁受体二防治害虫，对哺乳动物和害虫鱼尼丁受体有显著的选择性差异，对非靶标节肢动物有很好的选择性，大大提高了其环境安全性[1]。溴氰虫酰胺是杜邦公司继氯虫酰胺之后成功开发的第二代鱼尼丁受体抑制剂类杀虫剂，通过改变苯环上的各种极性基团而成，作用更高效，适用作物更广泛，可有效防治鳞翅目、半翅目和鞘翅目害虫。噻虫嗪，化学名称为3-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-5-甲基-1，3,5-恶二嗪-4-基叉(硝基)胺，是一种第二代烟碱类高效低毒杀虫剂，对害虫具有胃毒、触杀及內吸活性，用于叶面喷雾及灌根处理。其施药后迅速被內吸，并传导到植株各部位，对刺吸式害虫如蚜虫、飞虱、叶婵、粉虱等具有良好的防效作用[2-5]。

目前40%溴氰虫酰胺·噻虫嗪悬浮种衣剂国内还未见关于高效液相色谱的分析方法。本文采用高效液相色谱法，使用反相C18柱对试样中的溴氰虫酰胺和噻虫嗪进行定量分析，该方法操作简便、分析速度快，精密度和准确度均符合分析要求，可以满足常规分析和生产中的质量控制。

1 实验部分

1.1 试剂和溶液

甲醇，色谱纯；水，二次蒸馏水；溴氰虫酰胺标准品，质量分数≥99.4%，上海市农药研究所；噻虫嗪标准品，质量分数≥98.6%，上海市农药研究所；40%溴氰虫酰胺·噻虫嗪悬浮种衣剂，金农田氏农药实验厂。

1.2 仪器

仪器：Agilent1260高效液相色谱仪；紫外检测器；Agilent Chemstation色谱工作站；色谱柱，ZORBAX SB-C18，5 μm，150 mm×4.5 mm；超声波清洗器；过滤器，过滤膜孔径0.45 μm。

1.3 色谱操作条件

流动相：甲醇-水(体积比55∶45)；柱温：室温；检测波长：250 nm；流动相流速：1.0 mL/min；进样体积：5.0 μL；保留时间：噻虫嗪约2.16 min，溴氰虫酰胺约6.4 min。溴氰虫酰胺和噻虫嗪标准品液相色谱图见图1。40%溴氰虫酰胺和噻虫嗪FS液相色谱图见图2。

图1 溴氰虫酰胺和噻虫嗪标准品液相色谱图

图2 40%溴氰虫酰胺和噻虫嗪FS液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1标样溶液的配制

分别准确称取溴氰虫酰胺标准品0.013 6 g(精确至0.000 2 g)，噻虫嗪标准品0.012 8 g(精确至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇置于超声波清洗器中超声溶解，冷却至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，备用。

1.4.2试样溶液的配制

称取0.062 0 g样品(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇置于超声波清洗器中超声溶解，冷却至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，过滤，备用。

1.4.3测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各相对响应值，待相邻两针的相对响应值变化<1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.5 计算

将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液的峰面积分别进行平均，按下式计算溴氰虫酰胺和噻虫嗪的质量分数(X)。

式中：A1为标样溶液中溴氰虫酰胺(或噻虫嗪)峰面积平均值；A2为试样溶液中溴氰虫酰胺(或噻虫嗪)峰面积平均值；m1为溴氰虫酰胺(或噻虫嗪)标样的质量，g；m2为试样的质量，g；P为标样中溴氰虫酰胺(或噻虫嗪)质量分数，%。

2 结果分析

2.1 流动相的选择

为了实现溴氰虫酰胺和噻虫嗪的有效分离，先后试验了甲醇-水不同配比流动相进行反复试验，最后确定甲醇-水(体积比55∶45)为试验的流动相。溴氰虫酰胺和噻虫嗪分离效果好，峰形对称，保留时间适中，可以满足分析要求。

2.2 检测波长的选择

通过Agilent 1260高效液相色谱仪的紫外光谱采集功能，经紫外光谱扫描噻虫嗪在225～270 nm有很好的吸收，溴氰虫酰胺在210、250 nm均有很好的吸收，为了保证溴氰虫酰胺和噻虫嗪都有较好的吸收，选用250 nm为检测波长。噻虫嗪紫外吸收图见图3。溴氰虫酰胺紫外吸收图见图4。

图3 噻虫嗪紫外吸收图

图4 溴氰虫酰胺紫外吸收图

2.3 方法线性关系的测定

分别准确称取溴氰虫酰胺标准品0.013 6 g(精确至0.000 2 g)，噻虫嗪标准品0.012 8 g(精确至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容后，用移液枪分别准确移取2.0、4.0、10.0、20.0、30.0 mL于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，按上述操作条件进行测定，以标品质量(μg)为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(见图5、图6)，得线性回归方程为：噻虫嗪y=599.8x+3.5898，相关系数为1；溴氰虫酰胺y=845.90x+17.724，相关系数为0.999 74。